專利名稱：作為治療牙周炎的輔助物的穿心蓮凝膠的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及植物提取物提供能在牙周炎的治療中作為輔助物使用的產(chǎn)品的用途。該產(chǎn)品帶有生物適合的且可生物降解的載體，并以緩釋劑型提供。該產(chǎn)品以草藥提取物凝膠的形式存在，當(dāng)它與牙周袋中的牙齦液(牙齦淋巴)接觸時會變成液晶結(jié)構(gòu)。該產(chǎn)品可以裝在帶有鈍而且彎曲針頭的特定注射器中，從而可以很方便將該產(chǎn)品置入牙周裝中。
背景技術(shù)：
據(jù)報道，目前泰國40歲的人中有90％患有牙齦炎，其中80％的人在60歲時會發(fā)展成牙周炎。患者的牙齦、牙槽骨、牙骨質(zhì)和牙周韌帶發(fā)炎，特征為結(jié)合上皮向尖端移動以及附著在牙齦纖維、牙周韌帶和牙骨質(zhì)之間的結(jié)締組織消失?；颊叩难啦酃潜晃詹⑿纬纱?。如果沒有得到治療，該病會進一步破壞支持骨，由此可以觀察到牙松動，而且有時還會發(fā)現(xiàn)牙周膿腫。
對患者而言，基本的治療方法，就是加強口腔衛(wèi)生以控制住牙菌斑，對牙科醫(yī)生而言，就是進行刮牙術(shù)和根面平整術(shù)。這一治療方法并不總是充分有效的。這就導(dǎo)致了抗生素的輔助使用，添加抗生素通常采用局部分送系統(tǒng)，而不是全身使用抗生素。全身使用抗生素會導(dǎo)致副作用，例如全身使用甲硝唑會刺激胃腸道，并且在重復(fù)使用時會影響神經(jīng)系統(tǒng)、皮膚和腎。而且在服用這種藥期間不允許飲酒。在全身使用四環(huán)素的情形中，由于該藥必須長期、高劑量服用才能在牙周袋中保持有效的濃度，其結(jié)果可能是正常的微生物環(huán)境被破壞，從而導(dǎo)致由真菌引發(fā)的雙重感染和造成細(xì)菌抗藥菌株的發(fā)展。
早期的局部分送系統(tǒng)采用非生物降解的載體物質(zhì)，在抗生素藥劑釋放后不得不將該載體去除。這一系統(tǒng)具有很多缺點首先，將藥物插入牙周袋中十分困難；而且在抗生素藥劑釋放完后患者不得不返回診所，讓牙科醫(yī)生去除載體。而需要去除載體對牙齦的愈合可能有害并且也會刺激牙齦。
近來，已經(jīng)開發(fā)出采用可生物降解物質(zhì)的可控局部分送系統(tǒng)來解決此問題。這些包含了抗生素的系統(tǒng)雖然很好，但卻十分昂貴。這類產(chǎn)品已有商品提供(例如含有甲硝唑的Elysol，或含二甲胺四環(huán)素的軟膏)。這兩類產(chǎn)品可以裝入特殊的注射器和針頭中，為置入牙周袋中作好準(zhǔn)備。
發(fā)明詳述根據(jù)本發(fā)明，將抗微生物提取物摻入到凝膠基質(zhì)中以形成凝膠、薄片(chip)或軟膏(在下文中統(tǒng)稱為凝膠組合物)。
第一個方面，本發(fā)明提供了用于輔助治療牙周炎的凝膠組合物，它含有(i)具有對抗牙周病原體的抗微生物或抗菌活性的抗微生物提取物，該提取物優(yōu)選地來自于以下植物中的一種或多種穿心蓮(Andrographis Paniculata)，山竹果(Garcinia mangostana)和姜黃(Curcuma longa)；(ii)含有甘油單油酸酯和甘油三酯混合物的凝膠基質(zhì)，其中組合物與牙齦液接觸時會形成液晶結(jié)構(gòu)。
第二個方面，本發(fā)明提供了用作治療牙周炎的輔助物的組合物的制備方法，它包括(i)制備具有對抗牙周病原體的抗微生物或抗菌活性的抗微生物提取物，該提取物優(yōu)選地來自于以下植物中的一種或多種穿心蓮(AndrographisPaniculata)，山竹果(Garcinia mangostana)和姜黃(Curcuma longa)；(ii)制備含有甘油單油酸酯和甘油三酯的混合物作為凝膠基質(zhì)；(iii)將抗微生物提取物摻入到凝膠基質(zhì)中并混合，制成與牙齦液接觸時會形成液晶結(jié)構(gòu)的組合物。
抗微生物提取物可以是任何含有能有效對抗牙周病原體的抗微生物或抗菌活性化合物(例如，對抗已知能導(dǎo)致牙周炎的牙齦卟啉單胞菌的化合物)的植物提取物。該提取物優(yōu)選地取自穿心蓮(Andrographis paniculata)——爵床科植物中的成員，或取自山竹果(Garcinia mangostana)或姜黃(Curcumalonga)，所述植物也含有有效對抗牙周病原體的抗微生物或抗菌活性化合物。
優(yōu)選地，該提取物取自穿心蓮。這樣，該提取物含有以下化合物中的一種或多種穿心蓮內(nèi)酯(2-二萜內(nèi)酯)；脫氧穿心蓮內(nèi)酯；14-脫氧-11，12-雙脫氫-穿心蓮內(nèi)酯；14-脫氧-11-氧代-穿心蓮內(nèi)酯；14-脫氧-11-脫氫-穿心蓮內(nèi)酯；穿心蓮內(nèi)酯-19β-D糖苷；新穿心蓮內(nèi)酯；高穿心蓮內(nèi)酯；穿心蓮?fù)?；穿心蓮醇；穿心蓮硬脂酸酯；豆甾醇；青霉?nèi)酯。
下列方法可適用于制備抗微生物提取物
將洗干凈的穿心蓮(Andrographis paniculata(Burmf.)Nees.)的葉子和莖切成小塊，在40-80℃的熱空氣烘箱中干燥2-8小時，然后碾成粉末并用1-4mm孔徑的篩子篩分，將篩過的粉末放入密封性好的瓶子中保存。
將粉末用有機溶劑(例如乙醇，丙酮，氯仿或其它溶劑)提取，提取過程中的物質(zhì)比例為400-700克粉末∶3000-7000克溶劑，采用索格利特抽提器在30-95℃中抽提3-80小時。
將活性炭加入到溶劑提取物中(1-5克活性炭∶2-10g穿心蓮提取物)，混合并放置1-5小時以便使葉綠素脫色。
將混合物用濾紙(Whatman no.1)過濾，濾液采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在減壓下，在30-95℃進行濃縮。然后將濃縮液放在沸水浴上蒸發(fā)，直到該濃縮液達(dá)到恒定重量，這樣就形成了抗微生物提取物。
應(yīng)當(dāng)理解的是，本發(fā)明也可以采用其它本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的合適的提取方法來制備抗微生物提取物。植物的葉子或其它部分(例如根或根莖)都可適用作為提取活性成分的原料。對于穿心蓮提取物來說，優(yōu)選采用葉子。
凝膠基質(zhì)用甘油單油酸酯和甘油三酯混合物來制備。甘油單油酸酯有商品提供，也可以在合適的催化劑存在下通過油酸和甘油發(fā)生反應(yīng)而得到，其中包括了油酸單甘油酯和少量的其它脂肪酸。這樣，甘油單油酸酯就成為油酸的甘油酯和其它脂肪酸的混合物，但它主要由油酸的單甘油酯組成，具有軟化劑的特性。優(yōu)選地，甘油單油酸酯中含有至少95wt％的油酸單甘油酯。
甘油三酯包括油和脂肪，是食物中常見脂肪的主要成分。甘油三酯含有脂肪酸，它們以飽和脂肪酸和/或不飽和脂肪酸的形式連接在甘油分子上。
在本發(fā)明所采用的甘油三酯中，優(yōu)選的是采用一種油，特別是植物油(例如芝麻油，向日葵油、大豆油或紅花油，或者它們的任意混合物)。
甘油單油酸酯與甘油三酯的重量比范圍從2∶1到10∶1。甘油單油酸酯和甘油三酯的凝膠基質(zhì)混合物在組合物中的摻入量為組合物重量的60％-95％。
當(dāng)甘油單油酸酯與水或牙齦滲出液(牙齦淋巴)相接觸時，它的粘度增加并形成立方中間相結(jié)構(gòu)。與甘油三酯結(jié)合后，立方相結(jié)構(gòu)會變成六角形的液晶結(jié)構(gòu)。液晶結(jié)構(gòu)可以把活性成分或草藥提取物保持在晶體之間，然后再逐步地將活性成分釋放出來，從而提供了一種緩釋劑型。
抗微生物提取物(優(yōu)選穿心蓮提取物)的摻入量是組合物重量的0.5％-30％，優(yōu)選1-20％，更優(yōu)選1％-15％(％是基于干提取物)。然而，所采用的提取物的濃度必須要適合于使凝膠基質(zhì)能變成液晶結(jié)構(gòu)。
優(yōu)選地在組合物中加入抗氧化劑或防腐劑，其摻入量優(yōu)選為組合物重量的0.5％-5％。優(yōu)選的抗氧化劑為D-α-生育酚乙酸酯。
組合物中也可以包含少量常用于凝膠制品中的輔助物質(zhì)(例如穩(wěn)定劑，均化劑，花紋造型劑，舒緩劑)。例如，甘油有助于為凝膠提供均勻的質(zhì)地，同時也能對傷口起舒緩作用。膠原有助于傷口的愈合。優(yōu)選的是將甘油或膠原或者兩者一起摻入到組合物中，優(yōu)選的摻入總量為組合物重量的0.1％-5％。
獲得的凝膠優(yōu)選地裝入到帶有彎曲鈍針頭的注射器中，以適于將凝膠置入牙周袋中。也可以采用其它便利的包裝。
實施例實施例11、穿心蓮植物的提取1.1將洗凈的穿心蓮(Andrographis paniculata(Burmf.)Nees.)的葉子和莖切成小塊，在60℃的熱空氣烘箱中干燥5小時，然后碾成粉末并用3mm孔徑的篩子篩分，將篩過的粉末放在密封性好的瓶子中保存。
1.2粉末用乙醇作溶劑提取，比例為550g粉末∶5000g溶劑，采用索格利特抽提器在65℃中抽提40小時。
1.3將活性炭加入到溶劑提取物中(3g活性炭∶6g穿心蓮提取物)，混合并放置3小時以便使葉綠素脫色。
1.4混合物用濾紙(Whatman no.l)過濾，濾液采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在減壓下，在65℃進行濃縮。然后將濃縮液放在沸水浴上蒸發(fā)，直到該濃縮液達(dá)到恒定重量。
2.用作治療牙周炎的輔助物的組合物的制備2.1凝膠基質(zhì)的制備將含有油酸甘油酯和其它脂肪酸的甘油單油酸酯和甘油三酯(芝麻油)按照甘油單油酸酯∶甘油三酯的重量比為6∶1進行混合。
2.2在凝膠中摻入穿心蓮提取物向凝膠基質(zhì)混合物中加入D-α-生育酚乙酸酯作為抗氧化劑、甘油以及穿心蓮提取物，并且充分混合得到凝膠組合物。在凝膠組合物中各物質(zhì)的含量為甘油單油酸酯/甘油三酯凝膠基質(zhì)混合物占組合物重量的76.5％，穿心蓮提取物占20％，D-α-生育酚乙酸酯占2.5％，甘油占1％。
3、臨床對比研究在與Elysol(甲硝唑疑膠)的臨床對比研究中，結(jié)果表明使用穿心蓮凝膠的情形中黑色素菌落(導(dǎo)致牙周炎的厭氧微生物)的百分?jǐn)?shù)明顯減少，而在使用甲硝唑凝膠的情形中則沒有發(fā)現(xiàn)其減少。
在與二甲胺四環(huán)素軟膏的臨床對比研究中，結(jié)果表明與用二甲胺四環(huán)素軟膏治療組以及對照組相比，穿心蓮凝膠顯著減少了能動的桿狀微生物的百分?jǐn)?shù)。
研究中還發(fā)現(xiàn)該凝膠在與牙齦液接觸之后具有液晶結(jié)構(gòu)。
實施例2采用與實施例1相同的方法和劑量，用醇提取法制備山竹果提取物，并將它摻入到凝膠基質(zhì)混合物中。該凝膠基質(zhì)混合物中甘油單油酸酯與甘油三酯(芝麻油)的重量比為6∶1，混合物中還包含D-α-生育酚乙酸酯作為抗氧化劑以及甘油。山竹果凝膠組合物中各物質(zhì)含量為甘油單油酸酯/甘油三酯凝膠基質(zhì)混合物占組合物重量的76.5％，山竹果提取物占20％，D-α-生育酚乙酸酯占2.5％，甘油占1％。
該凝膠在與水接觸時形成液晶結(jié)構(gòu)。初步實驗表明山竹果凝膠與對照組相比能有效減少導(dǎo)致牙周炎的微生物的百分?jǐn)?shù)。
實施例3采用與實施例1相同的方法和劑量，用醇提取法制備姜黃提取物，并將它摻入到凝膠基質(zhì)混合物中。該凝膠基質(zhì)混合物中甘油單油酸酯與甘油三酯(芝麻油)的重量比為6∶1，混合物中還包含D-α-生育酚乙酸酯作為抗氧化劑以及甘油。姜黃凝膠組合物中各物質(zhì)含量為甘油單油酸酯/甘油三酯凝膠基質(zhì)混合物占組合物重量的76.5％，姜黃提取物占20％，D-α-生育酚乙酸酯占2.5％，甘油占1％。
該凝膠在與水接觸時形成液晶結(jié)構(gòu)。初步實驗表明姜黃凝膠與對照相組比能有效減少導(dǎo)致牙周炎的微生物的百分?jǐn)?shù)。
權(quán)利要求
1.一種用于輔助治療牙周炎的凝膠組合物，它包括(i)具有對抗牙周炎病原體的抗微生物或抗菌活性的抗微生物提取物，該提取物優(yōu)選地取自植物穿心蓮(Andrographis Paniculata)、山竹果(Garciniamangostana)和姜黃(Curcuma longa)中的一種或多種；(iii)含有甘油單油酸酯和甘油三酯混合物的凝膠基質(zhì)，其中組合物與牙齦液接觸時形成液晶結(jié)構(gòu)；
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中甘油單油酸酯與甘油三酯的重量比范圍從2∶1到10∶1。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的組合物，其中所含的抗微生物提取物占組合物重量的1％-15％。
4.根據(jù)前述任一項權(quán)利要求所述的組合物，其中所含的甘油單油酸酯和甘油三酯混合物占組合物重量的80％-99％。
5.根據(jù)前述任一項權(quán)利要求所述的組合物，該組合物是可生物降解的緩釋凝膠、薄片或軟膏。
6.根據(jù)前述任一項權(quán)利要求所述的組合物，其中甘油三酯是選自芝麻油、向日葵油、大豆油和紅花油的一種或多種植物油。
7.根據(jù)前述任一項權(quán)利要求所述的組合物，其中抗微生物提取物是從植物穿心蓮中提取的。
8.根據(jù)前述任一項權(quán)利要求所述的組合物，進一步包含抗氧化劑或防腐劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的組合物，其中所含的作為抗氧化劑的D-α-生育酚乙酸酯占組合物重量的0.5％-5％。
10.根據(jù)前述任一項權(quán)利要求所述的組合物，進一步包含甘油或膠原或者兩者都有。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的組合物，其中所含的甘油占組合物重量的0.1％-5％。
12.制備用作為治療牙周炎的輔助物的組合物的方法，它包括(i)制備具有對抗牙周炎病原體的抗微生物或抗菌活性的抗微生物提取物，該提取物優(yōu)選地來自于以下植物中的一種或多種穿心蓮(AndrographisPaniculata)，山竹果(Garcinia mangostana)和姜黃(Curcuma longa)；(ii)制備甘油單油酸酯和甘油三酯混合物作為凝膠基質(zhì)；(iii)將抗微生物提取物摻入到凝膠基質(zhì)中并混合，制成與牙齦液接觸時會形成液晶結(jié)構(gòu)的組合物。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中甘油單油酸酯與甘油三的重量比范圍從2∶1到10∶1。
14.根據(jù)權(quán)利要求12或13所述的方法，其中抗微生物提取物的摻入量為組合物重量的1％-15％。
15.根據(jù)權(quán)利要求12至14中任一項權(quán)利要求所述的方法，其中甘油單油酸酯和甘油三酯混合物的摻入量為組合物重量的80％-99％。
16.根據(jù)權(quán)利要求12至15中任一項權(quán)利要求所述的方法，其中將組合物制備成可生物降解的緩釋凝膠、薄片或軟膏。
17.根據(jù)權(quán)利要求12至16中任一項權(quán)利要求所述的方法，其中甘油三酯是選自芝麻油、向日葵油、大豆油和紅花油的一種或多種植物油。
18.根據(jù)權(quán)利要求12至17中任一項權(quán)利要求所述的方法，其中抗微生物提取物是從植物穿心蓮制備的。
19.根據(jù)權(quán)利要求12至18中任一項權(quán)利要求所述的方法，進一步包括以組合物重量的0.5％-5％的量摻入D-α-生育酚乙酸酯，作為抗氧化劑。
20.根據(jù)權(quán)利要求12至19中任一項權(quán)利要求所述的方法，進一步包括以組合物重量的0.1％-5％的總量摻入甘油或膠原或甘油和膠原兩者。
21.根據(jù)權(quán)利要求1至11中任一項權(quán)利要求所述的組合物用于制備治療牙周炎的輔助物的用途。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種用于輔助治療牙周炎的組合物，該組合物為可生物降解的凝膠、薄片或軟膏，它包括(i)具有對抗牙周炎病原體的抗微生物或抗菌活性的抗微生物提取物，該提取物優(yōu)選地取自植物穿心蓮(AndrographisPaniculata)、山竹果(Garcinia mangostana)和姜黃(Curcuma longa)中的一種或多種；以及(ii)含有甘油單油酸酯和甘油三酯混合物的凝膠基質(zhì)。該組合物可生物降解，在與牙齦液接觸時形成液晶結(jié)構(gòu)，該液晶結(jié)構(gòu)可以使活性成分逐步地釋放，從而提供了緩釋劑型。
文檔編號A61K36/9066GK1416885SQ02154760
公開日2003年5月14日 申請日期2002年11月8日 優(yōu)先權(quán)日2001年11月9日
發(fā)明者P·羅亞納潘圖, W·格利特薩納番, M·斯里拉特, C·阿莫查特 申請人:馬伊多爾大學(xué)