專利名稱：萬(wàn)年蒿提取物在制備抗肝損傷藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及朝藥萬(wàn)年蒿的提取物，具體涉及從朝藥萬(wàn)年蒿中分離得到的抗肝損傷的單體化合物。
背景技術(shù)：
肝損傷是多種肝臟疾病共有的一種特點(diǎn)突出的病理狀態(tài)，嚴(yán)重威脅著人類健康。 各種有害因素諸如藥物、病毒、酒精、生物等可能致使肝功能有不同程度的損害，從而使肝臟的解毒、排泄功能及貯備和再生能力降低，肝血流量減少，代謝負(fù)荷加重，從而發(fā)生內(nèi)環(huán)境紊亂，肝細(xì)胞壞死和凋亡，進(jìn)而造成肝損傷。各種有害因素導(dǎo)致的肝損傷主要有藥物性肝損傷、病毒性肝損傷、酒精性肝損傷、免疫性肝損傷等類型，全世界有數(shù)十億人曾經(jīng)或正忍受著肝損傷的痛苦。以病毒性肝損傷病因中的乙型肝炎病毒為例，全世界有20億人感染過(guò)乙型肝炎病毒(HBV)，其中3. 78億人轉(zhuǎn)化成慢性感染，0. 5-1. 2億人死于肝硬化、肝衰竭、肝癌等。藥物性肝損傷、酒精性肝損傷患者也同樣不計(jì)其數(shù)。肝損傷的長(zhǎng)期存在往往會(huì)導(dǎo)致肝纖維化，是進(jìn)而誘發(fā)肝硬化，肝功能衰竭，甚至肝癌的重要始動(dòng)因素。因此預(yù)防和治療肝細(xì)胞損傷是臨床上肝病治療的重要環(huán)節(jié)之一，是抑制肝纖維化、肝壞死、脂肪肝、膽汁郁積、 肝硬化以及肝癌等疾病發(fā)生和發(fā)展的基礎(chǔ)。治療和預(yù)防肝損傷，在臨床上沒(méi)有特別好的辦法。因此目前臨床上對(duì)療效明確、副作用低的抗肝損傷藥物的需求十分強(qiáng)烈。雖然現(xiàn)有技術(shù)中有一些中草藥的提取物具有抗肝損傷的作用，但從中草藥中提取得到具有治療作用的化合物單體相比于提取物至少具有以下幾個(gè)方面的優(yōu)勢(shì)單體化合物作為活性成分更加容易控制質(zhì)量，特別是對(duì)于注射劑而言， 使用單體化合物作為活性成分更加安全；提取物中有效成分含量通常較少，單體化合物作為活性成分時(shí)其來(lái)源并不僅僅局限于提取。因此，如何從中草藥中提取得到具有活性成分的單體一直是現(xiàn)代中藥領(lǐng)域具有挑戰(zhàn)性的研究。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是制備一種具有治療肝損傷的藥物。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案本發(fā)明涉及化合物1-3在制備治療肝損傷藥物中的應(yīng)用，其中所述的化合物1是 2-羥基-6-甲氧基苯乙酮-4-0- β -D-葡萄糖苷；化合物2是苯乙酮-4-0- β -D葡萄糖苷； 化合物3是6-甲氧基-槲皮萬(wàn)壽菊素-7-0- β -D-葡萄糖苷。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，所述的藥物包括化合物1-3中的一種、兩種或三種作為活性成分。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，所述的化合物1-3是從萬(wàn)年蒿提取分離或者通過(guò)化學(xué)合成的方法或者通過(guò)從其它中草藥中提取分離得到。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，所述的藥物是將所述的化合物以及藥學(xué)上可接受的藥物制成藥學(xué)上可接受的劑型，所述的劑型包括但不限于丸劑、片劑、膠囊劑、口服液、散劑、注射劑。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，本發(fā)明的藥物不包括除化合物1-3以外的其它抗肝損傷的活性成分。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，本發(fā)明的藥物還包括其它西藥活性成分。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，本發(fā)明的所述的肝損傷是藥物性肝損傷、病毒性肝損傷、酒精性肝損傷和/或免疫性肝損傷。本發(fā)明得到的藥物的活性成分是從萬(wàn)年蒿提取得到，其來(lái)源廣泛，對(duì)肝損傷具有顯著的療效。
具體實(shí)施例方式1.單體化合物的分離取1500g萬(wàn)年蒿中加入水浸泡池后加熱池，過(guò)濾得到濾液I，殘?jiān)屑铀偌訜?lh，得到濾液II，合并濾液I和II，得到萬(wàn)年蒿水提液。預(yù)處理過(guò)的大孔吸附樹脂柱中加入萬(wàn)年蒿水提液，依次用蒸餾水、50%乙醇、95%乙醇洗脫，收集50%乙醇洗脫液，濃縮后冷凍干燥至干，將其中的萬(wàn)年蒿50%乙醇洗脫物用水溶解，依次用二氯甲烷、乙酸乙酯萃取， 得到二氯甲烷萃取物，乙酸乙酯萃取物及剩余水溶解部分。取其中剩余水溶解部分適量上樣于預(yù)處理的反相硅膠柱中，甲醇-水系統(tǒng)梯度洗脫。以薄層層析原理為依據(jù)觀察、判斷， 25%和50%甲醇洗脫液洗脫部分分別上樣于反相硅膠柱層析柱、葡聚糖凝膠柱(kphadex LH-20)層析柱，分別得到單體化合物1和2。通過(guò)波譜解析和文獻(xiàn)對(duì)照，確定其化學(xué)結(jié)構(gòu)為分別為2-羥基-6-甲氧基苯乙酮-4-0-β -D-葡萄糖苷，和苯乙酮-4-0-β -D-葡萄糖苷。取乙酸乙酯萃取物適量，用甲醇溶解、過(guò)濾后濕法上樣于反相硅膠層析柱，甲醇-水系統(tǒng)洗脫，其中一部分上樣于葡聚糖凝膠(S^hadex LH-20)層析柱，甲醇-水系統(tǒng)反復(fù)洗脫，得到少量樣品，再經(jīng)制備型高效液相色譜法確定流動(dòng)相為甲醇-水5 5的混合液，保持柱溫為室溫，檢測(cè)波長(zhǎng)為2Mnm，流速為lml/min，進(jìn)樣量為300uL/次，得到一個(gè)單體化合物3，通過(guò)波譜解析和文獻(xiàn)對(duì)照，確定其化學(xué)結(jié)構(gòu)為6-甲氧基-槲皮萬(wàn)壽菊素-7-0-β-D-葡萄糖苷?；衔?，2，3的波譜數(shù)據(jù)分別如下化合物1 :2-羥基-6-甲氧基苯乙酮-4-0-β -D-葡萄糖苷1H-WR (300MHz，PYRIDINE-d5) δ ppm :14. 30 (1H，s，2-0H)，6. 68(lH，d，J = 2. OOHz, H-3)，6· 34 (1H, d, J = 2. OOHz, H_5)，5. 72 (1H, d, J = 6. 72，m, H-I' )，3. 67 (3H, s, OCH3)， 2. 50 (3H, s, COCH3).13C-NMR (75MHz, CD3OD) δ ppm :107. 89 (C-1) , 163. 27 (C-2) ,96. 40 (C-3), 164. 08 (C-4), 91. 43 (C-5), 166. 23 (C-6), 99. 98 (C-l ' ),73. 31 (C-2 ' ), 76. 49 (C-3 ')， 69. 92(C-4 ' ) ,77. 04 (C-5 ' ) ,61. 06 (C-6 ' ), 203. 49 (C = 0), 31. 81 (COCH3), 54. 92 (-OCH3).化合物2 :苯乙酮-4-0- β -D-葡萄糖苷1H-WrGOOMHz,，D2O) 7. 78 (2Η, d, J = 8. 32Hz，H-2，6)，7. 00 (2H, d, J = 8. 34Hz, H-3, 5)，2. 42 (3H, s, COCH3)，5. 06 (1H, d, J = 6. 36Hz, H-I' )，3. 21-3. 82 (m-sugar-H)。13C-NMR (75MHz，，D2O) 107. 7 (C-I) , 131. 11 (C-2, 6) , 116. 12 (C-3, 5)，160. 92(C-4) ,99. 48 (C-l ' ), 72. 90 (C-2 ' ) ,75. 58 (C-3 ' ) ,69. 46 (C-4 ')， 76. 29 (C-5' ) ,60. 61 (C_6' ),202. 51 (C = 0),26. 03 (COCH3)?；衔? :6-甲氧基-槲皮萬(wàn)壽菊素-7-0- ^ -D-葡萄糖苷1H-WrGOOMHz, (CD3)2CO) 8 ppm 12. 42 (1H, s，5-0H)，6. 47 (1H，s，8-H)，3. 75 (3H， s，6-0CH3)，7. 89(lH，d，J = 2. OlHz, 2' -H), 6. 82(lH，d，J = 8. 40Hz,5' -H)，7. 46(lH，dd， J = 2. 01,8. 40Hz，6' -H), 5. 12 (1H, d, J = 7. 26Hz, H-I " )，3. 24-3. 75 (m, sugar-H).13C-NMR (75MHz, DMS0_d6) 8 ppm :145. 26 (C-2)，133. 43 (C-3)，178. 11 (C-4)， 156. 72 (C-5)，131. 70 (C_6)，157. 95 (C_7)，94. 22 (C_8)，152. 84 (C_9)，104. 76 (C-IO)， 122. 06 (C-l ' ), 116. 64 (C-2 ' ), 151. 98 (C-3 ' ),148. 91 (C-4 ' ), 115. 65 (C-5 ')， 121. 67(C-6 ' ),101. 31 (C-l “ ),74.55 (C-2 “ ), 76. 96 (C-3 “ ),70. 41 (C-4 “)， 78. 02 (C-5 〃 )，61.45(C-6" ), 60. 43 (-OCH3).化合物1，2，3的結(jié)構(gòu)式分別如下
權(quán)利要求
1.化合物1-3在制備治療肝損傷藥物中的應(yīng)用，其中所述的化合物1是2-羥基-6-甲氧基苯乙酮-4-0-β -D-葡萄糖苷；化合物2是苯乙酮-4-0-β -D葡萄糖苷；化合物3是 6-甲氧基-槲皮萬(wàn)壽菊素-7-0- β -D-葡萄糖苷。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，所述的藥物包括化合物1-3中的一種、兩種或三種作為活性成分。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，所述的化合物1-3是從萬(wàn)年蒿提取分離或者通過(guò)化學(xué)合成的方法或者通過(guò)從其它中草藥中提取分離得到。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述的應(yīng)用，所述的藥物是將所述的化合物以及藥學(xué)上可接受的藥物制成藥學(xué)上可接受的劑型。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，所述的劑型選自丸劑、片劑、膠囊劑、口服液、散劑、注射劑中的一種。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，所述的藥物不包括除化合物1-3以外的其它抗肝損傷的活性成分。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，所述的藥物還包括其它西藥活性成分。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述的肝損傷是藥物性肝損傷、病毒性肝損傷、酒精性肝損傷和/或免疫性肝損傷。
全文摘要
本發(fā)明公開了萬(wàn)年蒿提取分離得到的2-羥基-6-甲氧基苯乙酮-4-O-β-D-葡萄糖苷；苯乙酮-4-O-β-D葡萄糖苷和6-甲氧基-槲皮萬(wàn)壽菊素-7-O-β-D-葡萄糖苷在制備抗肝損傷藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明得到的藥物的活性成分是從萬(wàn)年蒿中提取分離得到，其來(lái)源廣泛，對(duì)肝損傷具有顯著的療效。
文檔編號(hào)A61K31/7048GK102379889SQ20111024473
公開日2012年3月21日 申請(qǐng)日期2011年8月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月25日
發(fā)明者元海丹, 樸光春 申請(qǐng)人:樸光春