專利名稱：一種從靈芝中分離出的新化合物及其制備方法和醫(yī)藥用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從靈芝中分離出的具有抗腫瘤作用并可抑制腫瘤細胞的多重耐藥性(MDR)的新化合物。本發(fā)明還涉及該化合物的制備方法。本發(fā)明還涉及以該化合物在制備治療腫瘤藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
腫瘤的多重耐藥性(Muti-drug Resistance, MDR)被臨床上認為是引起化療失敗的最常見的原因，對腫瘤進行的時間較長的化療常常導(dǎo)致癌細胞的選擇性存活，這些存活的癌細胞對于結(jié)構(gòu)上和功能上不相關(guān)的廣譜的化療藥物具有交叉抗性?？赡軐?dǎo)致MDR的幾種機理包括細胞由于適應(yīng)化療而未能進入程序性死亡(細胞凋亡)、或藥物未能到達或作用于細胞內(nèi)靶位。抗癌治療，例如藥物治療、生物治療或放射治療都必須擊中腫瘤的細胞內(nèi)靶位，并且隨后引起某種形式的細胞改變或破壞。與直接殺死腫瘤細胞不同，大多數(shù)情況下抗癌藥物引發(fā)細胞程序性死亡，或細胞凋亡的放生。因此，對多種藥物的抗性可能是由于細胞的防御機制引起，該細胞防御機制廣泛地限制藥物進入細胞靶位，或阻止該細胞進入細胞凋亡并被殺傷。多種機制參與腫瘤細胞耐藥性的形成，其中ATP結(jié)合盒膜通道轉(zhuǎn)運蛋白是產(chǎn)生MDR的主要原因，而ABCBl、ABCCl和ABCG2與腫瘤MDR關(guān)系最為密切。因此尋找高效低毒且對化療藥物藥代動力學(xué)無影響的MDR逆轉(zhuǎn)劑是有效克服MDR的方法之一。在治療癌癥方面植物藥具有較長的使用歷史。已將中藥用于改善癌癥病人的普通狀況，但將中藥用于MDR癌細胞的具體根除上還未廣泛應(yīng)用。自然界提供了許多植物來源的抗癌藥物，例如長春花堿、紫杉醇、雷公藤內(nèi)酯醇等。這些從植物中分離的有效成分表現(xiàn)出良好的抗腫瘤效應(yīng)，且相對于人工合成的化學(xué)藥物來說，其毒性較低的優(yōu)點使這些植物來源的抗癌藥物在腫瘤治療中得到了大量的應(yīng)用。中藥靈芝是多孔菌科靈芝屬真菌植物赤芝Wanoderma lucidum(Leys, ex Fr.) Karst]或紫芝[Ganoderma japonicum(Fr.) Lloyd]的干燥子實體。性溫、味甘，具有補中益氣、滋補強壯、扶正固本的功效，臨床上常用于腫瘤的治療或輔助治療。對于靈芝抗腫瘤有效成分的研究，主要針對靈芝多糖和靈芝三萜類成分?？鼓[瘤研究結(jié)果表明，靈芝三萜對多種腫瘤細胞的生長和轉(zhuǎn)移都有抑制作用。對靈芝三萜類成分的研究在20世紀八十年代達到了高潮，目前已經(jīng)有130多種靈芝三萜類成分被分離鑒定，我們在針對靈芝抗腫瘤作用的有效成分研究中，分離鑒定了一個新的三萜類化合物，命名為赤芝酸A乙酯(Ethyl Iucidenates Α)。藥理學(xué)實驗表明，該化合物具有抗腫瘤活性，并且可抑制腫瘤細胞的MDR。 針對該化合物經(jīng)過試驗，確定了合理的制備方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種從靈芝中分離出的具有抗腫瘤作用的新化合物(赤芝酸 A乙酯)。
本發(fā)明的另一個目的在于提供制備該化合物方法。本發(fā)明的再一目的在于提供該化合物在制備治療腫瘤藥物中的應(yīng)用。根據(jù)本發(fā)明的一方面，提供具有下列化學(xué)結(jié)構(gòu)式(I )的化合物
權(quán)利要求
1. 一種結(jié)構(gòu)式(I )的化合物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下
2.權(quán)利要求1的所述的化合物的制備方法，包括以下步驟A)將靈芝用醇或醇溶液提取一次或2次以上，過濾，收集濾液，再減壓濃縮干燥，獲得醇提取物；B)將醇提取物加水，以石油醚萃取脫脂后，再以乙酸乙酯萃取，獲得的乙酸乙酯萃取液再以飽和NaHCOyK溶液萃取，取乙酸乙酯相蒸干，獲得粗品；C)將獲得的粗品進行色譜分離純化，得到純的式(I)化合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物的制備方法，其特征在于步驟C)的粗品進行色譜分離純化的步驟包括如下1)將粗品在硅膠上進行柱層析，用氯仿-甲醇梯度洗脫，獲得氯仿-甲醇的體積比為99 1的洗脫物；2)取氯仿-甲醇的體積比為99 1的洗脫物再進行硅膠柱層析，用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得到石油醚-乙酸乙酯的體積比為4 1的洗脫部位；3)取此部位經(jīng)制備型高效液相色譜分離，甲醇-水梯度洗脫，從甲醇-水的體積比為 75 25的洗脫部位得到純的化合物(1)。
4.權(quán)利要求1所述的結(jié)構(gòu)式(I)的化合物或其衍生物在制備治療腫瘤藥物中的應(yīng)用。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于所述的腫瘤為人慢性粒細胞白血病細胞株 K562、人髓系白血病細胞株HL60、人Burkitt淋巴瘤細胞株CA46、人結(jié)腸癌細胞株SW1116、 人結(jié)腸癌細胞株SW480、人肝癌細胞株SMMC7221、人肝癌細胞株!fepG2。
6.權(quán)利要求1所述的結(jié)構(gòu)式(I)的化合物或其衍生物在制備治療抑制腫瘤細胞MDR 的藥物中的作用。
7.含有治療有效量的權(quán)利要求1所述的結(jié)構(gòu)式(I)的化合物或其衍生物的藥物組合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的的藥物組合物，其中結(jié)構(gòu)式(I)的化合物和/或其衍生物的含量大于50%以上，尤其90%以上。
全文摘要
一種從靈芝中分離出的新化合物及其制備方法和醫(yī)藥用途。本發(fā)明公開了一種下式結(jié)構(gòu)的化合物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下其制備方法為將靈芝用醇或醇溶液提取一次或2次以上，過濾，收集濾液，再減壓濃縮干燥，獲得醇提取物；將醇提取物加水，以石油醚萃取脫脂后，再以乙酸乙酯萃取，獲得的乙酸乙酯萃取液再以飽和NaHCO3水溶液萃取，取乙酸乙酯相蒸干，獲得粗品；將獲得的粗品進行色譜分離純化，得到上述化合物。本發(fā)明所述的化合物能作為治療腫瘤的藥物。
文檔編號A61K31/575GK102311475SQ201110200649
公開日2012年1月11日 申請日期2011年7月18日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月18日
發(fā)明者張志強, 李鵬, 許建華 申請人:福建醫(yī)科大學(xué)