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一種鮸魚(yú)α類(lèi)趨化因子基因CXCL10、檢測(cè)方法和應(yīng)用的制作方法

發(fā)布時(shí)間:2025-05-01

專(zhuān)利名稱(chēng):一種鮸魚(yú)α類(lèi)趨化因子基因CXCL10、檢測(cè)方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及魚(yú)類(lèi)免疫器官中表達(dá)的基因序列,更具體涉及一種從鯢魚(yú)脾臟和腎臟 SMART cDNA文庫(kù)中篩選出的一個(gè)新α類(lèi)趨化因子基因CXCLlO的核苷酸序列、氨基酸序列及其時(shí)空表達(dá)圖譜。
背景技術(shù)
動(dòng)物免疫包括先天性免疫和獲得性免疫兩種。先天性免疫是指生物體所具有的對(duì)病原體和有害異物的基本天生抵抗性和防御性。先天免疫對(duì)絕大多數(shù)的病原體和有害異物具有快速、有力和非特異性作用的特點(diǎn),尤其是在應(yīng)對(duì)一些毒力發(fā)揮快,極易造成疫病暴發(fā)的病原體入侵中,能否對(duì)入侵病原體進(jìn)行有效的先天免疫往往是宿主動(dòng)物存活與否的關(guān)鍵。先天免疫包括從體表到體內(nèi)細(xì)胞及分子等不同層次的防御體系。體表屏障較易被病原體突破,且一旦突破后則經(jīng)常引起組織損傷,為其他潛在的病原體入侵提供有利途徑,此時(shí)在細(xì)胞及分子層次上以炎癥反應(yīng)為主的一系列復(fù)雜免疫反應(yīng)對(duì)殺滅入侵病原體具至關(guān)重要的作用。趨化因子大多是能結(jié)合肝素的多肽,主要由白細(xì)胞分泌,通過(guò)受體介導(dǎo)引起粒細(xì)胞、單核細(xì)胞及淋巴細(xì)胞的定向遷移和活化,對(duì)淋巴細(xì)胞再循環(huán),炎癥反應(yīng)以及抗腫瘤等方面具有重要作用。依照保守的半胱氨酸殘基,可分為CXC ( α ),CC ( β ),C ( γ )和CX3C (S)四類(lèi)。α類(lèi)趨化因子是最早鑒定的具有趨化嗜中性粒細(xì)胞的趨化因子,同時(shí)其也具有趨化單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的功能。α類(lèi)趨化因子專(zhuān)門(mén)吸引能表達(dá)CXCRl和CXCR2的嗜中性粒細(xì)胞。它們能在很廣泛的細(xì)胞中對(duì)許多刺激物作出反應(yīng),特別是對(duì)像白細(xì)胞介素I和腫瘤壞死因子這樣的前炎癥細(xì)胞因子。主要的作用是促進(jìn)嗜中性粒細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的黏附以及隨后的相關(guān)基質(zhì)蛋白和細(xì)胞表面物質(zhì)沿著趨化因子的濃度梯度向炎癥灶的定向移動(dòng)并清除入侵病原體和有害異物。因此,對(duì)趨化因子基因超家族成員的克隆鑒定及其蛋白產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)和功能研究無(wú)疑能為魚(yú)類(lèi)先天免疫分子機(jī)制解析及提高魚(yú)體抗病力提供堅(jiān)實(shí)的技術(shù)支撐。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在提供一種新的鯢魚(yú)α類(lèi)趨化因子基因序列及對(duì)應(yīng)氨基酸序列、檢測(cè)方法和在制備鯢魚(yú)抵抗病原微生物入侵產(chǎn)品中的應(yīng)用。為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的發(fā)明目的,發(fā)明人提供如下技術(shù)方案
一種鯢魚(yú)α類(lèi)趨化因子基因CXCL10,具有如SEQ ID No. 1所示的核苷酸序列。一種鯢魚(yú)α類(lèi)趨化因子基因CXCL10,它編碼的蛋白質(zhì)具有如SEQ ID No. 2所示的氨基酸序列。本發(fā)明所述的基因CXCLlO是從鯢魚(yú)脾臟、腎臟的SMART cDNA質(zhì)粒文庫(kù)中篩選到的一個(gè)基因,其cDNA序列和編碼的蛋白質(zhì)序列如下。該基因cDNA全長(zhǎng)1157bp,自74bp 到442bp區(qū)段為其開(kāi)放閱讀框,編碼122個(gè)氨基酸,5’端非翻譯區(qū)長(zhǎng)73bp,3’端非翻譯區(qū)長(zhǎng)7Mbp,有1個(gè)mRNA半衰期信號(hào),多聚腺苷酸加尾信號(hào)(AATAAA)及多聚腺苷酸尾巴。在 Genbmk中進(jìn)行同源性分析確定其為趨化因子基因超家族成員。CXCLlO基因的cDNA序列如下 ggggactacagatagtccagactgaagaaagactgagtgcactgtgatccagaacccgtctacagcaacaac
tATGAATTCAGCTGCTGTTGCCTTTCTCGTCTGCCTGCTTGTCTTCTATACACAAGGGCAACCAACCAACAGATCTA TTAAGTGTAAGTGTTTAAACGGTTATGTGGGCAAAATCAAACCACAAGACATCAAGGCAGGGCCTGTCACACATGAG CCAAGTATCTTCTGTCCACGTACAGAGATTATTATTACAACAACAGAAAATAGGGAGAAATGTGTGAATCCACGCTC ACCACTCGGAAAACTCATCCTGAAAAACAAAAACAAGTACCAGAAAAATGCAACTGTGAATACGACAGCAGCTTCAA GCTCAACGGACACGACAGCAGCTTCAAGCTCAACAAGACACCACACAACATCCAGGCTGTAGgactctgccactgca ctgaagaggatggagctgaaacactttttattgttgttgttcaccatcactgccttttatcaagtaaatacaataag tgggtagaagtgatcaaagtgtctgtttgtcctcttatatttgttgtggagaaattgctgaagtcagtggtcaatgg tgaggtcaggaaggaagaaagtgttcaggagcctctgatgtcttatgctgtatta^tttattgacgcttggccaagaa gaattagagacactctcaaagtacatcagaagtgcctgagtcggtctcacattctgccaaactcatcctggtggata gactttaaacccctacagataacaccacaaatactatacgcccagaattagccaaagagaatgtttttacccatgca ggtgttattctcagcatattctagtctggagacacagatgtctgtttacacagattggaacgtcaacggccagctat ctattatgtctatgaaggcagcaatagtctcttcgaccctggccaccacactgttgagatagactggcacctactgt tcccaatcaaagccaaacaattaatactgccgaggaccttaaggcccacacgtgaccttgtgtaagctaaggataaa aaattccataacaacattgtcttcatgtgtacataccaaataaatcatctgtatatactttttaagcaaaaaaaaaaCXCLlO基因編碼的蛋白質(zhì)序列如下 MNSAAVAFLVCLLVFYTQGQPTNRSIKCKCLNGYVGKIKPQDIKAGPVTHEPSIFCPRTEIIITTTENREKCV
NPRSPLGKLILKNKNKYQKNATVNTTAASSSTDTTAASSSTRHHTTSRL。本發(fā)明還提供了一種鯢魚(yú)α類(lèi)趨化因子基因CXCLlO的檢測(cè)方法,其中,所述的檢測(cè)方法至少包括使用一對(duì)熒光定量PCR引物,所述的一對(duì)熒光定量PCR引物由上游引物和下游引物組成,其中,所述的上游引物(CXCL10-RT-F)具有如SEQ ID NO. 3所示的核苷酸序列;下游引物(CXCL10-RT-R)具有如SEQ ID NO. 4所示的核苷酸序列。本發(fā)明還提供了上述的一種鯢魚(yú)α類(lèi)趨化因子基因CXCLlO在制備鯢魚(yú)抵抗病原微生物入侵產(chǎn)品中的應(yīng)用。作為優(yōu)選,根據(jù)本發(fā)明所述的一種鯢魚(yú)α類(lèi)趨化因子基因CXCLlO在制備鯢魚(yú)抵抗病原微生物入侵產(chǎn)品中的應(yīng)用,其中,所述的病原微生物包括鰻弧菌。發(fā)明人運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)了 CXCLlO在鯢魚(yú)的鰾、眼球、鰭條、鰓、心臟、小腸、腎臟、肝臟、肌肉、脾臟中的轉(zhuǎn)錄本水平,結(jié)果表明該基因在所檢測(cè)的十個(gè)組織中均有mRNA轉(zhuǎn)錄本存在,其中在小腸中的豐度最高,其次在眼球中,而在其他組織中則只檢測(cè)到較少量的mRNA轉(zhuǎn)錄本存在。另外還檢測(cè)到經(jīng)鰻弧菌刺激后的脾臟和腎臟中的CXCLlO 基因表達(dá)量呈上升趨勢(shì),明顯較正常水平高,這提示該基因在鯢魚(yú)抵抗病原微生物入侵中具有重要功能。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)
本發(fā)明的基因的獲得不僅為研究魚(yú)類(lèi)趨化因子CXCLlO分子在先天免疫反應(yīng)中的作用機(jī)理奠定基礎(chǔ),而且通過(guò)基因序列可以獲得具有生物活性的蛋白產(chǎn)物,為進(jìn)一步研究CXCLlO的免疫學(xué)功能提供理論基礎(chǔ)。此外,本發(fā)明的基因還可以用于抗病相關(guān)性研究。


圖1為熒光定量檢測(cè)基因CXCLlO在鯢魚(yú)組織中的表達(dá)。圖2-1、2_2和2-3是鯢魚(yú)經(jīng)鰻弧菌感染后肝臟、脾臟和腎臟組織中的CXCLlO基因表達(dá)的時(shí)空?qǐng)D譜,其中圖2-1代表肝臟;圖2-2代表脾臟;圖2-3代表腎臟。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例和說(shuō)明書(shū)附圖,更具體地說(shuō)明本發(fā)明的內(nèi)容。應(yīng)當(dāng)理解,本發(fā)明的實(shí)施并不局限于下面的實(shí)施例,對(duì)本發(fā)明所做的任何形式上的變通和/或改變都將落入本發(fā)明保護(hù)范圍。在本發(fā)明中,若非特指,所有的份、百分比均為重量單位,所有的設(shè)備和原料等均可從市場(chǎng)購(gòu)得或是本行業(yè)常用的。若無(wú)特別指明,實(shí)施例采用的方法為本領(lǐng)域通用技術(shù)。主要材料、試劑和儀器設(shè)備手術(shù)刀,眼科剪,鑷子,解剖盤(pán),充氧泵,水箱,1.5ml 離心管,微量移液器、微量移液器槍頭,一次性培養(yǎng)皿,陶瓷研缽。脫氧核糖核苷酸dNTP, 熱聚合 Taq 酶,Trnzol-A+ 總 RNA 提取試劑盒,RealMasterMix(SYBRGreen)試劑,Quant cDNA第一鏈合成試劑盒以及DH5a感受態(tài)細(xì)胞,SMART cDNA Library Construction Kit,小型離心機(jī)(Qspin ,BAYGENE),渦旋振蕩器(QL-866型,QILINEBEIER),核酸蛋白儀 (SmartSpace Plus, Bio-feid),超凈工作臺(tái)(SW — CJ一IG型,名牌之星),恒溫培養(yǎng)箱(型號(hào)或生產(chǎn)商),_80°超低溫冰箱(Thermo scientific),熒光定量PCR系統(tǒng)(ABI 7300型)pH計(jì) (Mettler Toledo 320PH Meter)、高壓蒸氣滅菌鍋(SANYO)、高速冷凍離心機(jī)(Centrifuge 5417R, eppendorf)、電泳儀(DYY-6C型,北京六一)、水浴鍋(上海精宏)、凝膠成像系統(tǒng) (Bio-Rad GD2000)、PCR 儀(ABI Veriti 96well Thermal Cycler)、自動(dòng)測(cè)序儀(ABI 3730 型)。實(shí)驗(yàn)樣本鯢魚(yú)采集于浙江省海洋水產(chǎn)研究所。本發(fā)明實(shí)施例所用的常規(guī)藥品氯仿(分析純),異丙醇(分析純),氯霉素,氯化鈉(分析純)購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán),異丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG),5-溴-4-氯-3-吲哚-β -D-半乳糖苷(X-gal),胰蛋白胨,酵母提取物,瓊脂糖,溴化乙錠,焦碳酸二乙酯 (DEPC)等購(gòu)自Takara公司,液氮為浙江省舟山億洋氣體有限公司產(chǎn)品,脫氧核糖核苷酸 dNTP,熱聚合 Taq 酶,Trnzol-A+ 總 RNA提取試劑盒,RealMasterMix (SYBRGreen)試劑,Quant cDNA第一鏈合成試劑盒以及DH5a感受態(tài)細(xì)胞購(gòu)自TIANGEN公司,SMART cDNA Library Construction Kit購(gòu)自Clontech公司,質(zhì)粒文庫(kù)測(cè)序由華大基因公司完成,引物由南京金斯瑞生物科技有限公司合成;
本發(fā)明實(shí)施例所用主要儀器包括小型離心機(jī)(Qspin ,BAYGENE),渦旋振蕩器 (QL-866 型,QILINEBEIER),核酸蛋白儀(SmartSpace Plus, Bio-Rad),超凈工作臺(tái) (SW—CJ一IG型,名牌之星),恒溫培養(yǎng)箱(型號(hào)或生產(chǎn)商),-80°超低溫冰箱(Thermo scientific),熒光定量 PCR 系統(tǒng)(ABI 7300 型)pH 計(jì)(Mettler Toledo 320PH Meter)、高壓蒸氣滅菌鍋(SANYO)、高速冷凍離心機(jī)(Centrifuge 5417R,印pendorf)、電泳儀(DYY-6C 型,北京六一)、水浴鍋(上海精宏)、凝膠成像系統(tǒng)(Bio-Rad⑶2000)、PCR儀(ABI Veriti96well Thermal Cycler)、自動(dòng)測(cè)序儀(ABI 3730 型)。實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法,是按照常規(guī)條件,例如Sambrook等作者的分子克隆實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)(New York Co Id Spring Harbor Laboratory Press,1989)中所述的條件,或按照制造廠商說(shuō)明書(shū)建議的條件。實(shí)施例1
1.利用Trnzol-A+總RNA提取試劑盒(TIANGEN)提取鯢魚(yú)脾臟、腎臟總RNA 取健康的鯢魚(yú)(體重約750g)在充氧水箱養(yǎng)殖14日后,腹腔注射Iml的鰻弧菌 (1. 2X108 cfu/ml)。刺激24h后,解剖魚(yú)體取出脾臟和腎臟,液氮速凍后放入_80°C超低溫冰箱備用。分別取備用脾臟和腎臟組織約IOOmg用液氮研磨后加入Iml的Trnzol-A+總 RNA提取試劑(TIANGEN)勻漿,按照試劑盒說(shuō)明提取總RNA。將兩個(gè)組織所得的總RNA合并于一個(gè)1. 5ml的離心管中,取2μ 1分別用核酸蛋白儀和電泳檢測(cè)總RNA濃度和質(zhì)量。2. SMART cDNA 文庫(kù)構(gòu)建
SMART cDNA 的合成步驟詳見(jiàn) SMART cDNA Library Construction Kit 試劑盒操作手冊(cè)。取鯢魚(yú)脾腎組織mRNA lug,按試劑盒用戶(hù)手冊(cè)所提供的文庫(kù)構(gòu)建方法合成第一鏈 cDNA 加入3,-CDS引物和SMART II寡核苷酸各1 μ 1,72°C孵育^iiin后,冰上急冷2min, 然后在終體積為10 μ 1的反應(yīng)體系中,加入5Χ第一鏈反應(yīng)緩沖液(250mmol/L Tris-Hcl, PH8.3; 375mmol/L Kcl ; 30mmol/L MgC12)2μ 1,DTT (20mmol/L)1 μ 1,dNTP (lOmmol/L) 1 μ 1和Powerscript逆轉(zhuǎn)錄酶1 μ 1,42°C保溫Ih合成第一鏈cDNA。取2 μ 1第一鏈cDNA 加入 dNTP 2 μ 1, SMART cDNA Library Construction Kit 試劑盒中對(duì)應(yīng)的 PCR 引物 4 μ 1, 禾口 2μ1 50 X Advantage 2 cDNA Polymerase Mix 于 100 μ 1 的反應(yīng)體系中進(jìn)行如下 PCR 循環(huán)95°C預(yù)變性Imin后,以95°C 5s, 65°C 5s, 68°C 6min反應(yīng)沈個(gè)循環(huán)。反應(yīng)結(jié)束后,取 5μ 1電泳檢測(cè)。取50μ 1上述雙鏈cDNA,加入蛋白酶K(20ug/y υ2μ 1,45°C溫育20min, 滅活DNA聚合酶,用100 μ 1等體積苯酚/氯仿/異戊醇(1 1 1 ),氯仿/異戊醇(1:1)各抽提1次,上清夜經(jīng)醋酸鈉,糖原,酒精共沉淀后,80%的酒精漂洗,風(fēng)干后溶解于79 μ 1滅菌雙蒸水中,加入SfiI酶(20υ/μ 1)10μ 1,IOXsfiI緩沖液10 μ 1及1μ 1100XBSA,總體積 100 μ 1,50°C酶切池。酶切產(chǎn)物用CHROMA SPIN-400柱進(jìn)行分級(jí)分離,收集1_16管,每管1 滴。分別取3 μ 1于1. 1%的瓊脂糖凝膠上150V電泳lOmin,收集含cDNA前3管,混合后加入醋酸鈉,糖原和酒精共沉淀,沉淀的cDNA用滅菌雙蒸水溶解。合成的SMART cDNA連接入pDNR-LIB載體中,并轉(zhuǎn)化入DH5 α感受態(tài)細(xì)胞中。涂平板(內(nèi)含氯霉素、異丙基硫代- β -D-半乳糖苷(IPTG)及5-溴-4-氯-3-吲哚- β -D-半乳糖苷(X-gal),37 °C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過(guò)夜。3.質(zhì)粒文庫(kù)隨機(jī)篩選及測(cè)序
通過(guò)藍(lán)白斑鑒定后隨機(jī)篩選含cDNA插入片段的陽(yáng)性重組子,將挑取的每個(gè)單克隆子分別接種到Iml氯霉素抗性的LB培養(yǎng)液中,搖菌2個(gè)小時(shí),菌液PCR確認(rèn)陽(yáng)性克隆子,剔除假陽(yáng)性克隆子。將經(jīng)過(guò)菌液PCR鑒定的陽(yáng)性克隆子寄送華大基因公司測(cè)序,測(cè)序在ABI 3730測(cè)序儀上進(jìn)行。在Genbank中對(duì)測(cè)得的序列進(jìn)行Blast同源比對(duì),鑒定到α類(lèi)趨化因子基因 CXCL10,該基因cDNA全長(zhǎng)為1157bp,自74bp到44^p區(qū)段為其開(kāi)放閱讀框,編碼122個(gè)氨基酸,5’端非編碼區(qū)長(zhǎng)73bp,3’端非編碼區(qū)長(zhǎng)7Kbp,包含1個(gè)mRNA半衰期信號(hào),多聚腺苷酸加尾信號(hào)AATAAA和多聚腺苷酸尾巴。4.十個(gè)正常組織和經(jīng)鰻弧菌刺激的肝臟、脾臟和腎臟組織總RNA提起和熒光定量PCR反應(yīng)。利用Trnzol-A+總RNA提取試劑盒提取鯢魚(yú)鰾、眼球、鰭條、鰓、心臟、小腸、 腎臟、肝臟、肌肉、脾臟以及經(jīng)鰻弧菌刺激的不同時(shí)間點(diǎn)肝臟、脾臟和腎臟組織的總RNA, 利用Quant cDNA第一鏈合成試劑盒反轉(zhuǎn)錄合成cDNA第一鏈為模板進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 反應(yīng)。用鯢魚(yú)的 β-actin 基因(上游引物5,-GTGATGAAGCC CAGAGCA-3,(SEQ ID NO. 5);下游引物5,-CGACCAGAGGCATACAGG-3,(SEQ ID NO. 6))作為對(duì)照,確證各個(gè)組織逆轉(zhuǎn)錄的效率都符合要求。CXCLlO基因的熒光定量PCR引物為CXCL10-RT-F (上游引物)5,-GCCTTTCTCGTCTGCCTGCTT-3,(SEQ ID NO. 3) ; CSX10-RT-R (下游引物) 5,-CCGAGTGGTGAGCGTGGATT-3,(SEQ ID NO. 4)。熒光定量反應(yīng)程序模板設(shè)置為 ddCt (Relative Quantitation)Study,反應(yīng)條件設(shè)置為95 度 20s ;95 度 5s,60 度 30s,共 40 個(gè)循環(huán)。利用2_ΔΔσ法計(jì)算相對(duì)表達(dá)量。發(fā)明人運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)了 CXCLlO在鯢魚(yú)的鰾、眼球、鰭條、鰓、心臟、小腸、腎臟、肝臟、肌肉、脾臟中的轉(zhuǎn)錄本水平,結(jié)果表明該基因在所檢測(cè)的十個(gè)組織中均有mRNA轉(zhuǎn)錄本存在,其中在小腸中的豐度最高,其次在眼球中,而在其他組織中則只檢測(cè)到較少量的mRNA轉(zhuǎn)錄本存在(如圖1所示)。另外還檢測(cè)到經(jīng)鰻弧菌刺激后的脾臟和腎臟中的CXCLlO基因表達(dá)量呈上升趨勢(shì),明顯較正常水平高,這提示該基因在鯢魚(yú)抵抗病原微生物入侵中具有重要功能(如圖2-1、2-2和2-3所示)。盡管發(fā)明人已經(jīng)對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案做了較為詳細(xì)的闡述和列舉,應(yīng)當(dāng)理解,對(duì)于本領(lǐng)域一個(gè)熟練的技術(shù)人員來(lái)說(shuō),對(duì)上述實(shí)施例作出修改和/或變通或者采用等同的替代方案是顯然的,都不能脫離本發(fā)明精神的實(shí)質(zhì),本發(fā)明中出現(xiàn)的術(shù)語(yǔ)用于對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案的闡述和理解,并不能構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的限制。
權(quán)利要求
1.一種鯢魚(yú)α類(lèi)趨化因子基因CXCL10,具有如SEQ ID No. 1所示的核苷酸序列。
2.一種鯢魚(yú)α類(lèi)趨化因子基因CXCL10,它編碼的蛋白質(zhì)具有如SEQ ID No. 2所示的氨基酸序列。
3.一種鯢魚(yú)α類(lèi)趨化因子基因CXCLlO的檢測(cè)方法,其特征在于,所述的檢測(cè)方法至少包括使用一對(duì)熒光定量PCR引物,所述的一對(duì)熒光定量PCR引物由上游引物和下游引物組成,其中,所述的上游引物具有如SEQ ID NO. 3所示的核苷酸序列;下游引物具有如SEQ ID NO. 4所示的核苷酸序列。
4.如權(quán)利要求1或2所述的一種鯢魚(yú)α類(lèi)趨化因子基因CXCLlO在制備鯢魚(yú)抵抗病原微生物入侵產(chǎn)品中的應(yīng)用。
5.如權(quán)利要求4所述的應(yīng)用,其特征在于,所述的病原微生物包括鰻弧菌。
全文摘要
本發(fā)明涉及魚(yú)類(lèi)免疫器官中表達(dá)的基因序列領(lǐng)域,具體是一種鮸魚(yú)α類(lèi)趨化因子基因CXCL10、檢測(cè)方法和應(yīng)用。本發(fā)明的基因的獲得不僅為研究魚(yú)類(lèi)趨化因子CXCL10分子在先天免疫反應(yīng)中的作用機(jī)理奠定基礎(chǔ),而且通過(guò)基因序列可以獲得具有生物活性的蛋白產(chǎn)物,為進(jìn)一步研究CXCL10的免疫學(xué)功能提供理論基礎(chǔ);此外,本發(fā)明的基因還可以用于抗病相關(guān)性研究,該基因在鮸魚(yú)抵抗病原微生物入侵中具有重要功能。
文檔編號(hào)A61P31/04GK102250915SQ20111013987
公開(kāi)日2011年11月23日 申請(qǐng)日期2011年5月27日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月27日
發(fā)明者孫悅娜, 徐田軍, 王日昕, 石戈, 程遠(yuǎn)志 申請(qǐng)人:浙江海洋學(xué)院

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  • 專(zhuān)利名稱(chēng):一種骨靶向載體和藥物的制作方法技術(shù)領(lǐng)域:本發(fā)明涉及藥物的靶向藥物技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及骨組織的靶向載體和骨靶向藥物。背景技術(shù):骨是一種特殊的結(jié)締組織,由大量鈣化的細(xì)胞間質(zhì)和細(xì)胞組成,鈣化的細(xì)胞間質(zhì)為骨基質(zhì),其中無(wú)機(jī)鹽的含量占干重的65
  • 耳套及紅外耳溫計(jì)的制作方法【專(zhuān)利摘要】本實(shí)用新型公開(kāi)了一種耳套及紅外耳溫計(jì),該耳套包括耳套本體及薄膜,所述耳套本體為橢圓形的環(huán)形結(jié)構(gòu),所述薄膜固定于所述耳套本體上,且所述薄膜的形狀為與所述耳套本體的形狀相匹配的橢圓形。該紅外耳溫計(jì)包括有探頭
  • 專(zhuān)利名稱(chēng)::利用大孔樹(shù)脂制備細(xì)梗香草總皂苷提取物的方法及用途的制作方法技術(shù)領(lǐng)域::本發(fā)明涉及一種植物提取物的制備方法,尤其涉及一種利用大孔樹(shù)脂制備細(xì)梗香草總皂苷提取物的方法及用途。背景技術(shù)::細(xì)梗香草,又名排草、香排草、香草、毛柄珍珠菜,系
  • 專(zhuān)利名稱(chēng):三葉扇形鉗的制作方法技術(shù)領(lǐng)域:本實(shí)用新型涉及一種在直視人體手術(shù)中,專(zhuān)用于人體內(nèi)部組織器官分離的三葉扇形鉗,屬醫(yī)療器械技術(shù)領(lǐng)域。背景技術(shù):在人體直視手術(shù)過(guò)程中,一旦在人體內(nèi)發(fā)現(xiàn)病灶,需要切除,在切除手術(shù)過(guò)程中, 人體內(nèi)部組織器官需要
  • 專(zhuān)利名稱(chēng):用于胃腸病的中藥組合物及其制備方法技術(shù)領(lǐng)域:本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域,具體而言,本發(fā)明涉及用于治療胃腸蠕動(dòng)減慢、氣滯腹?jié)M腹脹和或促進(jìn)術(shù)后胃腸功能恢復(fù)的中藥組合物、制劑及其制備方法和應(yīng)用等。背景技術(shù):在現(xiàn)代各大醫(yī)院及基層醫(yī)院中,外科手
  • 專(zhuān)利名稱(chēng):用于軟組織修補(bǔ)的緊固件及驅(qū)動(dòng)方法技術(shù)領(lǐng)域:本申請(qǐng)大體上涉及手術(shù)緊固件及與其相關(guān)聯(lián)的施放器,并且尤其涉及用于手術(shù)地將材料緊固到組織上的手術(shù)緊固件以及相關(guān)的施放器,諸如用于使用疝環(huán)(mesh)的疝修補(bǔ)術(shù)。背景技術(shù):手術(shù)緊固件用于消除對(duì)
  • 專(zhuān)利名稱(chēng):降低眼壓的組合、試劑盒和方法技術(shù)領(lǐng)域:本發(fā)明涉及包括前列腺素類(lèi)似物和腺苷受體A1激動(dòng)劑的組合或試劑盒,以及涉及在使用這種組合或試劑盒的受試者中降低眼內(nèi)壓(IOP)的方法。在一個(gè)實(shí)施方式中,本發(fā)明涉及以商標(biāo)Xalatan 市售的拉坦
  • 專(zhuān)利名稱(chēng):用個(gè)人護(hù)理組合物鎮(zhèn)靜人類(lèi)的方法技術(shù)領(lǐng)域:本發(fā)明涉及對(duì)人類(lèi)施用個(gè)人護(hù)理組合物,所述組合物含有可感覺(jué)的香料。許多目前出售的香料美容產(chǎn)品聲稱(chēng)具有對(duì)使用者具有“鎮(zhèn)靜”、“刺激”或“放松”的益處。通常這些產(chǎn)品含有聲稱(chēng)能傳遞這些益處的香料。為
  • 專(zhuān)利名稱(chēng):股骨頭搔刮器的制作方法技術(shù)領(lǐng)域:本發(fā)明涉及醫(yī)療器材,進(jìn)一步是用于治療股骨頭的股骨頭搔刮器。背景技術(shù):在股骨頭囊變、壞死早期,多采用股骨頭髓芯減壓、骨髓或松質(zhì)骨移植,從而來(lái)填充股骨頭內(nèi)的囊變,改善股骨頭內(nèi)的微循環(huán),重建股骨頭內(nèi)的生理
  • 專(zhuān)利名稱(chēng):一種防裂護(hù)手霜的制作方法技術(shù)領(lǐng)域:本發(fā)明涉及一種日用品,具體涉及一種防裂護(hù)手霜。背景技術(shù):護(hù)手霜在人們的生活中使用頻率已經(jīng)越來(lái)越高,尤其在干燥的秋冬季節(jié),護(hù)手霜更是成了人們必不可少的日用品。護(hù)手霜可以保濕潤(rùn)膚,但在防止皮膚開(kāi)裂方面
  • 專(zhuān)利名稱(chēng):一種治療痛風(fēng)的藥物制劑及其制法的制作方法技術(shù)領(lǐng)域:本發(fā)明是一種治療痛風(fēng)的藥物制劑及其制法,屬于藥品的技術(shù)領(lǐng)域。技術(shù)背景痛風(fēng)是由于生活水平提高,長(zhǎng)期嘌呤代謝障礙、血尿酸增高引致組織損傷的ー組疾病。由于尿酸在人體血液中濃度過(guò)高,在軟組
  • 專(zhuān)利名稱(chēng):復(fù)合洗手液的制作方法技術(shù)領(lǐng)域:本發(fā)明涉及一種復(fù)合洗手液。背景技術(shù):現(xiàn)有的洗手液含有的堿性成分比較多,雖然能夠?qū)σ恍┘?xì)菌病原體產(chǎn)生清除作用,但是使用時(shí)間久了對(duì)手上的皮膚產(chǎn)生傷害,使皮膚脫水。發(fā)明內(nèi)容發(fā)明目的:本發(fā)明為了解決現(xiàn)有技術(shù)的
  • 專(zhuān)利名稱(chēng):抑制肝癌轉(zhuǎn)移的中藥制劑及其制備方法技術(shù)領(lǐng)域:本發(fā)明涉及一種抑制肝癌轉(zhuǎn)移的中藥制劑,特別是抑制肝癌轉(zhuǎn)移的中藥制劑及其制備方法。背景技術(shù):肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是世界第6大腫瘤,近年來(lái)HCC
  • 專(zhuān)利名稱(chēng):一種治療支氣管哮喘的中藥外用膏劑及其制備方法一種治療支氣管哮喘的中藥外用膏劑及其制備方法技術(shù)領(lǐng)域:本發(fā)明設(shè)計(jì)中藥領(lǐng)域尤其設(shè)計(jì)治療哮喘外用中藥劑型及其制備方法。 [背景技術(shù)]哮喘,又稱(chēng)"哮吼",是一種以發(fā)作性呼吸
  • 健康管理數(shù)據(jù)監(jiān)測(cè)儀的制作方法【專(zhuān)利摘要】本實(shí)用新型公開(kāi)一種健康管理數(shù)據(jù)監(jiān)測(cè)儀,其包括主控模塊及分別與主控模塊連接的采集模塊、存儲(chǔ)模塊、顯示及輸入模塊,還包括用于識(shí)別使用者、并通過(guò)主控模塊控制采集模塊開(kāi)啟及存儲(chǔ)模塊對(duì)應(yīng)存儲(chǔ)的身份識(shí)別模塊,所述
  • 專(zhuān)利名稱(chēng):Cyl脊柱內(nèi)固定器的制作方法技術(shù)領(lǐng)域:CYL脊柱內(nèi)固定器屬于脊柱外科手術(shù)內(nèi)固定器械。用于脊柱外傷或畸形矯正和固定。圖2是本實(shí)用新型的主要部件,角度釘座(2)(3)兩者形狀相同,圓柱(2-1)的底面與螺紋柱(2-2)(2-3)軸心線
  • 專(zhuān)利名稱(chēng):一種治療蜜蜂白堊病的純中藥組合物及其制備方法技術(shù)領(lǐng)域:本發(fā)明涉及治療蜜蜂白堊病的純中藥組合物及其制備方法,屬于動(dòng)物醫(yī)藥領(lǐng)域,特別涉及一種專(zhuān)門(mén)用于治療蜜蜂白堊病的純中藥組合物及其制備方法。背景技術(shù):蜜蜂白堊病又名石灰質(zhì)病,是由蜂球囊
  • 專(zhuān)利名稱(chēng):丹參有效部位和復(fù)方丹參粉針劑及制備方法與醫(yī)藥用途的制作方法技術(shù)領(lǐng)域:本發(fā)明涉及一種中藥制劑,即作為抗心腦血管疾病的藥物--丹參有效部位和復(fù)方丹參粉針劑及制備方法與醫(yī)藥用途背景技術(shù):在已有技術(shù)中,丹參水針劑在國(guó)內(nèi)已是常用藥物,具有抗
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