專利名稱：21(r)阿加曲班的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種直接凝血酶抑制劑21 (R)阿加曲班的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
1978年日本Mitsubishi化學(xué)公司S. Okamoto等首次報(bào)導(dǎo)了阿加曲班 (Argatroban) —水合物抗凝血酶活性US 4 101 653。隨后20多年期間，眾多研究者對(duì)阿加曲班的生物活性及作為醫(yī)藥的價(jià)值進(jìn)行了深入研究。1981年，S. Okamoto在動(dòng)物體內(nèi)將該藥與肝素進(jìn)行了比較Okamoto，S. et al.，Biochem. Biophys. Res. Commun. 101， 440(1981)；T. Kumoto等對(duì)其立體選擇活性進(jìn)行了報(bào)導(dǎo)Kumada，Τ. et al.，Thromb. Res. 24,285(1981)；1984 年，R. Kumato 進(jìn)行了臨床血液透析評(píng)價(jià)Kikumoto，R. et al.， Biochemistry 23,85(1984)；1986年該作者報(bào)導(dǎo)了阿加曲班抑制哺乳動(dòng)物凝血酶活性， 可作為治療和預(yù)防血栓藥劑和血小板凝聚抑制劑。阿加曲班一水合物可作為選擇性抗血栓劑、治療慢性動(dòng)脈堵塞和腦血栓等JP 61-48829]0 1992年和1993年，Taparelli 和J. A. Jakubowski先后報(bào)導(dǎo)了阿加曲班抗凝血酶的可逆性Taparel 1 i，C.，Trends Pharmacol. Sci.，1993，14，366，Jakubowski, J. A. et al, Rep. Med. Chem.，1992，27，99；90 年代L. R. Buch等多位研究者報(bào)導(dǎo)了相關(guān)研究Buch，L. R.，Cadiosvasc. Drug Rev.，1991， 9,247, Strupcnewski, J.D. et al. , Academic :San Diego,1991；Vol. 26, p299, Brundish, D. et al. ， J.Med. Chem. 1999 ；42,4584, Shebuski, R.J. ， Academic :San Diego,1999 ； Vol. 26，p98。1992年日本批準(zhǔn)作為非腸道使用凝血酶抑制劑Hijikata-Okunomiya，Α.， et al, Thromb. Hemostasis,1992,18,135。阿加曲班是L-精氨酸的衍生物，其只與凝血酶活性位點(diǎn)相互作用，是凝血酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑。它直接滅活凝血酶(因子IIa)的活性；對(duì)凝血酶的產(chǎn)生沒有直接作用，其作用不依賴于體內(nèi)的抗凝血酶；不僅滅活血液中游離狀態(tài)的凝血酶，還能夠滅活與纖維蛋白血栓結(jié)合了的凝血酶；阻斷凝血瀑布的正反饋；極低濃度時(shí)即可抑制由凝血酶誘導(dǎo)的血小板凝聚反應(yīng)，間接抑制凝血酶的產(chǎn)生。阿加曲班分子量小，它能進(jìn)入到血栓內(nèi)部，直接滅活已經(jīng)與纖維蛋白血栓結(jié)合的凝血酶，對(duì)那些陳舊的血栓仍能發(fā)揮抗栓作用。此外，阿加曲班能大大降低血漿中TAT (凝血酶-抗凝血酶復(fù)合物)的水平，有效改善患者的高凝狀態(tài)，在慢性血栓栓塞性疾病中有非常好的臨床效果。但是，目前臨床上多使用21 (R)阿加曲班和21⑶阿加曲班的混合物，一般來說， 藥物混合物要比單一成分的藥物生物活性低，治療效果差、用量高，而且近年來，世界各國對(duì)藥物的成分要求越來越嚴(yán)格，除了嚴(yán)格限定雜質(zhì)含量和單一雜質(zhì)含量之外，對(duì)各種異構(gòu)體分離鑒定及其含量也進(jìn)行了嚴(yán)格規(guī)定，因此單獨(dú)研究21 (R)阿加曲班的生物活性具有重要的意義
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種21(R)阿加曲班在治療和預(yù)防血栓以及血小板凝聚抑制藥物，即凝血酶抑制劑中的應(yīng)用。所述的藥物為一種新的凝血酶抑制劑，含有單一成分的非對(duì)映異構(gòu)體21 (R)阿加曲班和藥學(xué)上可接受的輔料。21 (R)阿加曲班的化學(xué)式為2R，4R)-l-K2S)-5-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1-氧代-2-{[(3ΙΟ-(1，2，3，4-四氫-3-甲基-8-喹啉基)磺酰]氨基} 戊基}-4_甲基-2-哌啶甲酸。所述的藥物可按照通常的方法制成液體制劑。所述的藥物中有效活性成分的濃度為醫(yī)學(xué)上可接受的21 (R)阿加曲班的量。本發(fā)明提供的單一成分的21 (R)阿加曲班對(duì)延長(zhǎng)正常犬全血凝固時(shí)間(CT)作用顯著，其作用效果是空白對(duì)照組的7倍；21 (R)阿加曲班對(duì)延長(zhǎng)正常犬復(fù)鈣時(shí)間(RT)作用顯著，其作用效果是空白對(duì)照組的2倍；21 (R)阿加曲班對(duì)延長(zhǎng)正常犬凝血酶原時(shí)間(PT) 作用顯著，其作用效果是空白對(duì)照組的15倍；21 (R)阿加曲班對(duì)延長(zhǎng)正常犬白陶土部分凝血活酶時(shí)間(APTT)，延長(zhǎng)正常犬凝血酶時(shí)間(TT)有一定作用，其作用效果比空白對(duì)照組略強(qiáng)；21 (R)阿加曲班對(duì)正常犬血小板粘附率和血小板聚集率有降低作用。
具體實(shí)施例方式為了驗(yàn)證本發(fā)明提供的21(R)阿加曲班藥物的藥效，本申請(qǐng)人先按照下述方法將其配制成21 (R)阿加曲班靜脈注射液(以下簡(jiǎn)稱R體)，以供其后的藥效分析實(shí)驗(yàn)用。21 (R)阿加曲班靜脈注射液
21 (R)阿加曲班
鹽酸，USP
NaCl, USP滲透調(diào)節(jié)劑鹽酸或NaOH 注射用水，USP制備方法將混合、過濾和填充用的設(shè)備及玻璃器皿徹底洗滌并除熱原，將過濾器組件、填充管組件和其他部件及設(shè)備滅菌。將上述所示用量的21 (R)阿加曲班加入到20ml的安瓿瓶中，加注射用水至最終體積的80%，加入所示重量的鹽酸作為增溶劑，再加入所示重量的滲透調(diào)節(jié)劑，混合，接著，如果有必要，用IN的氫氧化鈉或者鹽酸調(diào)節(jié)溶液pH值至5. 5，加注射用水至20ml，混合均勻。 然后將產(chǎn)品裝入高壓滅菌器，在121°C的溫度下滅菌20min即可制成所述的21 (R)阿加曲班靜脈注射液。一、21 (R)阿加曲班靜脈注射液的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)試驗(yàn)材料1、供試品上述21 (R)阿加曲班靜脈注射液。
IOmg 0. 32mg 0. 5g
按需調(diào)節(jié)PH 加至20ml
無色澄明液體，規(guī)格20ml: 10mg，貯存遮光、室溫密閉保存。2、試劑0.9%氯化鈉注射液，規(guī)格500ml，批號(hào)D510150401，由濟(jì)南三九益民制藥有限公司生產(chǎn)；枸櫞酸鈉，分析純，規(guī)格500g，批號(hào)20021105，由山東博山化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，用時(shí)用生理鹽水配成3. 2%的溶液；凝血酶原時(shí)間、凝血酶時(shí)間、活化部分凝血活酶時(shí)間試劑盒均由上海太陽生物技術(shù)有限公司提供；ADP 由北京東方普利生科貿(mào)有限公司提供。3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物普通家犬(Canis familiar is Linne)，12只，雌雄各半，10_15kg，由市場(chǎng)購入。4、主要儀器設(shè)備HEMAVET_950型全自動(dòng)血球計(jì)數(shù)儀，由Drew Scientific公司生產(chǎn)；C2000型血凝儀，由北京東方普利生科貿(mào)有限公司生產(chǎn)；LBY-NJ2型血小板聚集儀，由北京東方普利生科貿(mào)有限公司生產(chǎn)；血小板粘附儀，由北京東方普利生科貿(mào)有限公司生產(chǎn)；二、試驗(yàn)方法1.動(dòng)物分組取健康普通家犬(Canis familiar is Lirme) 12只，隨機(jī)分為2組，分別為空白對(duì)照組和R體試驗(yàn)組，每組6只動(dòng)物。2.給藥劑量選擇及依據(jù)供試品臨床用法通常成人在開始的2日內(nèi)是將1日6支(阿加曲班60mg)以適當(dāng)量的輸液稀釋，經(jīng)M小時(shí)持續(xù)靜脈滴注。在其后的5日中，將1日2支(阿加曲班20mg) 以適當(dāng)量的輸液稀釋，每日早晚各1次，每次1支(阿加曲班IOmg)，1次靜脈滴注3小時(shí)。參考阿加曲班注射液臨床用量，以成人每天15mg計(jì)，按成人70kg和12kg犬等效劑量折算系數(shù)法可得犬用藥劑量為人用量XO. 32/12，初步定為0. %ig/kg。3.藥物配制0. 4mg/kg劑量溶液取相應(yīng)的供試品溶液0. 8ml+0. 9%氯化鈉注射液9. 2mL·4.試驗(yàn)過程每只動(dòng)物在給藥前取血測(cè)定全血凝固時(shí)間(CT)、復(fù)鈣時(shí)間(RT)、白陶土部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、凝血酶原時(shí)間(PT)、凝血酶時(shí)間(TT)、血小板粘附率、血小板聚集率等指標(biāo)作為藥前值，測(cè)定完畢，每組動(dòng)物按10ml/kg體積給予相應(yīng)的藥物溶液，每天一次，連續(xù)3 天，第三天給藥后15分鐘取血測(cè)以上凝血相關(guān)指標(biāo)。全血凝固時(shí)間的測(cè)定方法取試管3個(gè)，標(biāo)號(hào)為1、2、3號(hào)。用一次性無菌注射器順利地抽取犬靜脈血:3ml，自血流入針頭開始計(jì)時(shí)，去針頭后沿管壁每管緩慢注入血液1ml， 置37°C水浴中。每隔一定時(shí)間將第一管傾斜1次，直至將試管倒置血液不流動(dòng)為止；再依次觀察第二管，第二管凝固后，再觀察第三管。以第三管凝固時(shí)間為凝血時(shí)間。復(fù)鈣時(shí)間測(cè)定方法取枸櫞酸鈉抗凝血1ml，離心取血漿0. anl，加0. 025mol/L的氯化鈣溶液0. anl，混勻后置于37°C水浴，從加鈣起計(jì)時(shí)，直至凝固的時(shí)間為復(fù)鈣時(shí)間。其它測(cè)試采用儀器測(cè)定。
5.數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及結(jié)果判定每組動(dòng)物藥前和藥后各個(gè)指標(biāo)以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(表示。將各藥物組藥后變化值與空白對(duì)照組藥后變化值進(jìn)行t檢驗(yàn)，以判斷藥物的效果。試驗(yàn)結(jié)果見表1-7。表1 :R體對(duì)正常犬全血凝固時(shí)間(CT)的影響G ±SD，η = 6)
權(quán)利要求
1.21 (R)阿加曲班在治療和預(yù)防血栓以及血小板凝聚抑制藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述的藥物包括單一成分的21(R)阿加曲班以及藥用輔料。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于所述藥物為液體制劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于所述的藥物中有效活性成分的濃度為醫(yī)學(xué)上可接受的21 (R)阿加曲班的量。
全文摘要
一種21(R)阿加曲班在治療和預(yù)防血栓以及血小板凝聚抑制藥物中的應(yīng)用。藥物中包括單一成分的21(R)阿加曲班以及藥用輔料。本發(fā)明提供的單一成分的21(R)阿加曲班對(duì)延長(zhǎng)正常犬全血凝固時(shí)間(CT)作用顯著，其作用效果是空白對(duì)照組的7倍；21(R)阿加曲班對(duì)延長(zhǎng)正常犬復(fù)鈣時(shí)間(RT)作用顯著，其作用效果是空白對(duì)照組的2倍；21(R)阿加曲班對(duì)延長(zhǎng)正常犬凝血酶原時(shí)間(PT)作用顯著，其作用效果是空白對(duì)照組的15倍；21(R)阿加曲班對(duì)延長(zhǎng)正常犬白陶土部分凝血活酶時(shí)間(APTT)，延長(zhǎng)正常犬凝血酶時(shí)間(TT)有一定作用，其作用效果比空白對(duì)照組略強(qiáng)；21(R)阿加曲班對(duì)正常犬血小板粘附率和血小板聚集率有降低作用。
文檔編號(hào)A61K38/05GK102258764SQ201110195540
公開日2011年11月30日 申請(qǐng)日期2011年7月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月13日
發(fā)明者孫致遠(yuǎn), 宋洪海, 張冉, 高巨 申請(qǐng)人:天津市煒杰科技有限公司