專利名稱：用于穩(wěn)定病毒顆粒、多肽或生物材料的賦形劑的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及病毒和多肽的儲存穩(wěn)定性配制品(制劑)。
背景技術：
一些生物分子足夠穩(wěn)定，可以分離、純化它們，然后在室溫下儲存在溶液中。然而，這對于許多材料和涉及在低溫下儲存的技術是不可行的，已經(jīng)試圖加入穩(wěn)定劑、冷凍干燥、真空形成和自然干燥以確保貨架保存。盡管這些技術的可用性，但是一些生物材料在儲存期間仍然顯示出令人不滿意的穩(wěn)定性水平，并且一些技術導致增加的成本和不便。例如，冷凍運輸和儲存是昂貴的。而且，在發(fā)展中世界的國家中，對于運輸諸如疫苗的藥物，冷凍運輸通常是不可用的。特別地，冷凍干燥或凍干作用的應力對一些生物材料可能是破壞性非常大的。生 物藥品的冷凍干燥涉及冷凍熱敏性生物材料的溶液或懸浮液，之后是一次和二次干燥。該技術是基于在沒有溶液融化的情況下，在真空下和零度以下的溫度下升華。冷凍干燥代表了生產(chǎn)固體蛋白質(zhì)和疫苗藥物的關鍵步驟。從凍結的生物材料中的水蒸汽擴散的速率非常低，因此該過程很費時。另外，冷凍和干燥階段都引入了能夠使蛋白質(zhì)解折疊或變性的應力。蛋白質(zhì)是具有定義的一級、二級、三級以及在某些情況下四級結構的分子。該結構在賦予蛋白質(zhì)其特定生物功能中發(fā)揮重要作用。不幸的是，諸如蛋白質(zhì)的生物藥物的結構復雜性使得它們易受各種過程的影響，這些過程導致其結構的和功能的不穩(wěn)定性。必須防止構象完整性和官能團的降解。各種共價和非共價反應或溶液中的改變(改性，修飾)可以導致不穩(wěn)定性。通常，降解分為兩種主要的類型首先物理降解或非共價途徑降解，和其次共價降解途徑。蛋白質(zhì)可以經(jīng)由諸如界面吸附和團聚的物理過程降解，其可以顯著降低蛋白質(zhì)藥物的潛能和穩(wěn)定性。第二個后果是，由在界面處的吸附介導的解折疊通常可以是溶液中的對于蛋白質(zhì)不可避免的團聚的引發(fā)步驟。由于攪拌、溫度或PH引發(fā)的應力，蛋白質(zhì)的核心暴露在疏水表面可以導致吸附；其所有可以導致團聚。蛋白質(zhì)可以經(jīng)受化學修飾的影響，如氧化、異構化、水解、不規(guī)則二硫化(disulfide scrambling)、β -消除、脫酰胺以及加合物的形成。降解的主要水解機制包括肽鍵水解、天冬酰胺和谷氨酰胺的脫酰胺和天冬氨酸的異構化。水解降解途徑的共同特點是對于反應速率，一個重要的配制品(制劑)變量是pH。因為蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性可以顯著地影響治療的安全性和效能，生物藥物配制品(制齊U)中各組分的組合可以影響蛋白質(zhì)降解的程度。生物藥物的配制方法也可以影響給藥的容易性和頻率。由于不穩(wěn)定性和團聚的問題，目前蛋白質(zhì)最穩(wěn)定的配制品不是液體配制品。典型地，冷凍干燥(凍干)蛋白質(zhì)以提供蛋白質(zhì)的穩(wěn)定配制品。填充劑通常存在于配制品中。以干燥的形式分配和儲存冷凍干燥的配制品，典型地作為密封的小瓶、安瓿或注射器中的粉齊U。例如，WO 97/04801描述了抗-IgE抗體的穩(wěn)定的凍干配制品，其必須在使用之前即時重建(重新溶解配成原來的溶度)。W0-A-2006/0850082報道了包含糖類、諸如組蛋白蛋白質(zhì)的載質(zhì)(chargedmaterial)以及干燥敏感性或熱敏感性生物組分的經(jīng)干燥的或經(jīng)保存的產(chǎn)物。糖類形成非晶固體基體。然而，如果將保存的生物組分給予人或動物，組蛋白可以具有免疫學后果。WO 2008/114021描述了用于保存病毒顆粒的方法。該方法包括，干燥一種或多種糖類、聚乙烯亞胺和病毒顆粒的水性溶液以形成包含病毒顆粒的非晶固體基體?；诰垡蚁﹣啺返臄?shù)均摩爾質(zhì)量(數(shù)均分子量，Mn)，水性溶液包含濃度為15μΜ以下的聚乙烯亞胺，并且糖類的濃度，或者如果存在多種糖類，總的糖類濃度大于O. 1Μ。WO 2010/035001描述了用于保存多肽的方法，其中，在一種或多種糖類和聚乙烯
亞胺(PEI)存在下，干燥多肽的水溶液，例如冷凍干燥。得到的干燥組合物典型地以密封小瓶、安瓿或注射器中的穩(wěn)定干燥粉劑提供。由粉劑重建溶液以給予患者多肽，例如通過注射。然而，干燥，特別是冷凍干燥是昂貴和費時的過程。如果可以避免使用它們，將是有利的。生物活性材料在加熱和干燥之后通常經(jīng)受活性損失。另外，在使用多肽之前需要在溶劑中重建冷凍干燥的粉劑，這很不方便。實際上，進行重建步驟的患者或醫(yī)療專業(yè)人員如果沒有正確的進行該步驟，可能帶來風險。因此，提供不需要重建的液體病毒和蛋白質(zhì)配制品以便使用是有利的。因此，對于穩(wěn)定的液體可注射病毒和蛋白質(zhì)配制品具有需要。對于高度濃縮的穩(wěn)定的液體可注射抗體配制品具有需要。

發(fā)明內(nèi)容
目前出乎意料地發(fā)現(xiàn)了，通過使用某些賦形劑和可選地一種、二種或多種糖類，可以提供病毒顆?；蚨嚯牡姆€(wěn)定儲存的即用水性溶液。這些配制品保持長期穩(wěn)定性。它們可以在沒有干燥或冷凍干燥步驟的情況下制備。它們避開了在使用之前由冷凍干燥的粉劑重建溶液的需要。還發(fā)現(xiàn)，這些賦形劑和可選地一種、二種或多種糖類在生產(chǎn)期間可以保存(防腐)病毒顆?；蚨嚯摹６?，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，這些賦形劑和可選地一種、二種或多種糖類可以保護取自人或動物的樣品。因此，本發(fā)明提供了無菌的藥用水性溶液，典型地適于非腸道(腸道外)給予，該溶液提供在密封容器中，并且包括-藥用水性溶劑；-病毒顆?；蛏砘钚远嚯?；-選自以下的賦形劑聚乙烯亞胺；化學式(I)的化合物或其生理可接受的鹽或酯；或化學式(II)的化合物或其生理可接受的鹽或酯；
權利要求
1.一種無菌藥用水性溶液，所述溶液是以密封的容器提供的，并且包括 -藥用水性溶劑； -病毒顆?；蛏砘钚远嚯模? -選自以下的賦形劑聚乙烯亞胺；化學式(I)的化合物或其生理學可接受的鹽或酯
2.根據(jù)權利要求I所述的溶液，其包含病毒顆粒。
3.根據(jù)權利要求2所述的溶液，其中，(a)所述病毒顆粒由活病毒或死病毒構成，或(b)所述病毒顆粒由活病毒或死病毒構成，并且所述活病毒是全病毒或減毒病毒。
4.根據(jù)權利要求2或3所述的溶液，其包括(a)選自腺病毒科(Adenoviridae)、正粘病毒科(Orthomyxoviridae )、副粘病毒科(Paramyxoviridae )、細小病毒科(Parvovir idae)、小核糖核酸病毒科(Picornoviridae)、痘病毒科(Poxviridae)的病毒,或(b)選自腺病毒科、正粘病毒科、副粘病毒科、細小病毒科、小核糖核酸病毒科、痘病毒科的病毒，所述病毒選自腺病毒、痘苗病毒、流感病毒或麻疫病毒。
5.根據(jù)權利要求I所述的溶液，其包括生理活性多肽。
6.根據(jù)權利要求5所述的溶液，其中，所述多肽是 Ca)激素、生長因子、肽或細胞因子； (b)抗體或其抗原-結合片段或其配體-結合片段； (C)氧化還原酶、轉(zhuǎn)移酶、水解酶、裂合酶、異構酶或連接酶；或(d)疫苗免疫原。
7.根據(jù)權利要求6所述的溶液，其中，所述多肽是 (i)速激肽、血管活性腸肽、胰多肽相關肽、阿片肽或降鈣素肽； (ii)其單克隆抗體或片段； (iii)嵌合的、人化的或人抗體、或其片段； (iv)氧化還原酶、轉(zhuǎn)移酶、水解酶、裂合酶、異構酶或連接酶；或 (V)全長病毒或細菌蛋白、糖蛋白或脂蛋白；或其片段
8.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的溶液，其中，所述賦形劑是具有數(shù)均摩爾質(zhì)量(Mn)在20至1，OOOkDa或I至10，OOODa的聚乙烯亞胺。
9.根據(jù)權利要求I至7中任一項所述的溶液，其中，所述賦形劑是N，N-二(C^6烷基)-甘氨酸、N, N, N-三(Cu烷基)-甘氨酸、或N-CV6烷基-甘氨酸或其生理可接受的鹽或酯。
10.根據(jù)權利要求9所述的溶液，其中，所述賦形劑是(a)N，N-二甲基甘氨酸、N, N, N-三甲基甘氨酸、或N-甲基甘氨酸或其生理可接受的鹽或酯，或(b) N-甲基甘氨酸、N, N- 二甲基甘氨酸或N，N, N-三甲基甘氨酸或其鹽酸鹽。
11.根據(jù)權利要求10所述的溶液，其中，所述賦形劑是N，N-二甲基甘氨酸或其生理可接受的鹽或酯。
12.根據(jù)權利要求I至7中任一項所述的溶液，其中，所述賦形劑是 -化學式(IA)的化合物或其生理可接受的鹽或酯
13.根據(jù)權利要求I至7中任一項所述的溶液，其中，所述賦形劑是二甲基砜、N-甲基-甘氨酸、N, N- 二甲基-甘氨酸、N, N, N-三甲基甘氨酸、椰油酰胺丙基甜菜堿、脯氨酸甜菜堿或S-甲基-L-甲硫氨酸。
14.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的溶液，其中，(a)存在蔗糖，或(b)存在蔗糖并且還存在棉子糖。
15.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的溶液，所述溶液適宜腸道外給予。
16.一種無菌藥用水性溶液，所述溶液包括 -藥用水性溶劑； -如在權利要求1、3或4中任一項定義的病毒顆粒； -如在權利要求9至11中任一項限定的N- (Cp6烷基)-甘氨酸、N，N- 二((V6烷基)-甘氨酸或N，N, N-三(Cu烷基)-甘氨酸或其生理可接受的鹽或酯；以及-化學式(IIC)的砜化合物
17.根據(jù)權利要求16所述的溶液，其中，(a)所述N-(C^6烷基)-甘氨酸、N，N-二((^6烷基)-甘氨酸或N，N, N-三(Cu烷基)-甘氨酸或其鹽或酯的濃度是從O. I至I. 5M，和/或(b)所述化學式(IIC)的砜化合物是甲磺酰基甲烷，和/或(c)所述化學式(I)的砜化合物的濃度是從O. I至I. 5M，和/或(d)所述水性溶液包括非還原糖類或糖醇；和/或(e)所述水性溶液包括蔗糖或甘露醇；和/或(f)所述水性溶液的所述糖類的濃度是從O. 05至1M，和/或(g)所述溶液是以密封的容器提供的。
18.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的水溶液，所述溶液進一步包括 -佐劑； -生理可接受的緩沖劑；和/或 -滲透壓調(diào)節(jié)劑；和/或 -防腐劑。
19.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的溶液，所述溶液是(a)等滲的，和/或(b)是在氮氣下以密封的容器提供的。
20.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的溶液，其中(a)所述溶液是以密封的小瓶、安瓿、注射器、藥筒、柔性袋或玻璃瓶提供的，和/或(b)存在病毒顆?；蚨嚯牡膯挝粍┝?。
21.一種用于制備如權利要求I中的無菌藥用溶液的方法，所述方法包括 (a)提供藥用水性溶液中的所述病毒顆?；蛏砘钚远嚯?、賦形劑、以及可選地，一種或多種糖類的無菌溶液； (b)將所述溶液密封在容器中。
22.根據(jù)權利要求21所述的方法，其中，使所述藥用水性溶劑中的所述病毒顆?；蚨嚯摹①x形劑以及可選地，一種或多種糖類的所述溶液通過步驟(a)中的無菌過濾器。
23.一種用于制備如權利要求I中的無菌藥用溶液的方法，所述方法包括 (a)將藥用水性溶劑中的病毒顆?；蛏砘钚远嚯?、賦形劑以及可選地，一種或多種糖類的溶液密封在容器中；以及 (b)將所述容器中的所述溶液滅菌。
24.根據(jù)權利要求21至23中任一項所述的方法，其中，所述容器是小瓶、安瓿、注射器、藥筒、柔性袋或玻璃瓶。
25.一種即用的、儲存穩(wěn)定的水性溶液，所述溶液是以密封的容器提供的，并且包括 -水性溶劑； -如權利要求1、3或4中任一項限定的病毒顆?；蛉鐧嗬?、6或7中任一項限定的生理活性多肽； -如權利要求I或8至13中任一項限定的賦形劑；以及 -可選地，一種或多種糖類。
26.根據(jù)權利要求25所述的溶液，其中，所述溶液是以密封的小瓶、安瓿、注射器、藥殼、彈性袋或玻璃瓶提供的。
27.根據(jù)權利要求25或26所述的溶液，其中，(a)存在蔗糖，或(b)存在蔗糖還存在棉子糖。
28.根據(jù)權利要求25至27中任一項所述的溶液，所述溶液進一步包括 -佐劑； -生理可接受的緩沖劑；和/或 -張力調(diào)節(jié)劑；和/或 -防腐劑。
29.根據(jù)權利要求25至28中任一項所述的溶液，所述溶液(a)是等滲的，和/或(b)是在氮氣下以所述密封的容器提供的。
30.根據(jù)權利要求25至29中任一項所述的溶液，其中，存在單位劑量的病毒顆?；蚨嚯摹?br> 31.一種用于制備如權利要求25中所述的溶液的方法，所述方法包括 (a)提供水性溶劑中的所述病毒顆粒或多肽、賦形劑、以及可選地，一種或多種糖類的溶液； (b)將所述溶液密封在容器中。
32.根據(jù)權利要求31所述的方法，其中，使步驟(a)中的所述水性溶劑中的所述病毒顆粒、賦形劑以及可選地，一種或多種糖類的所述溶液通過無菌過濾器。
33.一種用于制備如在權利要求25中所述的無菌溶液的方法，所述方法包括(a)將水性溶劑中的所述病毒顆?；蚨嚯摹①x形劑以及可選地，一種或多種糖類的溶液密封在容器中；以及 (b)將所述容器中的所述溶液滅菌。
34.一種用于制備如在權利要求16中限定的無菌藥用溶液的方法，所述方法包括提供藥用水性溶劑中的病毒顆粒--(Cm烷基)-甘氨酸、N，N-二((V6烷基)-甘氨酸或N, N, N-三((V6烷基)-甘氨酸或其生理可接受的鹽或酯；如在權利要求16中限定的化學式(IIC)的砜化合物；以及可選地，一種或多種糖類的無菌溶液；
35.根據(jù)權利要求34所述的方法，其中，(a)在無菌條件下混合所述溶液的各組分，或混合所述溶液中的各組分并將所述溶液滅菌，或(b) 在無菌條件下混合所述溶液的各組分，或混合所述溶液中的各組分、 將所述溶液滅菌并且將所述無菌溶液密封在容器中。
36.根據(jù)權利要求34或35所述的方法，包括 Ca)提供藥用水性溶劑中的所述病毒顆粒；所述Ν-((；_6烷基)-甘氨酸、N, N- 二((V6烷基)-甘氨酸或N，N, N-三(Cu烷基)-甘氨酸或其鹽或酯；所述化學式(I)的砜化合物；以及可選地，一種或多種糖類的溶液；以及 (b)使所述溶液通過滅菌過濾器；以及 (c)可選地，將所述溶液密封在容器中。
37.根據(jù)權利要求34或35所述的方法，包括 (a)將藥用水性溶劑中的病毒顆粒烷基)_甘氨酸、N，N-二((V6烷基)_甘氨酸或N，N, N-三((V6烷基)-甘氨酸或其鹽或酯；所述化學式(I)的砜化合物；以及可選地，一種或多種糖類的溶液密封在容器中；以及 (b)將在所述容器中的所述溶液滅菌。
38.根據(jù)權利要求31至37中任一項所述的方法，其中所述容器是小瓶、安瓿、注射器、藥筒、柔性袋或玻璃瓶。
39.一種提供即用的、儲存穩(wěn)定的水溶液的密封容器，所述容器包括 -水性溶劑； -如權利要求1、3或4中任一項限定的病毒顆粒； -如權利要求9至11中限定的N-(Cu烷基)_甘氨酸、N，N- 二(Cu烷基)_甘氨酸或N, N, N-三((V6烷基)-甘氨酸或其生理可接受的鹽或酯； -如權利要求16或17中限定的化學式(IIC)的砜化合物；以及 -可選地，一種或多種糖類。
40.根據(jù)權利要求39所述的密封容器，其中，(a)在所述溶液中所述(N-Ch烷基)-甘氨酸、N, N- 二(Cu烷基)_甘氨酸或N，N, N-三(Cu烷基)_甘氨酸或其鹽或酯的濃度是從O. I至I. 5M，和/或(b)在所述溶液中所述化學式(IIC)的砜化合物的濃度是從O. I至I. 5M，和/或c)所述溶液包含非還原糖或糖醇，和/或(d)所述溶液包含蔗糖或甘露醇，和/或(e)所述溶液中的所述糖類的濃度是從O. 05至1M。
41.根據(jù)權利要求39或40所述的密封容器，其中，(a)所述溶液進一步包含佐劑；生理可接受的緩沖劑；和/或張力調(diào)節(jié)劑；和/或防腐劑，和/或(b)所述溶液是等滲的，和/或(d)所述密封容器是密封的小瓶、安瓿、注射器、藥筒、柔性袋或玻璃瓶，和/或(e)所述溶液是在氮氣下提供的，和/或(f)在所述溶液中存在單位劑量的病毒顆粒。
42.一種用于生產(chǎn)如權利要求39中限定的密封容器的方法，所述方法包括提供藥用水性溶劑中的病毒顆粒；(N-C1^6烷基)-甘氨酸、N，N- 二(Cu烷基)-甘氨酸或N，N, N-三((^6烷基)_甘氨酸或其生理可接受的鹽或酯；如在權利要求16中限定的化學式(IIC)的砜化合物；以及可選地，一種或多種糖類的溶液；以及將所述溶液密封在容器中。
43.根據(jù)權利要求42所述的方法，其中，(a)在無菌條件下混合所述溶液的各組分，或混合所述溶液中的各組分并將所述溶液滅菌，或(b)在無菌條件下混合所述溶液的各組分，或混合所述溶液中的各組分、將所述溶液滅菌并且在將所述溶液引入容器中之前通過使溶液通過無菌過濾器使所述溶液無菌，和/或(c)所述容器是小瓶、安瓿、注射器、藥筒、柔性袋或玻璃瓶。
44.一種用于制備病毒顆?；蚨嚯牡乃幱盟匀芤旱姆椒?，所述方法包括 Ca)提供所述病毒顆?；蛏砘钚远嚯摹⑷缭跈嗬驣或8至13中任一項限定的賦形劑、以及可選地，一種或多種糖類的溶液； (b)去除所述賦形劑。
45.根據(jù)權利要求44所述的方法，所述方法進一步包括 (c)將所述溶液密封在容器中。
46.如在權利要求I或8至13中任一項限定的賦形劑以及可選地一種或多種糖類在生產(chǎn)病毒或多肽的藥用水性溶液期間保護所述病毒顆?；蚨嚯牡膽谩?br> 47.一種用于保存取自人或動物的樣品的方法，所述方法包括提供(i)所述樣品，(ii)如在權利要求I或8至13中任一項限定的賦形劑，以及(iii)可選地一種或多種糖類的水溶液。
48.一種用于獲得和保存來自人或動物的樣品的方法，所述方法包括(a)獲得來自所述人或動物的所述樣品，以及(b)制備所述樣品、如在權利要求I或8至13中任一項限定的賦形劑、和可選地一種或多種糖類的水溶液。
49.一種水性溶液，所述水性溶液包括(i)取自人或動物的樣品，(ii)如在權利要求I或8至13中任一項限定的賦形劑，以及(iii)可選地一種或多種糖類。
50.根據(jù)權利要求49所述的水溶液，所述水溶液密封在容器中，并可選地儲存在冰箱或冷凍器中。
51.如權利要求I或8至13中任一項限定的賦形劑和可選地一種或多種糖類用于保存取自人或動物的樣品的應用。
52.如權利要求I或8至13中任一項限定的賦形劑和可選地一種或多種糖類在冷凍干燥包含病毒顆粒的溶液之前用于保存所述溶液的應用。
全文摘要
一種無菌藥用水性溶液，該溶液是以密封的容器提供的，并且包括藥用水性溶劑；病毒顆粒或生理活性多肽；選自聚乙烯亞胺、化學式(I)的化合物或其生理學可接受的鹽或酯；或化學式(II)的化合物或其生理學可接受的鹽或酯的賦形劑；以及可選地，一種或多種糖類。
文檔編號A61K47/26GK102892427SQ201180018128
公開日2013年1月23日 申請日期2011年3月31日 優(yōu)先權日2010年3月31日
發(fā)明者杰弗里·德魯, 戴維·伍德華德, 約翰·班布里奇, 阿曼達·科爾泰恩 申請人:穩(wěn)定性科技有限公司