專利名稱：S－烷基－dl－高半胱氨酸－s,r－亞磺酰亞胺藥物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及腫瘤增敏藥物S-烷基-DL-高半胱氨酸-S，R-亞磺酰亞胺藥物組合物。
鑒于惡性腫瘤的發(fā)病率與死亡率逐年上升，作為臨床上常用的放射治療和化學藥物治療均存在著某些不足，例如某些類型的腫瘤對于放療或化療療效極差；放療與化療引起對正常組織的損傷和毒副反應等等，都嚴重影響著治愈率，而腫瘤組織中的乏氧細胞，由于其抗射線的作用，更成為復發(fā)率增加的主要原因之一。
本發(fā)明提供的S-烷基-DL-高半胱氨酸-S，R-亞磺酰亞胺藥物組合物以S-烷基-DL-高半胱氨酸-S，R-亞磺酰亞胺為活性組份，其具有下列通式
其中R1代表具有不同碳原子的烷基、脂肪族、芳香族或雜環(huán)芳基；R2代表氮原子、氨基、酰氨基及其任意取代的烷基；R3代表氫原子或其任意取代的烷基；n代表不同的-CH2-數目在以上述通式為活性組份的藥物組合物中以R1為烷基，R2為氨基，R3為氫原子，n數為2的藥物組合物為首選，尤以其中R1為丁基為最優(yōu)藥物選作腫瘤放射和(或)化學增敏藥物。
本發(fā)明的活性組份通式可以通過中國專利CN1151397A中描述的方法制備。
腫瘤增敏藥可通過對于內源性物質的化學修飾，抑制其對射線具有抗拒性的物質或引起耐藥性的物質。本發(fā)明S-烷基-DL-高半胱氨酸-S，R-亞磺酰亞胺藥物是通過抑制腫瘤細胞中內源性谷胱甘肽的生成合成，以降低其對射線具有的保護作用、同時能引起某些化療藥物(特別是烷化劑類化療藥物)耐藥性的谷胱甘肽含量，促使敏感性增加。
本發(fā)明中所采用的細胞和組織中谷胱甘肽含量的測定為改進的Tietze酶學方法，所測定的腫瘤細胞可以是原代培養(yǎng)的細胞和已培養(yǎng)的細胞株，腫瘤組織可以是動物模型的腫瘤組織和人體腫瘤組織，組織可以是新鮮的標本或經過液氮保存的樣品。
本發(fā)明提供的藥物組合物具有放射和化學增敏作用，能有效地提高腫瘤細胞或組織對射線和化療藥物的敏感性，特別是那些對射線敏感性差或對化療藥物具有耐藥性的腫瘤細胞或組織，使其臨床療效增加，同時，其毒性很小，可用于臨床腫瘤病人的治療。
本發(fā)明用急性毒性實驗(小鼠)和慢性毒性實驗(犬、大鼠)表示該藥無論是口服或靜脈注射其毒性很低。
用Ames試驗方法對TA79、TA78、TA100、TA102菌株經S9代謝系統(tǒng)作用后的誘變試驗和不經代謝活化的直接作用，均顯示該藥無致突變作用。
用微核試驗和染色體畸變試驗結果也同樣表明該藥無致畸變作用。
本發(fā)明所提供的藥物組合物可用作多種惡性腫瘤的治療，包括各種實體腫瘤、肉瘤、淋巴瘤、白血病等，特別優(yōu)選為惡性人腦膠質瘤、非小細胞肺癌、卵巢癌、肝癌等。
用藥劑量最終由醫(yī)師自行掌握，但應考慮各種因素包括腫瘤的類型、種類、患者狀況(年齡、體重、性別、體質)、給藥方式等因素而定，適宜的有效劑量為大約0.01～1700mg/m2，例如0.1～1600mg/m2，最好為大約0.1～1000mg/m2，可以單次或多次給予(如每日2～6次)，或以靜脈注入方式給予。
本發(fā)明提供的藥物組合物可以單獨給予，但最好是與放射治療或與其他抗癌藥物合并給予為佳?？稍诜派浠蚩拱┧幬锸褂们啊⑼瑫r或使用后給予，但最好在前0.5～48小時為優(yōu)。給藥途徑可以口服、注射、局部、吸入等，優(yōu)選口服和注射。
本發(fā)明中，適用口服的劑型，例如膠囊、扁膠囊、片或錠，其均含有預先規(guī)定量的上述藥物。配制的形式還可是粉裝或粒裝，或水及非水溶液，如糖漿、乳劑、口服液等。
除上述主藥外，本發(fā)明的配制藥可包括一種或多種由下列物質中選取的輔助成分稀釋劑、緩沖劑、食用香料、粘結劑、表面活性劑、增稠劑、防腐劑(包括抗氧化劑)及其類似物。
本發(fā)明中提供的藥物或其藥學上可接受的鹽及其具有活性的其它衍生物可用作惡性腫瘤的治療。
本發(fā)明提供的藥物組合物不論在口服或腹腔及靜脈給藥時，均可提高人惡性腦膠質瘤、肺癌、肝癌、子宮癌、卵巢癌、乳腺癌等常見惡性腫瘤對多種化療藥物例如PAM(苯丙氨酸氮芥)、CTX(環(huán)磷酰胺)、DDP(順鉑)、ADR(阿霉素)、5-Fu(5-氟尿嘧啶)、VP16(鬼臼)等的敏感性或克服耐藥性。
本發(fā)明經試驗證明，可明顯提高人視網膜母細胞瘤、人腺樣囊性癌細胞，以及U14宮頸癌、S37肉瘤、Lewis肺癌、S180肉瘤等惡性腫瘤的放射增敏作用；可明顯提高化療藥物尤其是烷化劑類抗癌藥物的作用，如增加5-Fu、DDP、CTX、PAM等對離體人紅白血病、K562細胞、SGC-7901人胃癌細胞、3-A0人卵巢癌細胞、SGH-44人惡性腦膠質瘤細胞等的作用。
實施例1取對數生長期的細胞，胰酶消化后計數并離心收集，加蒸餾水及12％硫代水楊酸后再離心，收集上清液定量，加測定體系液后于波長412nm處的分光光度測定，通過計算，得出每一細胞內谷胱甘肽的含量。
取新鮮或液氮保存的組織，稱重后制成勻漿，加適當EDTA-Na2后于冰浴中制成組織勻漿，加蒸餾水及三氯乙胺后震蕩，離心取上清液定量，加測定體系液后于波長412nm處的分光光度測定，計算得出每毫克組織(或毫克蛋白)內谷胱甘肽的含量。
用上述方法測定人視網膜母細胞瘤細胞及組織、人惡性腦膠質瘤細胞及組織的內源性谷胱甘肽分別為2.7126±1.3272×10-12mmol/細胞，1.2991±0.3328μmol/g15.5400±0.1700×10-12mmol/細胞，0.3860±0.1940μmol/g實施例2本發(fā)明所提供的藥物能有效地降低上述兩種人體惡性腫瘤細胞和組織中內源性谷胱甘肽的含量。
人視網膜母細胞瘤細胞在用本發(fā)明的藥物后，細胞內的內源性谷胱甘肽含量立即下降，2小時時降低了44.96％，24小時時降低了83.65％。瘤組織在用藥后內源性谷胱甘肽含量也立即下降，6小時時降低了55.82％，24小時時降低了70.35％。
人惡性腦膠質瘤細胞在用本發(fā)明的藥物后，細胞內的內源性谷胱甘肽含量立即下降，2小時時降低了36.89％，24小時時降低了88.48％。瘤組織在用藥后內源性谷胱甘肽含量也立即下降，6小時時降低了64.25％，24小時時降低了93.26％。
實施例3對中國倉鼠V79-379A細胞的放射增敏活性用離體單細胞集落形成法研究在有氧與乏氧條件下，V79-379A細胞在不同濃度的藥物作用下，經60Coγ-射線照射后的放射增敏活性。試驗用藥溶解于三重蒸餾水中，過濾滅菌，細胞用Eargle培養(yǎng)液加小牛血清，于5％二氧化碳恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，一周后觀察細胞集落形成數，從細胞存活率中計算出基本參數(Do，Dg，OER和SER)結果表明在用藥濃度為0.5～1.0mmol/L時均顯示出較好的放射增敏活性。
實施例4對人紅白血病細胞及胃癌細胞的化學增敏活性。
用離體培養(yǎng)的人紅白血病細胞K562和人胃癌細胞SGC-7901，采用活細胞計數方法，在該藥與化療藥物順鉑和5-氟尿嘧啶分別合用后，都能顯示其化學增敏活性，例如在與5-氟尿嘧啶合用時，可使SGC-7901細胞的抑制率增加(達66.67％)。
實施例5汪××，男56歲，92年10月底因頭痛伴噴射性嘔吐，失語10余天，經頭顱CT檢查發(fā)現“左側顱內占位”，右側肢體癱瘓，于92-11-19行腫瘤次全切除術，病理為星型細胞膠質瘤IV級。入院體檢，神志清醒，行動遲鈍，運動性失語，右上肢上抬受限，上舉不超過肩，右手握力弱于左側，方療前CT示左顳葉不規(guī)則片狀水腫區(qū)及積氣影，左側腦室輕度受壓，腦膜、組織有膨出現象。從92-12-23起作60Coγ-射線照射和本發(fā)明藥物合并治療在治療過程中未發(fā)現藥物不良反應，血象及肝腎功能均無異常改變，治療結束時一般情況良好，神清，行動自如，答題正確，四肢張力均已恢復正常，CT檢查左顳區(qū)銀標記后方見2.1×2.2cm高密度影，其周圍見腦組織水腫。評價有效。
實施例6韓××，男，54歲，痰中帶血半月余，經X線胸片發(fā)現右上肺塊影，支氣管鏡檢查為“右上肺鱗癌”，胸部CT示右上肺葉中心型肺癌，伴右鎖骨上淋巴結轉移。于92-12-4住院，進行60Coγ-射線照射和本發(fā)明藥物合并治療，療程結束時一般情況尚好，右鎖骨上淋巴結消失，攝胸片示在右上肺后段殘留直徑為4cm較淡之結節(jié)陰影。療效評價臨床緩解。
權利要求
1.一種藥物組合物，其含有通式
其中R1代表具有不同碳原子的烷基、脂肪族、芳香族或雜環(huán)芳基；R2代表氮原子、氨基、酰氨基及其任意取代的烷基；R3代表氫原子或其任意取代的烷基；n代表不同的-CH2-數目S-烷基-DL-高半胱氨酸-S，R-亞磺酰亞胺作為其活性成分和藥用載體。
2.如權利要求1所述的藥物組合物，可作腫瘤放射治療增敏藥物的用途。
3.如權利要求1所述的藥物組合物，可作腫瘤化學藥物治療增敏藥物的用途
4.如權利要求1所述的藥物組合物，可用于治療各種實體瘤、肉瘤、淋巴瘤、白血病的藥物用途，特別優(yōu)選的是用于治療惡性人腦膜瘤、非小細胞肺癌、卵巢癌、肝癌的用途。
5.如權利要求1至3所述的藥物組合物，可在放療和/或化療前、后、同時應用，尤以治療前0.5～48小時或連續(xù)應用為佳。
6.如權利要求1所述的藥物組合物，可以口服，靜脈、腹膜內、皮下、皮內、肌肉、局部、瘤內注射和介入治療法使用。
7.如權利要求1所述的藥物組合物，其制劑可用膠囊劑、包覆/未包覆片劑、口服液、注射劑、懸浮液、凍干劑、噴霧劑、氣溶膠和糖衣等。
8.如權利要求1所述的藥物組合物，其活性成分占藥物組合物重量的約0.1～99.9％，最好占藥物組合物重量的約20～80％。
全文摘要
本發(fā)明涉及腫瘤增敏藥物S－烷基－DL高半胱氨酸－S,R－亞磺酰亞胺藥物組合物。該類藥物組合物具有的生物學效應適用于提高腫瘤的放射治療與化學治療的療效。通過對腫瘤細胞或組織的化學修飾作用而增強其對射線和化學藥物的敏感性,進而提高腫瘤患者的治愈率,減少治療的復發(fā)率。
文檔編號A61K31/21GK1175410SQ9710653
公開日1998年3月11日 申請日期1997年7月24日 優(yōu)先權日1997年7月24日
發(fā)明者金一尊 申請人:上海醫(yī)科大學