專利名稱：活性天然產(chǎn)物b用于制備抗血管性癡呆產(chǎn)品的用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥和食品技術領域，具體地說是涉及一種中藥提取物——活性天然產(chǎn)物用于制備抗血管性癡呆產(chǎn)品的用途，更具體地說是涉及一種海洋真菌提取物一一 舌'性天然產(chǎn)物 B,艮口 4,6-Dihydroxy-3-methylene-10-propenyl-2-oxa-spiro[4,5] deC-8-ene-l，7-di0ne，用于制備抗血管性癡呆產(chǎn)品的用途。
背景技術：
(一 )海洋真菌的研究概況1、概述海洋微生物以其生存于特殊的生物環(huán)境中而具有產(chǎn)生新型生物活性物質(zhì)的巨大潛力。幾十多年來，從海洋真菌中分離鑒定近600個結構新穎的次級代謝產(chǎn)物，許多化合物顯示了良好的抗腫瘤、抗菌和抗病毒活性；另有一些化合物顯示出了獨特的生理活性，如抗老年癡呆。因此，海洋微生物是近年來的一個研究熱點。越來越多的研究表明，海洋微生物——尤其是那些跟海洋動物或海洋植物存在共生或寄生等關系的微生物——能產(chǎn)生結構獨特并具強烈生理活性的代謝產(chǎn)物。而且海洋微生物繁殖快，可利用現(xiàn)代微生物技術，大規(guī)模工業(yè)發(fā)酵，有廣闊的應用前景。科學家們預計，開發(fā)新的海洋藥物將寄希望于海洋微生物這一新的領域。2、海洋真菌海洋真菌(Marine Fungi)是生活在海洋中的能形成孢子且有真核結構的微生物， 是一個既能在海水中繁殖和完成生活史、又能在海水培養(yǎng)基上良好生長的真菌類群，又稱海水真菌。即具有真核結構、能形成孢子、營腐生或寄生生活的海洋生物(①J. Kohlmeyer and Ε. Kohlmeyer, Marine Mycology, Academic Press，New York，1979 ；(2) Τ. W. Johnson, F. K. Sparrow, Fungi in Oceans and Estuaries，J. Cramer，Weinheim，1961)。海洋真菌通常為菌絲狀和多細胞，只有酵母菌在發(fā)育階段中有單細胞出現(xiàn)。營養(yǎng)方式除粘菌為攝食式外，多為吸收式。一些來源于海洋并能在海洋生境中生長與繁殖者，稱為專性海洋真菌；另一些來源于陸地或淡水，但能在海洋生境中生長與繁殖者，稱為兼性海洋真菌。它們適應海水的酸堿度，耐高滲透壓能力較強，大多數(shù)棲于某種基物而生活，例如寄生于海藻和海生動物，或者腐生于浸沉在海水中的木材上；少數(shù)自由生活，例如可生長在含鹽的濕地和栲樹沼澤中。因此，真菌在海洋中的分布主要取決于寄主的分布。研究簡史1869年法國M. C. de迪爾約等從海草中首先發(fā)現(xiàn)海洋真菌。1934年， F. K.斯帕羅研究了丹麥海域的藻狀菌類。1944年，E. S.巴洪和D.H.林德發(fā)表研究海洋木生真菌的論文。1961年，T. W.約翰森和F. K.斯帕羅的《海洋與河口真菌》論述了海洋真菌的分類與生物學特性。1978年E. B. G瓊斯主編的《水生真菌學進展》論述了海洋真菌形態(tài)、 生理和生態(tài)方面的研究進展。1979年J.科爾邁爾等的《海洋真菌學-高等真菌》，系統(tǒng)闡述了高等海洋真菌的研究成果。分類目前，多數(shù)學者認為真菌應獨立成界(King-dom mycota) 0但對所屬門、綱等的劃分，至今還沒有一個較為公認的方案。據(jù)現(xiàn)有記載，海洋真菌尚不足500種，僅相當于陸地真菌種數(shù)(約5萬種)的1%。包括絲狀高等海洋真菌209種，海洋酵母菌類177 種，低等海洋真菌藻狀菌類(Phycomycetes)約70種。在高等海洋真菌中，有子囊菌類 (Ascomycetes) 149 種、擔子菌類(Basidiomycetes) 4 種禾口半知菌類(Deuteromycetes) 56 種。海洋真菌可分為海藻寄生菌、木材腐生海水菌和匙孢囊目3類①海藻上的寄生種類有根腫菌屬、破囊壺菌屬、鏈壺菌屬、水霉屬、冠孢殼屬、隔孢球殼屬、球座菌屬、近枝鏈孢屬和變孢霉屬等；②常見的木材腐生海水菌有冠孢殼屬、海生殼屬、木生殼屬、橈孢殼屬、白冬孢酵母屬、擬珊瑚孢屬、腐質(zhì)霉屬和無梗孢屬等；③匙孢囊目寄生在紅藻上，分解鹵索的能力較強。匙孢囊屬提供了菌類起源于紅藻的證據(jù)，有人認為它是海水中木材著生子囊菌的直接祖先。分布海洋真菌分布廣泛，從潮間帶高潮線或河口到深海，從淺海沙灘到深海沉積物中，均有其成員。海洋酵母菌和低等真菌附生于浮游生物和動物體上，因而在大洋中也有分布；高等海洋真菌的生長要求適宜的基物作為棲生場所，因此多集中分布在沿岸海域。由于海洋真菌營腐生或寄生生活，所以其地理分布的特點是取決于寄主的地理分布范圍。但海水中溶解氧的濃度和海水水溫，也是影響海洋真菌存在與發(fā)展的重要因子。幾乎所有真菌都可在小于海水中氧化鈉濃度的條件下生長，因此耐鹽性不能作為區(qū)分海洋真菌與陸地真菌的標志。來源于水深超過500米海洋環(huán)境中的真菌，明顯地具有適應高壓、低溫而生長的能力。現(xiàn)知的深海真菌只有5種，采集樣品的最大水深為5315米。生態(tài)習性大多數(shù)海洋真菌依賴棲住某種基物而生活，只有少數(shù)真菌不依賴基物而自由生活。依其棲生的習性，海洋真菌可分成5種基本的生態(tài)類型①木生真菌。在海洋水體中數(shù)量最多和分布最廣的高等真菌，營腐生生活，善分解纖維素。在熱帶海域和淺海環(huán)境中分布更加廣泛。已知有子囊菌類76種，半知菌類四種， 擔子菌類2種。一類數(shù)量最多、分布最廣的高等海洋真菌。能強烈地分解木材和其他纖維物質(zhì)。它們在熱帶海域的分布較溫帶和極地廣泛，在淺海環(huán)境的分布較深海廣泛。在已知的107種海洋木生真菌中，子囊菌類占76種，半知菌類占四種，擔子菌類只有2種。②寄生藻體真菌。約占海洋真菌種數(shù)的1/3，其中以子囊菌類居多。有腐生、寄生和共生等類型。在海洋真菌中，約有1/3的種與藻類有聯(lián)系，其中以子囊菌類居多。有腐生、寄生和共生等類型。不同海藻的分布可直接影響該類真菌的分布，如在北大西洋的馬尾藻海中，真菌的種類和數(shù)量都很少，也極少發(fā)現(xiàn)被真菌侵染的海藻，這是由于馬尾藻(Sar as-sum spp)具有抗菌作用的單寧酸物質(zhì)。一般說，腐爛海藻上酵母菌的數(shù)量要高于活藻體上和海水中的數(shù)量；附在紅藻和綠藻上的酵母菌數(shù)量，要高于褐藻上的。因為褐藻分泌的酚類物質(zhì)能抑制海洋真菌的生長。一些海洋真菌與特定海藻結合形成專性共生的結合體，即為海洋地衣。③紅樹林真菌。多半是腐生菌，其中子囊菌類23種，半知菌類17種，擔子菌類2 種。紅樹是熱帶亞熱帶潮間帶鹽澤地的植物(見紅樹林生物群落)。棲生在紅樹林的海洋真菌多半是腐生菌，其中有子囊菌類種，半知菌類17種，擔子菌類2種。浸在海水中的紅樹樞干、枝條和根部的表皮被穿孔動物、風浪或人為損傷后，極易被真菌侵入而造成腐爛。但埋在泥中的根部，則不易受真菌侵害。海洋真菌能分解紅樹葉片，為海洋提供大量的有機物碎屑。④海草真菌。數(shù)量很少，多棲居于葉部。數(shù)量較少，其中棲居葉部的真菌較棲根者為多。海草根中含有單寧酸和其他抑制生物生長的物質(zhì)，只有那些能抵抗這類物質(zhì)的海洋真菌才能在海草根上適應生長。⑤寄生動物體真菌。只限寄生在外骨骼和殼部處。只局限于寄生在外骨骼、殼等處。海洋真菌在分解動物體中的纖維素、甲殼素、蛋白質(zhì)和碳酸鈣等過程中，起重要作用。低等海洋真菌是引起海洋魚類和無脊椎動物病害的重要致病菌。海洋真菌常有如下特點①如果屬于子囊菌亞門，則主要為有分解纖維素活力的核菌綱的成員，子囊殼黑色，子囊孢子常具有含酸性多糖的附屬絲，有利于粘附在新基質(zhì)上。通常無分生孢子世代。②如果是不完全菌，則孢子為頂壁孢子型，多為暗色。海洋真菌和海洋細菌都參加海洋有機物的分解和無機營養(yǎng)物的再生過程，不斷為海洋植物提供有效營養(yǎng)；但海洋真菌是海洋動物的寄生菌和致病菌，有的能使海洋植物致病，甚至使港灣設施中的木質(zhì)結構腐爛；某些海洋真菌能破壞聚氨基甲酸酯等高分子合成材料。意義海洋真菌與海洋細菌一樣，參與海洋有機物質(zhì)的分解和無機營養(yǎng)物的再生過程，為海洋植物不斷提供有效營養(yǎng)，在海洋食物鏈中占有重要位置。特別是在海洋沉積物中的真菌菌絲體和酵母菌體，為海洋原生動物、底棲動物等提供了餌料的來源。某些海洋真菌能產(chǎn)生抗菌素和其他生理活性物質(zhì)，是新藥開發(fā)的巨大寶庫，在生態(tài)和應用方面也有重要意義，如降解海洋環(huán)境中的污染物，促進海洋自凈等；利用海洋真菌加工麥麩、甘蔗渣、稻草等，制成廉價的微生物碎屑混合物，用作水產(chǎn)養(yǎng)殖中的飼料。海洋真菌是某些海洋動物的寄生菌和致病菌，如美國牡蠣生產(chǎn)區(qū)曾因真菌的侵害遭受嚴重損失。能引起某些海洋植物的病害，如北大西洋、太平洋沿岸和歐洲的海草曾被網(wǎng)粘菌屬真菌嚴重侵染。海洋木生真菌能腐爛港口設施、防波提及堰提中的木質(zhì)結構和其他纖維材料。某些海洋真菌能破壞海水中的人工合成材料，如聚氨基甲酸酯材料被它們穿透后會膨脹裂壞。3、活性天然產(chǎn)物B的化學結構與制備方法
海洋真菌Massarina tunicata的代謝產(chǎn)物B為首次從中國海海洋真菌中分離得到。真菌中活性產(chǎn)物B及甘露醇均有較高的含量，如果對其培養(yǎng)條件進行更深入的研究，可將Massarina tunicata開發(fā)為一種資源菌，進一步加強在提高免疫功能、抗癌、抗衰老等作用方面的研究。海洋真菌#以6的代謝產(chǎn)物中，膽堿硫酸酯為首次從南中國海海洋真菌中分離得到；3，4，5_三羥基苯甲酸是首次從海洋真菌中發(fā)現(xiàn)。真菌#以6中膽堿硫酸酯及甘露醇均有較高的含量，如果對其培養(yǎng)條件進行更深入的研究，可將#以6開發(fā)為一種資源菌。膽堿硫酸酯(簡稱C0S)廣泛存在于自然界中，它在土壤中硫的微生物轉換方面扮演重要的角色。多種植物、土壤真菌以及細菌都能利用膽堿和PA(3’-phosphoadenosine-5’-phosphos ulphate)作為底物，在硫轉換酶催化作用下合成COS，另一方面在膽堿硫酸酯水解酶的作用下COS可發(fā)生水解，成為生物體內(nèi)膽堿和硫酸基團的來源之一。COS的另一個重要角色是作為抗?jié)B透化合物。3，4，5_三羥基苯甲酸(即沒食子酸)是一種多酚類化合物，由于分子中有一定量的R · OH基，能形成有抗氧化作用的氫自由基(H·)，有超氧陰離子(02_·)和羥基自由基(0H·)等自由基的活性，從而保護組織免受氧化作用的損害，以及提高免疫功能、 抗癌、抗衰老等作用。通過對海洋真菌Massarina sp.，strain CNT-016的深入研究，目前已發(fā)現(xiàn)螺環(huán)內(nèi)酉旨化合物 6-印i-5 ‘ -hydroxy-mycosporulone (參見M. A. Abdel-ffahab et al. / Phytochemistry 68(2007) 1212-1218)，但尚未進行深入的生物活性研究，本發(fā)明的研究涉及到的化合物與其有類似母核，并進行了抗真菌抗腫瘤活性及抗血管性老年癡呆研究。( 二)常規(guī)有效成分的提取分離方法1、溶劑提取法(1)原理溶劑提取法是根據(jù)被提取物原料例如中草藥中各種成分在溶劑中的溶解性質(zhì)，選用對活性成分溶解度大，對不需要溶出成分溶解度小的溶劑，而將有效成分從藥材組織內(nèi)溶解出來的方法。當溶劑加到被提取物原料(例如中草藥，需適當粉碎)中時，溶劑由于擴散、滲透作用逐漸通過細胞壁透入到細胞內(nèi)，溶解了可溶性物質(zhì)，而造成細胞內(nèi)外的濃度差，于是細胞內(nèi)的濃溶液不斷向外擴散，溶劑又不斷進入藥材組織細胞中，如此多次往返，直至細胞內(nèi)外溶液濃度達到動態(tài)平衡時，將此飽和溶液濾出，繼續(xù)多次加入新溶劑， 就可以把所需要的成分近于完全溶出或大部溶出。被提取物原料成分在溶劑中的溶解度直接與溶劑性質(zhì)有關。溶劑可分為親水性有機溶劑及親脂性有機溶劑，被溶解物質(zhì)也有親水性及親脂性的不同。有機化合物分子結構中親水性基團多，其極性大而疏于油；有的親水性基團少，其極性小而疏于水。各類溶劑的性質(zhì)，同樣也與其分子結構有關。這樣，發(fā)明人就可以通過對被提取物原料例如中草藥成分結構分析，去估計它們的此類性質(zhì)和選用的溶劑?？偟恼f來，只要被提取物原料成分的親水性和親脂性與溶劑的此項性質(zhì)相當，就會在其中有較大的溶解度，即所謂“相似相溶”的規(guī)律。這是選擇適當溶劑自被提取物原料中提取所需要成分的依據(jù)之一。(2)溶劑的選擇運用溶劑提取法的關鍵，是選擇適當?shù)娜軇?。溶劑選擇適當，就可以比較順利地將需要的成分提取出來。選擇溶劑要注意以下三點①溶劑對有效成分溶解度大，對雜質(zhì)溶解度小；②溶劑不能與中藥的成分起化學變化；③溶劑要經(jīng)濟、易得、使用安全等。常見的提取溶劑可分為以下三類
①水水是一種強的極性溶劑。被提取物原料中親水性的成分，如無機鹽、糖類、分子不太大的多糖類、鞣質(zhì)、氨基酸、蛋白質(zhì)、有機酸鹽、生物堿鹽及苷類等都能被水溶出。為了增加某些成分的溶解度，也常采用酸水及堿水作為提取溶劑。②親水性的有機溶劑也就是一般所說的與水能混溶的有機溶劑，如乙醇(又稱 酒精)、甲醇(又稱木精)、丙酮等，以乙醇最常用。乙醇的溶解性能比較好，對被提取物原料細胞的穿透能力較強。親水性的成分除蛋白質(zhì)、粘液質(zhì)、果膠、淀粉和部分多糖等外，大多能在乙醇中溶解。難溶于水的親脂性成分，在乙醇中的溶解度也較大。還可以根據(jù)被提取物質(zhì)的性質(zhì)，采用不同濃度的乙醇進行提取。用乙醇提取比用水量較少，提取時間短，溶解出的水溶性雜質(zhì)也少。乙醇為有機溶劑，雖易燃，但毒性小，價格便宜，來源方便，有一定設備即可回收反復使用，而且乙醇的提取液不易發(fā)霉變質(zhì)。由于這些原因，用乙醇提取的方法是歷來最常用的方法之一。甲醇的性質(zhì)和乙醇相似，沸點較低(64°C)，但有毒性，使用時應息。
③親脂性的有機溶劑也就是一般所說的與水不能混溶的有機溶劑，如石油醚、 苯、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、二氯乙烷等。這些溶劑的選擇性能強，不能或不容易提出親水性雜質(zhì)。但這類溶劑揮發(fā)性大，多易燃(氯仿除外)，一般有毒，價格較貴，設備要求較高，且它們透入植物組織的能力較弱，往往需要長時間反復提取才能提取完全。如果藥材中含有較多的水分，用這類溶劑就很難浸出其有效成分，因此，大量提取被提取物原料時，直接應用這類溶劑有一定的局限性。(3)提取方法用溶劑提取被提取物原料成分，常用浸漬法、滲漉法、煎煮法、回流提取法及連續(xù)回流提取法等。同時，原料的粉碎度、提取時間、提取溫度、設備條件等因素也都能影響提取效率，必須加以考慮。①浸漬提取法(簡稱浸漬法)浸漬法系將被提取物原料粉末或碎塊裝入適當?shù)娜萜髦?，加入適宜的溶劑(如乙醇、稀醇或水)，浸漬藥材以溶出其中成分的方法。本法比較簡單易行，但浸出率較差，且如用水為溶劑，其提取液易發(fā)霉變質(zhì)，須注意加入適當?shù)姆栏瘎?。②滲漉提取法(簡稱滲漉法)滲漉法是將被提取物原料粉末裝在滲漉器中，不斷添加新溶劑，使其滲透過藥材，自上而下從滲漉器下部流出浸出液的一種浸出方法。當溶劑滲進藥粉、溶出成分比重加大而向下移動時，上層的溶液或稀浸液便置換其位置，造成良好的濃度差，使擴散能較好地進行，故浸出效果優(yōu)于浸漬法。但應控制流速，在滲渡過程中隨時自藥面上補充新溶劑，使藥材中有效成分充分浸出為止。或當滲滴液顏色極淺或滲涌液的體積相當于原藥材重的10倍時，便可認為基本上已提取完全。在大量生產(chǎn)中常將收集的稀浸出液作為另一批新原料的溶劑之用。③煎煮提取法(簡稱煎煮法)煎煮法是中國最早使用的傳統(tǒng)的浸出方法。所用容器一般為陶器、砂罐或銅制、搪瓷器皿，不宜用鐵鍋，以免藥液變色。直火加熱時最好時常攪拌，以免局部藥材受熱太高，容易焦糊。有蒸汽加熱設備的藥廠，多采用大反應鍋、大銅鍋、大木桶，或水泥砌的池子中通入蒸汽加熱。還可將數(shù)個煎煮器通過管道互相連接，進行連續(xù)煎浸。④加熱回流提取法應用有機溶劑加熱提取，需采用回流加熱裝置，以免溶劑揮發(fā)損失。小量操作時，可在圓底燒瓶上連接回流冷凝器。瓶內(nèi)裝藥材約為容量的20% 60%，溶劑浸過藥材表面約1 2cm。在水浴中加熱回流，一般保持沸騰3 6小時，放冷過濾，再在藥渣中加溶劑，作第二、三次加熱回流分別約半小時，或至基本提盡有效成分為止。此法提取效率較冷浸法高，大量生產(chǎn)中多采用連續(xù)提取法。⑤連續(xù)回流提取法應用揮發(fā)性有機溶劑提取被提取物原料有效成分，不論小型實驗或大型生產(chǎn)，均以連續(xù)提取法為好，而且需用溶劑量較少，提取成分也較完全。實驗室常用脂肪提取器或稱索氏提取器。連續(xù)提取法，一般需數(shù)小時才能提取完全。提取成分受熱時間較長，遇熱不穩(wěn)定易變化的成分不宜采用此法。2、分離和純化方法上述提取法所得到的被提取物原料提取液或提取物仍然是混合物，需進一步除去雜質(zhì)，分離并進行精制。(1)溶劑分離法一般是將上述總提取物，選用三、四種不同極性的溶劑，由低極性到高極性分步進行提取分離。水浸膏或乙醇浸膏常為膠狀物，難以均勻分散在低極性溶劑中，故不能提取完全，可拌入適量惰性填充劑，如硅藻土或纖維粉等，然后低溫或自然干燥，粉碎后，再以選用溶劑依次提取，使總提取物中各組成成分，依其在不同極性溶劑中溶解度的差異而得到分離。利用被提取物原料化學成分，在不同極性溶劑中的溶解度進行分離純化，是最常用的方法。(2)溶劑萃取法①萃取法溶劑提取萃取法又簡稱萃取法，是利用混合物中各成分在兩種互不相溶的溶劑中分配系數(shù)的不同而達到分離的方法。萃取時如果各成分在溶劑中分配系數(shù)相差越大，則分離效率越高；如果在水提取液中的有效成分是親脂性的物質(zhì)，一般多用親脂性有機溶劑，如苯、氯仿或乙醚進行萃取，如果有效成分是偏于親水性的物質(zhì)，在親脂性溶劑中難溶解，就需要改用弱親脂性的溶劑，例如乙酸乙酯、丁醇等。還可以在氯仿、乙醚中加入適量乙醇或甲醇以增大其親水性。提取黃酮類成分時，多用乙酸乙脂和水萃取。提取親水性強的皂苷則多選用正丁醇、異戊醇和水作萃取。不過，一般有機溶劑親水性越大，與水作萃取的效果就越不好，因為能使較多的親水性雜質(zhì)伴隨而出，對有效成分進一步精制影響很大。②逆流連續(xù)萃取法是一種連續(xù)的溶劑萃取法。其裝置可具有一根、數(shù)根或更多的萃取管。管內(nèi)用小瓷圈或小的不銹鋼絲圈填充，以增加溶劑萃取時的接觸面。如果一種被提取物原料的水浸液需要用比水輕的苯、乙酸乙酯等進行萃取，則需將水提濃縮液裝在萃取管內(nèi)，而苯、乙酸乙酯貯于高位容器內(nèi)。萃取是否完全，可取樣品用薄層層析、紙層析及顯色反應或沉淀反應進行檢查。③逆流分配法逆流分配法又稱逆流分溶法、逆流分布法或反流分布法。逆流分配法與溶劑逆流萃取法原理一致，但加樣量一定，并不斷在一定容量的溶劑中，經(jīng)多次移位萃取分配而達到混合物的分離。④液滴逆流分配法液滴逆流分配法又稱液滴逆流層析法。為近年來在逆流分配法基礎上改進的溶劑萃取法。對溶劑系統(tǒng)的選擇基本同逆流分配法，但要求能在短時間內(nèi)分離成，并可生成有效的液滴。由于移動相形成液滴，在細的分配萃取管中與固定相有效地接觸、摩擦不斷形成新的表面，促進溶質(zhì)在溶劑中的分配，故其分離效果往往比逆流分配法好。(3)大孔吸附樹脂法大孔吸附樹脂是20世紀60年代發(fā)展起來的一類有機高聚物吸附劑，具有良好的吸附性能，近十余年來逐漸被應用于被提取物原料化學成分的提取分離和中藥新藥的開發(fā)研制。大孔吸附樹脂為吸附和篩選原理相結合的分離材料。它的吸附性是由于范德華引力或生成氫鍵的結果。篩選原理是由于其本身多孔性結構所決定。由于吸附和篩選原理， 有機化合物根據(jù)吸附力的不同及分子量的大小，在大孔吸附樹脂上經(jīng)一定的溶劑洗脫而分開。這使得有機化合物尤其是水溶性化合物的提純得以大大簡化。大孔吸附樹脂的骨架由苯乙烯和二乙烯苯縮聚而生成，由于改性劑的加入，大孔吸附樹脂的極性發(fā)生改變，按照樹脂的表面性質(zhì)，吸附樹脂一般分為非極性、中極性和極性三類。非極性吸附樹脂是由偶極矩很小的單體聚合物制得的不帶任何功能基的吸附樹脂。典型的例子是苯乙烯-二乙烯苯體系的吸附樹脂，如D101、XAD-l、DiaiOnHP-10大孔吸附樹脂。中極性吸附樹脂指含酯基的吸附樹脂，如丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯與雙甲基丙烯酸酯等交聯(lián)的一類共聚物。它是在非極性大孔吸附樹脂的基礎上，加入丙烯酸甲酯或丙烯腈縮聚而成，如中國中國經(jīng)常使用的AB-8大孔吸附樹脂。極性吸附樹脂是指含酰胺基、腈基、酚羥基等含氮、氧、硫極性功能基的吸附樹脂。 此外，有時把含氮、氧、硫等配體基團的離子交換樹脂稱作強極性吸附樹脂，強極性吸附樹脂與離子交換樹脂的界限很難區(qū)別。極性大孔吸附樹脂可以由甲基丙烯酸甲酯、丙烯酰胺或亞砜類縮聚而成，如日本三菱化工的Diaion HP 2MG、美國Rohm-hass公司的XAD-10， XAD-9大孔吸附樹脂。與活性炭和其它吸附劑相比，大孔吸附樹脂具有很多的優(yōu)點，如對某種物質(zhì)的吸附選擇性較高；物理化學穩(wěn)定性和機械強度較好；品種規(guī)格較多，可根據(jù)需要改變樹脂物理或化學結構；吸附樹脂一般為球狀顆粒，流體阻力較小等等。因而被廣泛應用于化工、醫(yī)藥等領域，近年來關于大孔吸附樹脂在天然產(chǎn)物提取分離中的應用研究報道越來越多。大孔吸附樹脂對被提取物原料化學成分如生物堿、黃酮、皂苷、香豆素及其他一些苷類成分都有一定的吸附作用。對糖的吸附能力很差，對色素的吸附能力較強。(4)沉淀法是在被提取物原料提取液中加入某些試劑使產(chǎn)生沉淀，以獲得有效成分或除去雜質(zhì)的方法。如鉛鹽沉淀法鉛鹽沉淀法為分離某些被提取物原料成分的經(jīng)典方法之一。由于醋酸鉛及堿式醋酸鉛在水及醇溶液中，能與多種被提取物原料成分生成難溶的鉛鹽或絡鹽沉淀，故可利用這種性質(zhì)使有效成分與雜質(zhì)分離。然后將鉛鹽沉淀懸浮于新溶劑中，通以硫化氫氣體，使分解并轉為不溶性硫化鉛而沉淀。(5)鹽析法鹽析法是在被提取物原料的水提液中，加入無機鹽至一定濃度，或達到飽和狀態(tài)，可使某些成分在水中的溶解度降低沉淀析出，而與水溶性大的雜質(zhì)分離。常用作鹽析的無機鹽有氯化鈉、硫酸鈉、硫酸鎂、硫酸銨等。(6)透析法透析法是利用小分子物質(zhì)在溶液中可通過半透膜，而大分子物質(zhì)不能通過半透膜的性質(zhì)，達到分離的方法。反之也可將大分子的雜質(zhì)留在半透膜內(nèi)，而將小分子的物質(zhì)通過半透膜進入膜外溶液中，而加以分離精制。(7)結晶、重結晶和分步結晶法鑒定被提取物原料化學成分，研究其化學結構， 必須首先將被提取物原料成分制備成單體純品。在常溫下，物質(zhì)本身性質(zhì)是液體的化合物， 可分別用分餾法或層析法進行分離精制。一般地說，被提取物原料化學成分在常溫下多半是固體的物質(zhì)，都具有結晶體的通性，可以根據(jù)溶解度的不同用結晶法來達到分離精制的目的。3、常用干燥方法(1)真空干燥是基于這樣一基本原理水的飽和蒸氣壓與溫度緊密相關，在真空狀態(tài)下，水的沸點降低，即在真空下操作也就是在低溫下操作，可避免在高溫下營養(yǎng)成分如維生素等的破壞，同時提高了干燥速度。真空干燥在食品、制藥、化工等行業(yè)有廣泛的應用， 中國也開發(fā)和引進了各種真空干燥設備，其結構形式多種多樣。常用的形式主要有箱式真空干燥器、雙錐式真空干燥器、帶式真空干燥器等。這些傳統(tǒng)的真空干燥裝置主要采用熱風，蒸汽或電等加熱，利用熱傳導、對流或輻射原理將熱量從外部傳到物料內(nèi)部。真空干燥具有干燥溫度低，干燥室內(nèi)相對缺氧，可避免脂肪氧化，色素褐變等一系列優(yōu)點，適合于熱敏感性食品物料的干燥，此外設備成本、干燥費用也相對較低。(2)噴霧干燥是流化技術用于液態(tài)物料干燥的一種方法。因是瞬間干燥，特別適用于熱敏性物料，故所得產(chǎn)品質(zhì)量好，保持原來的色香味，且易溶解。利用噴霧干燥來制備微囊的研究正在進行，它是將心料混懸在衣料的溶液中，經(jīng)離心噴霧器將其噴入熱氣流中， 所得的產(chǎn)品是衣料包心料而成的微囊，這種微囊粉末可采用于直接壓片，也可制備膠囊劑、 糖漿劑或混懸劑。(3)冷凍干燥是將干燥液體物料冷凍成固體，在低溫減壓條件下利用冰的升華性能，使物料低溫脫水而達到干燥的一種方法。由于物料在高度真空及低溫條件下干燥，故對某些極不耐熱物品的干燥很適合。王大林報道了一種噴霧通氣凍干新技術，是利用冷的空氣或氮氣作為介質(zhì)，迅速流經(jīng)凍結物使水升華，噴霧凍干制得的產(chǎn)品微粒小、干燥快、時間短、均勻、流動性好，并具良好的速溶性。近年來，對膏狀物料和粘稠物料干燥的研究取得了較大進展，流態(tài)化技術、噴射技術、惰性載體技術，則是在此研究基礎上發(fā)展起來的。旋轉閃蒸干燥機、熱噴射氣流干燥機、惰性載體干燥機均適合熱敏性物料和膏狀物料的干燥。這些新的研究成果用于中藥制劑生產(chǎn)，將大大改善中藥加工的技術水平，提高生產(chǎn)效率。(4)遠紅外加熱干燥法是一項新的干燥技術，其干燥原理是將電能轉變?yōu)檫h紅外輻射，從而被藥材的分子吸收，產(chǎn)生共振，引起分子和原子的振動和轉動，導致物體變熱， 經(jīng)過熱擴散、蒸發(fā)和化學變化，最終達到干燥的目的。遠紅外干燥可節(jié)省電能20% 50%， 效果較好。(5)微波干燥法是一項20世紀60年代迅速發(fā)展起來的新技術，微波干燥實際上是通過感應加熱和介質(zhì)加熱，使被干燥物中的水分和脂肪不同程度地吸收微波能量，并把它轉變?yōu)闊崃繌亩_到干燥的目的。微波干燥可殺滅微生物和霉菌，并具有消毒作用。目前中國生產(chǎn)的微波加熱成套設備有915mhz和M50mhz兩個頻率。(三)血管性癡呆的研究概況癡呆(Dementia)是由于腦功能障礙而產(chǎn)生的獲得性和持續(xù)性智能障礙綜合癥， 智能障礙包括不同程度的記憶、語言、視空間功能、人格異常及認知能力降低。癡呆的主要類型是包括血管性癡呆癥(vascular dementia，或稱血管性老年癡呆癥，簡稱VD)、老年癡呆癥中的老年性癡呆癥(Alzheimer’ s Disease，或稱阿爾茲海默癥，或稱阿爾茨海默癥，簡稱AD)等。老年癡呆癥包括老年性癡呆癥、多重梗塞型癡呆癥(Multimfarct Dementia)、酒精性癡呆癥(Alcoholic Dementia)及正常腦壓水腦癥(Normal Pressure Hychocephalus)，其中老年性癡呆癥為老年癡呆癥中的主要類型。由于AD好發(fā)病于60歲以上老年人，所以習慣被稱為早老性癡呆癥。血管性癡呆癥是由腦血管性疾病引起的，主要由腦缺血缺氧導致。臨床上常見多梗死性癡呆、大面積腦梗死性癡呆、丘腦性癡呆及出血性腦血管并發(fā)癡呆及混合性癡呆等類型。臨床表現(xiàn)為抑郁、譫妄、失語等。病理改變?yōu)槎喟l(fā)性腔隙性病變或大面積梗死灶及動脈粥樣硬化病變(參見神經(jīng)病學，第四版，人民衛(wèi)生出版社)。臨床治療可使用膽堿能抑制劑，擴張血管、增加腦血流量，或者利用腦保護劑一抗氧化劑或自由基清除劑可以改善缺血、缺氧所引起的病理損傷減少腦細胞壞死和凋亡，保護腦組織。血管性癡呆者早期僅表現(xiàn)近記憶障礙，遠記憶相對保持較好；隨病程的增加，遠記憶能力逐漸喪失，智能衰退呈漸進性加重。而老年性癡呆早期就表現(xiàn)出遠近記憶障礙，智能衰退呈現(xiàn)出一種緩慢的進展過程(郭明英，韓國玲，等.老年性癡呆與血管性癡呆智能障礙的比較研究.青海醫(yī)學院學報· 2007,28(2) :125-127.)。血管性危險因素在血管性癡呆和阿爾茲海默癥的發(fā)病中均扮演著重要角色，所以有理論認為阿爾茲海默癥與血管性癡呆可能并非兩個獨立疾患。阿爾茲海默癥與血管性癡呆的共性研究已經(jīng)在危險因素、發(fā)病機制、病理生理、影像學改變等各個方面廣泛地開展。血管性癡呆癥是由多次腦卒中或長期慢性腦缺血所致的大腦皮層獲得性高級功能的進行性衰退性疾病。在歐美調(diào)查表明，55歲以上的老人中癡呆發(fā)生率約1. 1%，其中阿爾茲海默癥占首要位置(發(fā)生率約7. 7%o)，約為癡呆總人數(shù)的50% 60%，而VD居次(發(fā)生率約 1.5%。)，占10% 20%，而隨著年齡增長，VD所占比例顯著增加(①Ott A,Breteler MMB, Harskamp F, Stijnen T, Hofman A. Incidence and risk of dementia :the Rotterdam study.Am. J. Epidemiol. ,1998,147(6) :574-580.；② Di Carlo A, Baldereschi M, Amaducci L, et al. Incidence of dementia, Alzheimer ' s disease, and vascular dementia in Italy. The ILSA Study. J. Am. Geriatr. Soc. , 2002 ；50 :41-48.)。中國最近的研究也表明，65歲以上的老人中AD發(fā)生率約3.5%，VD發(fā)生率1. 1% (Zhang ZX, Zahner GE, Roman GC, et al. Dementia subtypes in China-prevalence in Beijing, Xian, Shanghai, and Chengdu. Arch Neurol. 2005 ；62 (3) :447-453.)。由于目前還缺乏適用于診斷VD的認知損害模式，對于AD和VD的診斷的鑒別以及“混合型”癡呆(AD+腦血管病，簡稱AD+CVD)的診斷仍然具有一定的挑戰(zhàn)性(①丁素菊，李云霞.血管性癡呆的臨床診斷和治療.國外醫(yī)學腦血管疾病分冊.2005，13(9) 676-680 ；② Erkinjuntti T Vascular dementia :challenge of clinical diagnosis. Int Psychogeriatr. 1997 ；9 :51-58.)，所以有人認為血管性癡呆可能是老年人中最為常見的癡呆類型，主要是因為很多“混合型”癡呆(AD+CVD)可能被診斷為AD (①RonuSn GC. Vascular dementia may be the most common form of dementia in the elderly. J Neurol Sci. 2002，203-204 :7-10 ；②丁素菊.血管性癡呆.中國老年學雜志.2003 ;23 (4) 200-202.)。VD 的發(fā)生率在男女無明顯差異(Anderson K, Launer LJ, Dewey ME，et al. Genderdifferences in the incidence of AD and vascular dementia :the EURODEM studies. Neurology. 1999 ；53 :1992-1997.)，其最顯著的危險因子是年齡[Hebert R.，Lindsay J.， Verreault R. , Rockwood K., Hill G. , Dubois MF. Vascular dementia incidence and risk factors in the Canadian study of health and aging. Stroke, 2000 ；31 (7) 1487-1493.]，根據(jù)流行病學調(diào)查，在大于60歲的人群中，年齡每增加5歲VD的發(fā)病率就增加1倍。引起VD的兩個主要原因是腦卒中和缺血性心臟病(ischemic heart disease，簡稱IHD)，而在老年人中這兩者都是常見病。僅就腦卒中而言，現(xiàn)在每年全球新增加卒中患者 1000 萬，其中中國就有 200 萬(① Feigin VL, Lawes CMM, Bennett DA, et al. Stroke epidemiology -.a review of population-based studies of incidence, prevalence, and case-fatality in the late 20th century. Lancet Neurol. , 2003, 2 (1) :43-53 ；②吳兆蘇，姚崇華，趙冬.中國人群腦卒中發(fā)病率、死亡率的流行病學研究.中華流行病學雜志， 2003 ；24(3) :236-239.),在老年人中發(fā)病率尤高，從而造成很多患者并發(fā)VD。中國全國性癡呆流行病學統(tǒng)計資料也顯示隨著人口的老齡化、飲食結構的改變，VD的發(fā)病呈遞增趨勢。隨著人口老化，心腦血管病的發(fā)病率逐年升高，并發(fā)VD患者也逐漸增多。VD不僅嚴重損害患者健康，給患者帶來長期痛苦，影響患者的生命質(zhì)量，也給社會和家庭帶來沉重的負擔，引起了世界各國的普遍關注，它是老年醫(yī)學領域中的一個重要課題。普遍認為年齡對VD的作用是通過多方面來影響的，例如腦的自身調(diào)節(jié)、細胞的新陳代謝、血腦屏障及自主功能方面的老化改變使腦血管易于受到損害，而腦損害的累計效應也是原因之一。癡呆的診斷必須符合三個條件①癡呆；②腦血管??；③以上二者密切相關。癡呆和卒中在時間上密切聯(lián)系，通常卒中后3個月內(nèi)發(fā)生癡呆。主要癥狀為①腦組織病理形態(tài)改變；②記憶力下降。關于VD的治療，目前尚無肯定的治療方法可以改變整個病程，由于腦梗死后壞死的腦細胞不可能逆轉，主要是對供血不足的腦細胞的治療以緩解發(fā)作期癥狀、預防再損害等。常采用積極改善腦細胞供氧、改善微循環(huán)、預防新血栓與再梗死的方法等。改善腦循環(huán)治療常用的有雙氫麥角堿類、鈣離子拮抗劑、煙酸類、其他擴血管藥物及抗血小板聚集藥物。膽堿酯酶抑制劑是近年發(fā)展較為迅速的癡呆治療藥物，如鹽酸多奈哌齊和重酒石酸卡巴拉汀。臨床上還經(jīng)常應用腦保護治療藥物如鈣離子拮抗劑(尼莫地平和西吡靈)；自由基清除劑(維生素E、維生素C以及銀杏葉制劑)等。但從上述藥物目前臨床的應用效果來看，療效一般，并且大部分都僅僅是對癥處理，并不能改善死亡率。目前一些中藥制劑如銀杏葉、燈盞花、刺五加等制劑大多存在活性成分不清、作用機制不明、質(zhì)量不穩(wěn)、毒副作用大等不足之處，難以滿足臨床需要。因此，目前世界各國對控制此病病程進展尚無有效方法和藥物，VD的預防、治療和預后的藥物研究和開發(fā)已成為各國非常重視的研究課題(①丁素菊.血管性癡呆.中國老年學雜志.2003 ；23 (4) =200-202 ；②陳舂雷，邱智輝，蘇世鑫，鄭忠誠，陳培芬，葉志平.血管性癡呆的治療進展.中國新醫(yī)學論壇.2007，7 (7) :59-62.)。因此，研究出一種有效的治療方法來阻止?jié)撛诘陌l(fā)病過程是很必要的，結合中國的傳統(tǒng)被提取物原料，從中發(fā)掘有效、低毒、價廉的治療血管性癡呆和老年性癡呆的藥物， 用于預防、診斷、檢測、保護和治療VD等方面的產(chǎn)品特別是藥物具有非常重要的意義，能夠產(chǎn)生顯著的社會效益和經(jīng)濟效益。(四)抗真菌藥物的研究概況近年來真菌感染有逐漸增加的趨勢，它包括淺部和深部真菌病，后者發(fā)病多系機體免疫功能受損，常病情嚴重，危及生命，需全身應用強效抗真菌藥物治療。該類藥物可分為外用和系統(tǒng)應用兩類，外用藥物僅用于淺部真菌感染。人類的真菌感染可累及表皮、皮下和全身；一般可分為淺部感染(即局限在角層、 鱗狀粘膜或角膜)和深部感染(皮下和全身)兩大類。它們的治療藥物也有所不同，而有部分藥物既可用于淺部感染，又可用于深部感染。淺部真菌感染包括皮膚真菌病，皮膚、指 (趾)甲、毛發(fā)的感染，如體癬、股癬、手足癬、花斑癬、甲真菌病、皮膚黏膜念珠菌病和真菌性角膜炎等。據(jù)統(tǒng)計淺部真菌病約占全部皮膚病的1/4，特別是足部真菌感染，約占皮膚科就診病人的46%，而其中甲真菌病就占了約16% ；對于這些感染，主要采用局部用藥治療， 由于其感染的特點，藥物治療效果往往不很滿意，在某些情況，還需口服用藥。局部使用環(huán)吡酮胺指甲涂劑涂在指甲表面是治療甲真菌病的較好方法。深部真菌感染包括皮下組織和全身系統(tǒng)感染，包括念珠菌病、隱球菌病、曲霉病和毛霉菌病等。近年來由于廣泛應用廣譜抗生素、皮質(zhì)激素、免疫抑制劑、放射治療、化學治療、器官移植、導管手術以及艾滋病的增多，使發(fā)生侵襲性真菌感染機會增加，而導致深部真菌感染日益增多，據(jù)不完全統(tǒng)計，近十多年來，深部真菌感染的發(fā)病率增高了 3 5倍。對于全身系統(tǒng)感染則需全身用藥，有時尚需聯(lián)合用藥。由于藥物的作用機制不同，特別需要注意它們的安全性和藥物相互作用問題。在治療應用方面，深部真菌感染主要選用兩性酶素B、伊曲康唑、酮康唑、氟康唑、 伏立康唑、泊沙康唑、卡泊芬凈和氟胞嘧啶，其他藥物則多用于淺部真菌感染，但多數(shù)具有較嚴重的毒副作用，如兩性霉素有腎臟毒性。在長期藥物應用的過程中病原菌也逐漸產(chǎn)生不同程度的耐藥性，迫切需要我們開發(fā)新型療效好且毒副作用更小的抗真菌藥物。(五)抗腫瘤藥物的研究概況惡性腫瘤嚴重危害人們的健康，據(jù)RST統(tǒng)計，在全世界五十多多億人口中平均每年死于惡性腫瘤者達690萬人，新發(fā)病例為870萬例，且數(shù)字還在逐年增加。因此，各國政府、研究機構及制藥公司長期以來一直對腫瘤研究和抗腫瘤藥物予以高度重視，在抗腫瘤藥物的研究上，目前已取得了重大進展。近年來，分子腫瘤學、分子藥理學的發(fā)展使腫瘤本質(zhì)正在逐步闡明；大規(guī)?？焖俸Y選、組合化學、基因工程等先進技術的發(fā)明和應用加速了藥物開發(fā)進程；抗腫瘤藥物的研究與開發(fā)已進入一個嶄新的時代。抗腫瘤藥物正從傳統(tǒng)的細胞毒性藥物，向針對機制的多環(huán)節(jié)作用的新型抗腫瘤藥物發(fā)展。因此，研究開發(fā)新型的抗腫瘤藥物成為迫切的需要。藥品銷售的數(shù)據(jù)表明，全球制藥企業(yè)50強在2007年的處方藥銷售額增長為2. 8%，而其中抗腫瘤類藥物增長最快，達 14%。2006年數(shù)據(jù)同樣表明，10類藥物中抗腫瘤藥物的銷售增長居首位，達20.5%。這反映了對抗腫瘤藥物的持續(xù)、快速增長的市場需求。中國在制定中長期科學發(fā)展規(guī)劃的基礎上，提出設立一批重大專項。“重大新藥創(chuàng)制”是從“十一五”到2020年間國家支持的重大項目之一。該項目將針對腫瘤、心血管病等多種嚴重危害人民的重大疾病，研制創(chuàng)新藥物。 很明顯，抗腫瘤新藥的研究與開發(fā)，既是防治嚴重危害人民疾病的需要，也是我國持續(xù)發(fā)展和建設創(chuàng)新型國家的重要任務。“重大新藥創(chuàng)制”專項的設立，將對我國抗腫瘤新藥研發(fā)的進程產(chǎn)生積極的影響。癌癥治療是醫(yī)學與生物學的重大難題。研制可根治腫瘤的藥物，仍然“任重道遠”。 與世界先進水平相比，中國在抗腫瘤新藥研究方面仍有不小差距?？鼓[瘤新藥的研究與開發(fā)是一項艱巨的任務，是一個長期、復雜的過程，需要科技人員長期專心致志地工作與積累。因此，需要為研究者提供穩(wěn)定的工作環(huán)境與條件；需要各方面專業(yè)人員和相關機構通力合作；需要有利于推動合作的政策保障措施和組織協(xié)調(diào)機制；需要有較大數(shù)量經(jīng)費包括臨床前研究與臨床研究的經(jīng)費的大力支持。當前，抗腫瘤新藥研發(fā)正面臨良好的機遇。生物醫(yī)藥科學的發(fā)展，為研制新型抗腫瘤藥物提供了重要的理論基礎和新的技術支撐。中國醫(yī)療衛(wèi)生事業(yè)的發(fā)展，對包括癌癥在內(nèi)的重大疾病治療藥物提出了更高的要求，中國市場和世界市場的巨大需求能給研發(fā)單位帶來可觀的經(jīng)濟效益。中國設立“重大新藥創(chuàng)制”重大專項，將促進中國新藥包括抗腫瘤新藥的研究與開發(fā)。經(jīng)文獻檢索等，到目前為止，尚未發(fā)現(xiàn)有活性天然產(chǎn)物B(p0lydatin，piceid)以及其組合物在直接用于預防、診斷、檢測、保護、治療和研究抗真菌、抗腫瘤、血管性癡呆和老年性癡呆及其直接相關疾病方面的報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所需要解決的技術問題是公開了一種中藥活性天然產(chǎn)物B抗真菌、抗腫瘤及抗血管性癡呆的新作用，即該提取物用于制備抗真菌產(chǎn)品、抗腫瘤產(chǎn)品及抗血管性癡呆產(chǎn)品，以克服現(xiàn)有技術存在的上述缺陷。也就是說，本發(fā)明通過細胞和動物實驗等研究和理論探索，意在明確一種活性天然產(chǎn)物B在抗真菌、抗腫瘤及抗血管性癡呆應用方面的活性，即本發(fā)明涉及一種活性天然產(chǎn)物B的新用途。本發(fā)明的另一個目的是提供含有上述活性天然產(chǎn)物B的藥物組合物作為制備抗真菌抗腫瘤產(chǎn)品及抗血管性癡呆產(chǎn)品的應用。在該組合物中，本發(fā)明的活性天然產(chǎn)物B占 10% 90% (重量百分比)，優(yōu)選占50% 90% (重量百分比)。(一)本發(fā)明所采用的定義本發(fā)明所述的抗真菌抗腫瘤產(chǎn)品是包括抗真菌產(chǎn)品和抗腫瘤產(chǎn)品；本發(fā)明所述的抗真菌產(chǎn)品是指直接用于預防、診斷、檢測、保護、治療和研究病原真菌及其直接相關疾病的產(chǎn)品中的一種或多種，所述的病原真菌是指白念球菌、新生隱球菌、紅色毛癬菌和煙曲霉菌。本發(fā)明所述的抗腫瘤產(chǎn)品是指直接用于預防、診斷、檢測、保護、治療和研究腫瘤及其直接相關疾病的產(chǎn)品中的一種或多種，所述的腫瘤是指肝癌、乳腺癌和肺癌。本發(fā)明所述的抗血管性癡呆產(chǎn)品是指直接用于預防、診斷、檢測、保護、治療和研究血管性癡呆及其直接相關疾病的產(chǎn)品中的一種或多種。本發(fā)明所述的抗真菌抗腫瘤產(chǎn)品、抗血管性癡呆產(chǎn)品均是包括醫(yī)藥和食品等領域產(chǎn)品中的一種，是包括藥物、試劑或食品等中的一種或多種，優(yōu)選藥物。本發(fā)明所述的活性天然產(chǎn)物B所使用的藥材原料是指海洋真菌或海洋真菌粗提物，優(yōu)選海洋真菌Massarina tunicata或海洋真菌Massarina tunicata粗提物。
活性天然產(chǎn)物B是預防、診斷、檢測、保護、治療和研究抗真菌、抗腫瘤、抗血管性癡呆的活性成分，其使用方式是包括單獨使用或與其他化學物質(zhì)聯(lián)合使用等中的一種，優(yōu)選單獨使用，均能夠用于制備抗真菌產(chǎn)品、抗腫瘤產(chǎn)品和抗血管性癡呆產(chǎn)品。供試樣品均是采取常規(guī)的制備方法獲得，所得到的活性天然產(chǎn)物B含量一般 <60%,但是通過純化，能夠得到純化后的活性天然產(chǎn)物B的純度能夠在95%以上，即本發(fā)明所定義的活性天然產(chǎn)物B。也就是說，采用活性天然產(chǎn)物B為原料，或者是直接采用含有活性天然產(chǎn)物B的海洋真菌為原料，或者直接采用含有活性天然產(chǎn)物B的海洋真菌粗提物為原料，都能夠直接或間接用于制備抗真菌抗腫瘤產(chǎn)品和抗血管性癡呆產(chǎn)品?；钚蕴烊划a(chǎn)物B優(yōu)選以基本純的形式使用即本發(fā)明所定義的活性天然產(chǎn)物B，如活性天然產(chǎn)物B的純度> 95%。(二)技術構思自主開發(fā)創(chuàng)新藥物是中國目前的一項緊迫任務，中國中醫(yī)藥學具有悠久的歷史， 在預防和治療疾病方面也積累了豐富的經(jīng)驗，因此從中藥中尋找有效的活性成分或發(fā)現(xiàn)其新的用途均是有效的快捷途徑，也是中國快捷創(chuàng)新藥物研制的優(yōu)勢之所在。陸生微生物發(fā)酵產(chǎn)物一直是制藥工業(yè)的重要資源之一，但近年來隨著陸地資源的不斷開發(fā)，尋找新的微生物或篩選新的活性代謝產(chǎn)物的難度越來越大，且抗藥性問題日益嚴重，使得新藥的開發(fā)面臨著嚴峻挑戰(zhàn)。海洋微生物是近年來的一個研究熱點。海洋約占地球表面積的71%，蘊藏著豐富的微生物資源.。越來越多的研究也表明，海洋微生物——尤其是那些跟海洋動物或海洋植物存在共生或寄生等關系的微生物——能產(chǎn)生結構獨特并具強烈生理活性的代謝產(chǎn)物。而且海洋微生物繁殖快，可利用現(xiàn)代微生物技術，大規(guī)模工業(yè)發(fā)酵，有廣闊的應用前景?？茖W家們預計，開發(fā)新的海洋藥物將寄希望于海洋微生物這一新的領域。從海洋微生物次級代謝產(chǎn)物中尋找新的抗腫瘤活性代謝產(chǎn)物，為開發(fā)新型抗腫瘤藥物提供先導化合物，通過對海洋真菌Massarina sp.，strain CNT-016的深入研究，目前己發(fā)現(xiàn)螺環(huán)內(nèi)酉旨化合物 6-印i-5' -hydroxy-mycosporulone (參見Μ· A. Abdel—Wahab et al. /Phytochemistry 68(2007) 1212-1218)，但尚未進行生物活性研究，本發(fā)明研究涉及到的化合物與其有類似母核，并進行了抗真菌抗腫瘤活性研究，開展了細胞和動物實驗研究。發(fā)明人通過對海洋真菌提取物進行系統(tǒng)的化學成分研究，篩選并證明該海洋真菌提取物活性天然產(chǎn)物B的活性和用途，發(fā)明人從而推測活性天然產(chǎn)物B在預防、診斷、檢測、 保護、治療和研究抗真菌、抗腫瘤、抗血管性癡呆等方面活性的臨床藥效，也應主要是通過活性部位該海洋真菌提取物特別是活性天然產(chǎn)物B的藥效來發(fā)揮的，研究結果也證明和證實了該海洋真菌提取物特別是活性天然產(chǎn)物B具有顯著的藥理活性。發(fā)明人經(jīng)過研究的最新發(fā)現(xiàn)是活性天然產(chǎn)物B能夠抵抗β -淀粉樣蛋白致腦細胞損傷的作用，能夠抵抗過氧化氫致腦細胞損傷作用，提高東茛菪堿致癡呆小鼠模型的學習記憶功能，提高A β致癡呆小鼠模型學習記憶能力，抑制腦缺血再灌注小鼠模型腦組織脂質(zhì)過氧化，增強腦缺血再灌注小鼠模型腦組織超氧化物歧化酶活性和減低腦缺血再灌注小鼠模型腦片細胞內(nèi)鈣離子濃度。癡呆特別是血管性癡呆和老年性癡呆嚴重影響中國人口的健康和生存質(zhì)量，研制預防、診斷、檢測、保護、治療和研究血管性癡呆和老年性癡呆等方面的產(chǎn)品，特別是藥物、診斷試劑和保健品等，具有顯著的社會效益、經(jīng)濟效益。(三)活性天然產(chǎn)物B的結構與性質(zhì)本發(fā)明的目的在于提供了一種具有潛在藥用價值的新化合物，闡明了該化合物的結構，活性天然產(chǎn)物B結構式如下
權利要求
1.活性天然產(chǎn)物B在制備抗血管性癡呆產(chǎn)品中的應用。
2.根據(jù)權利要求1所述的活性天然產(chǎn)物B的組合物在制備抗血管性癡呆產(chǎn)品中的應用。
3.根據(jù)權利要求1所述的活性天然產(chǎn)物B的藥材原料在制備抗血管性癡呆產(chǎn)品中的應用。
4.根據(jù)權利要求3所述的活性天然產(chǎn)物B的應用，其特征在于，所述的活性天然產(chǎn)物B 的藥材原料是海洋真菌或海洋真菌粗提物中的一種。
5.根據(jù)權利要求4所述的活性天然產(chǎn)物B的應用，其特征在于，所述的活性天然產(chǎn)物B 的藥材原料是海洋真菌Massarina tunicata或海洋真菌Massarina tunicata粗提物中的一種。
6.根據(jù)權利要求1所述的活性天然產(chǎn)物B的藥材原料的組合物在制備抗血管性癡呆產(chǎn)品中的應用。
7.根據(jù)權利要求6所述的活性天然產(chǎn)物B的應用，其特征在于，所述的活性天然產(chǎn)物B 的藥材原料是海洋真菌或海洋真菌粗提物中的一種。
8.根據(jù)權利要求7所述的活性天然產(chǎn)物B的應用，其特征在于，所述的活性天然產(chǎn)物B 的藥材原料是海洋真菌Massarina tunicata或海洋真菌Massarina tunicata粗提物中的一種。
9.根據(jù)權利要求1 8任一項所述的活性天然產(chǎn)物B的應用，其特征在于，所述的抗血管性癡呆產(chǎn)品是指直接用于預防、診斷、檢測、保護、治療和研究血管性癡呆及其直接相關疾病的產(chǎn)品中的一種或多種。
10.根據(jù)權利要求1 8任一項所述的活性天然產(chǎn)物B的應用，其特征在于，所述的抗血管性癡呆產(chǎn)品是包括藥物、試劑或食品中的一種。
11.根據(jù)權利要求10所述的活性天然產(chǎn)物B的應用，其特征在于，所述的抗血管性癡呆產(chǎn)品是藥物。
12.根據(jù)權利要求1 8任一項所述的活性天然產(chǎn)物B的應用，其特征在于，該活性天然產(chǎn)物B的結構式如下
13.根據(jù)權利要求12所述的活性天然產(chǎn)物B的應用，其特征在于，所述的活性天然產(chǎn)物 B的純度 95%。
14.根據(jù)權利要求12所述的活性天然產(chǎn)物B的應用，其特征在于，所述的活性天然產(chǎn)物 B的使用方式是包括單獨使用或與其他化學物質(zhì)聯(lián)合使用中的一種。
全文摘要
本發(fā)明涉及海洋真菌提取物——活性天然產(chǎn)物B的用途。經(jīng)體外研究試驗顯示，活性天然產(chǎn)物B對白念球菌、新生隱球菌、紅色毛癬菌和煙曲霉菌等常見臨床病原真菌有一定抑制作用，能不同程度抑制肝癌、乳腺癌、肺癌等腫瘤細胞株的生長，并能對大鼠多發(fā)性梗塞性腦缺血損傷等造成的病理損傷有較強的保護作用，能夠顯著改善癡呆大鼠的學習記憶功能，可用于制備抗血管性癡呆產(chǎn)品。本發(fā)明為臨床抗真菌、抗腫瘤、抗血管性癡呆癥及其直接相關疾病治療提供了一種新的藥物來源，對開發(fā)利用我國的藥用資源具有重要價值。
文檔編號A61K31/365GK102293767SQ201110193628
公開日2011年12月28日 申請日期2009年8月31日 優(yōu)先權日2009年8月31日
發(fā)明者馮建平, 徐麗莉, 游飛, 秦路平 申請人:杭州雙馬生物工程有限公司