專利名稱：：預(yù)防或治療豬鏈球菌病的復(fù)方抗生素組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種治療動(dòng)物細(xì)菌感染的藥物組合物，尤其涉及一種預(yù)防或治療豬鏈球菌病的復(fù)方抗生素組合物，屬于動(dòng)物細(xì)菌病的防治領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：豬鏈球菌病是由多種不同群的致病性鏈球菌引起的動(dòng)物和人類共患的一種多型傳染病。因?yàn)樨i鏈球菌的血清群眾多，給其用疫苗的方法防制該病帶來(lái)了困難，所以在臨床上普遍釆用藥物進(jìn)行預(yù)防和治療?？咕幬飶V泛應(yīng)用于臨床，有效地控制了豬鏈球菌病，但與此同時(shí)細(xì)菌耐藥性成為全球面臨的嚴(yán)峻問(wèn)題?，F(xiàn)行的基于最小抑菌濃度(MIC)的治療策略，是通過(guò)抗菌藥物殺死或抑制豬鏈球菌敏感細(xì)菌，依賴宿主防御系統(tǒng)清除豬鏈球菌突變菌，從而達(dá)到控制感染，減少嚴(yán)重不良反應(yīng)的目的。但從公共健康角度看，豬在反復(fù)使用抗菌藥物后所產(chǎn)生的選擇壓力，使細(xì)菌中的突變亞群逐漸發(fā)展成為優(yōu)勢(shì)菌群，導(dǎo)致細(xì)菌發(fā)生不同水平的耐藥。而這種耐藥又迅速在細(xì)菌間傳播，以致在全世界范圍內(nèi)播散，構(gòu)成人類健康的嚴(yán)重威脅。這就迫切需要我們尋找新的治療策略，在控制感染的同時(shí)防止細(xì)菌耐藥的進(jìn)一步發(fā)展。因此，如何合理使用及開(kāi)發(fā)現(xiàn)有的抗菌藥物，減少和延緩細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生，就顯得十分重要。基于美國(guó)學(xué)者Zhao等首先提出了關(guān)于防細(xì)菌耐藥突變選4奪濃度(mutantpreventionconcentration,MPC)、突變選擇窗(mutantselectionwindow,MSW)的新假說(shuō)和新理論，為臨床優(yōu)化抗菌藥物給藥方案，限制耐藥突變體選擇性擴(kuò)增提供了新思路。MPC是指抑制細(xì)菌耐藥突變體被選擇性富集擴(kuò)增所需的最低抗菌藥物濃度。MSW指MIC和MPC之間的濃度范圍。選擇指數(shù)(selectionindex,SI)是指MPC與MIC之比，用于比較抗菌藥物選擇耐藥突變體的能力。SI可反映MSW的大小，指數(shù)越小，MSW越窄，產(chǎn)生耐藥菌抹的可能性越??；反之，MSW越寬，越可能篩選出耐藥菌抹?；谪i鏈球菌病的危害和防治現(xiàn)狀，國(guó)內(nèi)外均在尋找對(duì)豬鏈球菌高效的藥物，通過(guò)篩選、研發(fā)高效的藥物，用于免疫失敗的豬群治療就顯得十分重要?，F(xiàn)有的預(yù)防或治療豬鏈球菌病的抗生素雖然具有療效顯著等優(yōu)點(diǎn)，但大多不同程度的存在易出現(xiàn)耐藥突變體，安全性差，毒副反應(yīng)高等缺陷，有待改進(jìn)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種新的預(yù)防或治療豬鏈球菌病的復(fù)方抗生素組合物，該藥物組合物可以在安全劑量下，既殺滅豬鏈球菌，又不至于出現(xiàn)耐藥突變體，具有安全、毒副反應(yīng)低，療效顯著等優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的一種治療豬鏈球菌病的復(fù)方抗生素組合物，由治療上有效量的鹽酸林可霉素和石危酸慶大霉素組成；為了達(dá)到更好的預(yù)防或治療效果，優(yōu)選的，將鹽酸林可霉素和硫酸慶大霉素按照3:8的重量比例組成。慶大霉素又稱正泰霉素，是放線菌屬小單孢菌所產(chǎn)生的氨基糖苷類廣譜抗生素，為繁殖期殺菌藥，可阻止細(xì)菌細(xì)胞壁合成或損傷胞漿膜。對(duì)耐藥性金葡球菌、綠膿桿菌、變形桿菌、大腸桿菌、鏈球菌等敏感菌所引起的各種嚴(yán)重感染，如呼吸道、腸道、泌尿道、乳腺炎及皮膚、軟組織等部位感染和敗血癥等；林可霉素又稱潔霉素，由鏈絲菌變異菌林的發(fā)酵液中提取的林可胺類抗生素。臨床上應(yīng)用于革蘭氏陽(yáng)性菌引起的各種感染，特別適用于耐青霉素、紅霉素菌林的感染或?qū)η嗝顾剡^(guò)敏的患畜，如肺炎、蜂窩織炎、骨髓炎和敗血癥等疾病。本發(fā)明首先進(jìn)行了鹽酸林可霉素和石危酸慶大霉素聯(lián)合應(yīng)用后對(duì)豬鏈球菌的藥敏試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果表明，鹽酸林可霉素與硫酸慶大霉素合用對(duì)豬鏈球菌分離林具有協(xié)同或相加作用(占88.5°/。)，聯(lián)用后測(cè)得的MIC均有不同程度的降低，將二者合用可提高療效、減少耐藥發(fā)生和P爭(zhēng)低毒副反應(yīng)，其機(jī)制是由于兩藥通過(guò)不同途徑阻斷細(xì)菌蛋白合成，并使細(xì)胞膜缺損，達(dá)到快速抑菌殺菌作用。本發(fā)明還進(jìn)行了鹽酸林可霉素聯(lián)合硫酸慶大霉素縮小豬鏈球菌耐藥突變選擇窗的試驗(yàn)，結(jié)果鹽酸林可霉素，硫酸慶大霉素及二者合用對(duì)豬鏈球菌SS2的MIC分別是24tig/ml，26ug/ml,16iig/ml。試驗(yàn)結(jié)果表明鹽酸林可霉素和硫酸慶大霉素聯(lián)合應(yīng)用可以有效的降低單藥對(duì)豬鏈球菌SS2的MIC,即兩藥合用具有協(xié)同作用。鹽酸林可霉素、硫酸慶大霉素及鹽酸林可霉素-硫酸慶大霉素合藥的SI指數(shù)分別8、7.3和6.4，表明兩藥合用可以縮小鹽酸林可霉素，硫酸慶大霉素對(duì)豬鏈球菌SS2的MSW,從而有效的防止耐藥。其原因是由于當(dāng)兩種藥物的濃度同時(shí)處于各自的MIC之上時(shí)，病原菌面臨兩種藥物的選擇壓力，須同時(shí)發(fā)生兩種耐藥突變才能生長(zhǎng)，抑制突變體選擇富集的濃度較單藥治療時(shí)有所降低,從而導(dǎo)致病原菌的MSW縮小。這樣在臨床上，就不必保持抗菌藥物濃度在其MPC之上來(lái)防止耐藥產(chǎn)生。而是通過(guò)不同作用機(jī)制的抗菌藥物聯(lián)合應(yīng)用，并同時(shí)保持在各自的MIC之上治療感染，以降低毒副作用發(fā)生可能，達(dá)到抗菌藥物在安全劑量下，既殺滅敏感菌，又不至于出現(xiàn)耐藥突變體選擇的理想效果。本發(fā)明藥物組合物既能有效預(yù)防或治療豬鏈球菌病，同時(shí)又具有減少和延緩豬鏈球菌耐藥性產(chǎn)生的優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明復(fù)方抗生素組合物可以按照常規(guī)的藥物制劑方法制備成口服制劑(例如散劑)或注射劑。本發(fā)明復(fù)方抗生素組合物的用法和參考用量將本發(fā)明復(fù)方抗生素組合物按照10mg/kg肌肉注射發(fā)病豬只，每天2次，連續(xù)注射一周。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步描述本發(fā)明，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和特點(diǎn)將會(huì)隨著描述而更為清楚。但這些實(shí)施例僅是范例性的，并不對(duì)本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下可以對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案的細(xì)節(jié)和形式進(jìn)行修改或替換，但這些修改和替換均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。試驗(yàn)例1鹽酸林可霉素和硫酸慶大霉素聯(lián)合藥敏試驗(yàn)一、試驗(yàn)材料1.細(xì)菌豬鏈球菌菌抹SS2，由美國(guó)CDC提供。26林豬鏈球菌為臨床分離抹。2.培養(yǎng)基及儀器腦心浸液培養(yǎng)基、瓊脂、結(jié)晶紫溶液、碘液、95%乙醇、沙黃溶液、0.9%生理鹽水、甘油、EDTA、溫箱、生物顯樣M竟、震蕩培養(yǎng)箱、離心才幾、冰箱、麥?zhǔn)媳葷峁?、移液槍、Tip頭、酒精燈、試管、平皿、96孔微量培養(yǎng)皿。3.抗菌藥物鹽酸林可霉素標(biāo)準(zhǔn)品；^琉酸慶大霉素標(biāo)準(zhǔn)品。以上藥物用無(wú)菌蒸餾水配制使鹽酸林可霉素濃度為128(mg/ml、硫酸慶大霉素濃度為1280化/ml的儲(chǔ)備液，將鹽酸鹽酸林可霉素和硫酸硫酸慶大霉素按照3:8的重量比例混勻，-20°C保存。分裝后-2(TC保存?zhèn)溆谩６?、?瞼方法1、單藥藥敏測(cè)定單藥最低抑菌濃度(MinimumInhibitoryConcentration,MIC)測(cè)定采用微量肉湯稀釋法，分別測(cè)定了26抹豬鏈球菌和1林質(zhì)控菌抹對(duì)單藥鹽酸林可霉素和硫酸慶大霉素的MIC值。具體方法如下(1)將豬鏈球菌分離林及標(biāo)準(zhǔn)抹的凍存菌林接種至腦心浸液瓊脂平板，37°C孵育過(guò)夜。取菌落制成0.5麥?zhǔn)瞎軕乙海缓笙♂尀榧s5x106CFU/ml。(2)取凍存的抗菌藥貯存液融化后，以腦心浸液培養(yǎng)基分別進(jìn)行系列二倍稀釋,依次加入無(wú)菌96孔微孔板每排1-11孔中，每孔100u1,藥物濃度從512yg/ml至0.5yg/ml,最后一孔(第12孔)未加抗生素作為對(duì)照。(3)每孔加入菌懸液O.01ml，4吏菌終濃度約為5X105CFU/ml,混勻后蓋好，于37。C孵育24h。(4)以肉眼觀察，藥物最低濃度孔無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)者(細(xì)菌生長(zhǎng)完全抑制)，即為受試菌的MIC。讀取菌抹的MIC前，應(yīng)檢查生長(zhǎng)對(duì)照管的細(xì)菌生長(zhǎng)情況是否良好，質(zhì)控菌株的MIC值是否處于質(zhì)控范圍。質(zhì)控菌ATCC29213的MIC參考值鹽酸林可霉素為0.5^g/ml,硫酸慶大霉素為l^g/ml。2、聯(lián)合藥敏試驗(yàn)采用微量棋盤稀釋法。根據(jù)測(cè)得的每林菌的單藥MIC值，確定聯(lián)合藥敏的藥物濃度，用滅菌的腦心浸液培養(yǎng)基分別倍比稀釋，抗菌藥濃度4MIC、2MIC、1MIC、0.5MIC，各取50n1，交叉組合于微孔板孔中(如表1)，使微孔板的每一列中加入相同濃度的鹽酸林可霉素，硫酸慶大霉素濃度則依次為2MIC、MIC、0.5MIC、0.25MIC;在微孔板的每一行中，硫酸慶大霉素濃度相同，鹽酸林可霉素濃度依次為2MIC、1MIC、0.5MIC、0.25MIC。每孔加入菌懸液0.Olml,混合均勻并蓋好，于37。C孵育24h。細(xì)菌生長(zhǎng)指標(biāo)同單藥藥敏試驗(yàn)，無(wú)菌生長(zhǎng)的最低藥物濃度為聯(lián)用時(shí)的MIC。表1不同濃度的鹽酸林可霉素和硫酸慶大霉素棋盤法組合方式<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>通過(guò)計(jì)算部分抑菌濃度指數(shù)(FractionalInhibitoryConcentration,FIC)判斷聯(lián)合用藥的相互作用。FIC=聯(lián)合用藥時(shí)鹽酸林可霉素的MIC/單獨(dú)應(yīng)用時(shí)鹽酸林可霉素MIC+聯(lián)合應(yīng)用時(shí)硫酸慶大霉素的MIC/單獨(dú)應(yīng)用時(shí)碌u酸慶大霉素MIC，F(xiàn)IC指數(shù)《0.5,協(xié)同作用；0.5<FIC《1,累加作用；1〈FIC《2.0，無(wú)關(guān)作用；FIC>2.0,拮抗作用。兩種抗菌藥物聯(lián)合，在體外或動(dòng)物體內(nèi)可表現(xiàn)為"無(wú)關(guān)"、"相加"、"協(xié)同"和"拮抗"四種作用，無(wú)關(guān)作用指聯(lián)合應(yīng)用后總的作用不超過(guò)聯(lián)合用藥中較強(qiáng)者，等于兩者相加的總和稱為相加作用，聯(lián)合后的效果超過(guò)各藥作用之和為協(xié)同作用，拮抗作用為聯(lián)合用藥的作用因相互發(fā)生抵消而減弱。三、試驗(yàn)結(jié)果鹽酸林可霉素、硫酸慶大霉素及鹽酸林可霉素、硫酸慶大霉素復(fù)方藥物聯(lián)合用藥后藥敏試驗(yàn)結(jié)果及FIC比例分別見(jiàn)表2、表3。由表2中可以看出，兩藥合用后，除三沖朱豬鏈球菌FIC>1.0，即兩者聯(lián)合對(duì)此三抹菌顯示無(wú)關(guān)或拮抗作用(占11.5%)外，其余菌林MIC均有不同程度的降低，F(xiàn)IC《1，即將鹽酸林可霉素和硫酸慶大霉素合用對(duì)其余的23抹(88.5%)豬鏈球菌表現(xiàn)為協(xié)同或相加的作用。表226株豬鏈球菌聯(lián)合藥敏試驗(yàn)結(jié)果MIC(嗎/ml)菌株編號(hào)單用LIN單用GEN合用LIN/GENFIC指數(shù)D216168/4T1351232128/4YBS316168/42-242563232/42-25321616/42-3532168/83-38164/4l代8164/204-1256256256/25604-3844/0.504-48162/404-5882/104-68162/804-7128128128/12804-8256128128/3204-9256128256/12804-11884/404-12442/2W-"8162/404-14884/404-158164/804-16482/10"S326416/3205-3884/105-3625664128/6405-37888/2MIC508164/4MIC90256128128/64ATCC292130.510.25/0.125LIN鹽酸林可霉素，GEN硫酸慶大霉素；注FICSO.5為協(xié)同；0.5<FIC51為相加；1<FICS2.0為無(wú)關(guān)；FIC>2.0為拮抗；從表3中可看出聯(lián)合后鹽酸林可霉素的MICs。和MIC9。分別降為4"g/ml和6411g/ml,硫酸慶大霉素的MIC5。和MIC,。分別降為4!ig/ml和128ug/ral。表3硫酸慶大霉素、鹽酸林可霉素復(fù)方藥物對(duì)26株豬鏈球菌FIC比例FIC指數(shù)株數(shù)比例(％)SO.5623.1%0.5<FI兇1765.4%1<FIC^2.0311.5%FIC>2.0000.750.3750.750.250.750.750.750.62520.6250.50.3750.7520.75210.50.5110.62510.62510.75加同加同加加加加關(guān)加同同加關(guān)加關(guān)加同同加加加加加加加才甘才哲才木才才hK才甘甘杉hK才3木甘甘.lv木.Kr禾射射.K,以上試驗(yàn)結(jié)果表明，鹽酸林可霉素與硫酸慶大霉素素合用對(duì)豬鏈球菌分離林具有協(xié)同或相加作用(占88.5%)，聯(lián)用后測(cè)得的MIC均有不同程度的降低，將二者合用可提高療效、減少耐藥發(fā)生和降低毒副反應(yīng)，其機(jī)制是由于兩藥通過(guò)不同途徑阻斷細(xì)菌蛋白合成，并使細(xì)胞膜缺損，達(dá)到快速抑菌殺菌作用。因此，臨床上治療由豬鏈球菌引起的嚴(yán)重感染，可采用鹽酸林可霉素與硫酸慶大霉素聯(lián)合用藥方案。試驗(yàn)例2鹽酸林可霉素聯(lián)合硫酸慶大霉素縮小豬鏈球菌耐藥突變選擇窗的試驗(yàn)一、試驗(yàn)材料1.細(xì)菌豬鏈球菌菌林SS2，由美國(guó)CDC提供。26抹豬鏈球菌為臨床分離林。2.培養(yǎng)基及儀器腦心浸液培養(yǎng)基、瓊脂、結(jié)晶紫溶液、碘液、95%乙醇、沙黃溶液、0.9°/。生理鹽水、甘油、EDTA、溫箱、生物顯微鏡、震蕩培養(yǎng)箱、離心機(jī)、冰箱、麥?zhǔn)媳葷峁?、移液槍、Tip頭、酒精燈、試管、平皿、96孔微量培養(yǎng)mr。3.抗菌藥物鹽酸林可霉素標(biāo)準(zhǔn)品；石克酸慶大霉素標(biāo)準(zhǔn)品。以上藥物用無(wú)菌蒸餾水配制使鹽酸林可霉素濃度為1280[xg/ml、碌u酸慶大霉素濃度為1280^g/ml的儲(chǔ)備液，按照3:8的比例混勻，-20。C保存。分裝后-2(TC保存?zhèn)溆?。二、試?yàn)方法1、最低抑菌濃度測(cè)定釆用瓊脂平板二倍稀釋法用倍比稀釋法配制鹽酸林可霉素和硫酸慶大霉素，濃度分別為0.002、0.004、0,008、0.016、0.031、0.063、0.125、0，25、0.5、1、2和化g/ml。取SS2放入2ml肉湯中，37。C過(guò)夜培養(yǎng)，先將菌液濃度調(diào)整為0.5麥?zhǔn)蠁挝?約1.5xl08cfu/ml)，然后再將菌液濃度稀釋L5xl06cfu/ml。分別取1.5xl06cfu/ml菌液IO吣接種于不同濃度的抗菌藥物平板上，37。C培養(yǎng)18h后觀察結(jié)果，以平板上無(wú)菌生長(zhǎng)的最低藥物濃度定為MIC。具體方法如下瓊脂稀釋法測(cè)定最低抑菌濃度(MIC)(1)將保存在15。/。甘油肉湯中的菌林接種在瓊脂平板上，置入37。C恒溫培養(yǎng)箱中，孵育18-24小時(shí)。(2)準(zhǔn)備抗生素MH平板:計(jì)算出所需抗生素平板的個(gè)數(shù)，x15ml推算出所需的MH培養(yǎng)基的量，配制MH培養(yǎng)基并高壓滅菌。用倍比稀釋法配制鹽酸林可霉素和硫酸慶大霉素，藥物終濃度分別為0.002、0.004、0.008、0.016、0.031、0.063、0.125、0.25、0.5、1、2和化g/ml。(3)取SS2—個(gè)菌落放入2ml肉湯中，37。C過(guò)夜培養(yǎng)，先將菌液濃度調(diào)整為0.5麥?zhǔn)蠁挝患s1.5xl08cfu/ml,然后再將菌液濃度稀釋到1.5xl06cfu/ml。100pL均勻涂抹在每個(gè)含有倍比稀釋的抗菌藥物瓊脂平板上，每個(gè)濃度4個(gè)平板。(4)將接種后的抗生素平板水平置入37。C恒溫培養(yǎng)箱中孵育18—24小時(shí)后，讀取抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的最小抗生素濃度，即為MIC。2、MIC"則定以抑制99°/接種細(xì)菌菌落生長(zhǎng)的最低抗菌藥物濃度定義為MIC99。采用瓊脂平板稀釋法測(cè)定藥物對(duì)SS2的MIC99。參照zhao等報(bào)道的方法，以各藥MIC為基準(zhǔn)，線性遞減(10%)抗菌藥物濃度配制含藥瓊脂平板直至1/2MIC,藥物平皿鋪好后，4'C保存，一周內(nèi)用完。采用肉湯法進(jìn)^f亍細(xì)菌富集，將單個(gè)菌落^^妄種于2ml肉湯中，37'C過(guò)4復(fù)培養(yǎng)。比濁法將菌液濃度先調(diào)整為3.0xl08cfu/ml,再用肉湯10倍倍比稀釋至3.0xl03cfu/ml。用微量加樣器在每個(gè)含藥平皿及無(wú)藥平皿分別接種不同濃度菌液IOOML,37。C過(guò)夜培養(yǎng)，選擇合適菌液濃度的點(diǎn)進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。以藥物濃度為橫坐標(biāo)，菌落恢復(fù)生長(zhǎng)的比例為縱坐標(biāo)繪制抗菌藥物濃度一恢復(fù)生長(zhǎng)菌落比例曲線，計(jì)算MICm。3、MPC測(cè)定采用瓊脂平板稀釋法測(cè)定抗菌藥物對(duì)SS2的MPC。參照zhao等報(bào)道的方法，以各藥MIC為基準(zhǔn)，采用倍比稀釋法配置抗菌藥物平板，藥物濃度從MIC到16[xg/ml，藥物平板鋪好后，4'C保存，一周內(nèi)用完。細(xì)菌富集方法將細(xì)菌單個(gè)菌落接種于肉湯中，200次/min過(guò)夜震蕩培養(yǎng)，菌液3000r/min離心后，棄上清，細(xì)菌再懸浮于10倍原肉湯中，200次/min震蕩培養(yǎng)6h,菌液再次3000r/min離心后，棄上清，將菌液濃度調(diào)整為3.0x10"cfu/ml。分別取3.0x1(Tcfu/ml菌液100吣均勻涂抹在每個(gè)含有倍比稀釋的抗菌藥物瓊脂平板上，每個(gè)濃度4個(gè)平板，每個(gè)藥物濃度平板的細(xì)菌總接種量為1.2x101Qcfu。并通過(guò)菌落計(jì)數(shù)確保每個(gè)濃度平^l的^l妄種量〉10"cfu。于37。C孵育，以"h時(shí)沒(méi)有菌落生長(zhǎng)的最低藥物濃度稱為初測(cè)MPC(MPCpr)。測(cè)定MPCpr后，再以MPCpr為基準(zhǔn)，依次遞減(20W抗菌藥物濃度重新配制含藥瓊脂平板，重復(fù)MPCpr測(cè)定時(shí)的細(xì)菌富集及接種，以72h時(shí)不出現(xiàn)菌落生長(zhǎng)的最低藥物濃度定為MPC。對(duì)接近MPC的藥物濃度篩選出的菌抹再接種于無(wú)藥平板上，傳代2次后，再接種于原篩選濃度的抗菌藥物平板上，確保所篩選出的菌抹為耐藥突變抹，將耐藥突變抹凍存?zhèn)溆?。重?fù)以上實(shí)驗(yàn)三次，以確保試驗(yàn)結(jié)果。三、試驗(yàn)結(jié)果鹽酸林可霉素和硫酸慶大霉素對(duì)豬鏈球菌SS2的MIC、MPC、MSW和SI結(jié)果見(jiàn)表4。表4硫酸慶大霉素、鹽酸林可霉素復(fù)方藥物對(duì)豬鏈球菌SS2MlCOg/ml)、MPC(Pg/ml)、MSWOg/ml)禾口SI抗菌藥物MICMIC99MPCMPC/MIC(SI)鹽酸林可霉素24201608硫酸慶大霉素26221607.3硫酸慶大霉素和鹽4.3/11.7(林/慶)1017/47(林/慶)4/3.55酸林可霉素合藥本試驗(yàn)結(jié)果顯示，鹽酸林可霉素，硫酸慶大霉素及二者合用對(duì)豬鏈球菌SS2的MIC分別是24,26，16ug/ml。表明鹽酸林可霉素和硫酸慶大霉素聯(lián)合應(yīng)用可以有效的P條低單藥對(duì)豬鏈球菌SS2的MIC，即兩藥合用具有協(xié)同作用。鹽酸林可霉素、硫酸慶大霉素及鹽酸林可霉素-硫酸慶大霉素合藥的SI指數(shù)分別8、7.3和6.4，表明兩藥合用可以縮小林霉素可，硫酸慶大霉素對(duì)豬鏈球菌SS2的MSW。從而有效的防止耐藥。其原因是由于當(dāng)兩種藥物的濃度同時(shí)處于各自的MIC之上時(shí)，病原菌面臨兩種藥物的選擇壓力，須同時(shí)發(fā)生兩種耐藥突變才能生長(zhǎng)，抑制突變體選擇富集的濃度較單藥治療時(shí)有所降低,從而導(dǎo)致病原菌的MSW縮小。這樣在臨床上，就不必保持抗菌藥物濃度在其MPC之上來(lái)防止耐藥產(chǎn)生。而是通過(guò)不同作用機(jī)制的抗菌藥物聯(lián)合應(yīng)用，并同時(shí)保持在各自的MIC之上治療感染，以降低毒副作用發(fā)生可能，達(dá)到抗菌藥物在安全劑量下，既殺滅敏感菌，又不至于出現(xiàn)耐藥突變體選擇的理想效果。權(quán)利要求1、一種預(yù)防或治療豬鏈球菌病的復(fù)方抗生素組合物，其特征在于由治療上有效量的鹽酸林可霉素和硫酸慶大霉素組成。2、按照權(quán)利要求l所述的復(fù)方抗生素組合物，其特征在于將鹽酸林可霉素和硫酸慶大霉素按照3:8的重量比例組成。3、按照權(quán)利要求1或2所述的復(fù)方抗生素組合物，其特征在于按照常規(guī)藥物制劑方法制備成口服制劑或注射劑。4、權(quán)利要求1或2所述的復(fù)方抗生素組合物在制備預(yù)防或治療豬鏈球菌病藥物中的用途。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種預(yù)防或治療豬鏈球菌病的復(fù)方抗生素組合物，屬于動(dòng)物疾病的防治領(lǐng)域。該復(fù)方抗生素組合物由治療上有效量的鹽酸林可霉素和硫酸慶大霉素組成。鹽酸林可霉素和硫酸慶大霉素通過(guò)不同途徑阻斷豬鏈球菌蛋白質(zhì)的合成，并使豬鏈球菌細(xì)胞膜缺損，達(dá)到快速抑菌殺菌作用。本發(fā)明通過(guò)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，將鹽酸林可霉素和硫酸慶大霉素合用可顯著提高治療豬鏈球菌病的療效，減少耐藥發(fā)生和降低毒副反應(yīng)，具有在安全劑量下既殺滅敏感菌，又不至于出現(xiàn)耐藥突變體選擇的效果。本發(fā)明復(fù)方抗生素組合物既能有效預(yù)防或治療豬鏈球菌病，同時(shí)又具有減少和延緩豬鏈球菌耐藥性產(chǎn)生的優(yōu)點(diǎn)。文檔編號(hào)A61K31/7042GK101543506SQ20091013764公開(kāi)日2009年9月30日申請(qǐng)日期2009年4月29日優(yōu)先權(quán)日2009年4月29日發(fā)明者洋劉,吳聰明,琳崔,陽(yáng)崔,剛徐,李明雁,李曉蕓,李艷華,江海洋,湯樹(shù)生,沈建忠,敏王,肖希龍,棟邊申請(qǐng)人:東北農(nóng)業(yè)大學(xué);中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)