專(zhuān)利名稱(chēng)：一種治療腹瀉的香薷提取物膠囊制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥提取物制劑及其制備方法，特別是涉及一種治療腹瀉的香薷提取物膠囊制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
腹瀉(感染性、非感染性)發(fā)病率高，在某些地區(qū)病死率亦較高，是遍及全球的嚴(yán)重問(wèn)題。中醫(yī)對(duì)腹瀉的治療則多進(jìn)行辨證論治，寒濕證者藿香正氣散主之，濕熱證者葛根芩連湯主之，食滯證者保和丸主之，肝郁乘脾者痛瀉要方主之，脾胃虛弱證者參苓白術(shù)散主之，腎陽(yáng)虛衰證者四神丸主之。然亦有采用土單驗(yàn)方對(duì)腸胃炎進(jìn)行辨病治療者。近些年來(lái)，中醫(yī)治療病毒性腹瀉的報(bào)導(dǎo)不少，但形成新藥者較少。中醫(yī)藥的特點(diǎn)是擅長(zhǎng)調(diào)理胃腸道功能，副作用少，但對(duì)病原體的作用強(qiáng)度略遜于西藥?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)感染性腹瀉多用抗菌藥配合液體療進(jìn)行治療，明顯提高了療效。近十多年來(lái)微生態(tài)制劑的研究與應(yīng)用引起了學(xué)者的重視，同時(shí)開(kāi)展了疫苗研究，但是由于引起腹瀉的病原體很多，彼此之間缺乏交叉免疫，故對(duì)疫苗的研制一直進(jìn)展緩慢。隨著研究的深入，對(duì)抗菌藥的毒副作用也越來(lái)越清楚，如對(duì)腎、肝、神經(jīng)精神、血液的毒性及胃腸道反應(yīng)、過(guò)敏反應(yīng)和二重感染等。目前對(duì)病毒性腹瀉尚缺乏特效的藥物，國(guó)外有用乳酸桿菌、干擾素、病毒唑等進(jìn)行治療的報(bào)導(dǎo)，國(guó)內(nèi)有用病毒感染雞，然后從雞卵中制備抗體制劑進(jìn)行治療者，但仍在研發(fā)之中。近年研制了輪狀病毒活疫苗，正在推廣應(yīng)用之中。據(jù)WHO的資料，全世界每年腹瀉病例可達(dá)30-50億例次，約有500-1000萬(wàn)病例因嚴(yán)重腹瀉而死亡。亞、非、拉地區(qū)5歲以下兒童中，每年發(fā)生腹瀉者在10億人次以上，死者約500萬(wàn)。據(jù)報(bào)導(dǎo)，中國(guó)每年約8.36億人次發(fā)生腹瀉，其中5歲以下兒童約占2.09億人次，約占1/4。據(jù)1993年衛(wèi)生部報(bào)告，我國(guó)急性胃腸炎兩周患病率為11.74％，兩周急病按病種構(gòu)成約占8.36％，排在急性鼻咽炎和流行性感冒之后，居全國(guó)城鄉(xiāng)居民兩周患病的第三位。輪狀病毒是1973年由Bishop等發(fā)現(xiàn)的。全世界5歲以下兒童每年可發(fā)生1.4億人次輪狀病毒腹瀉，死亡可達(dá)100萬(wàn)人。輪狀病毒是嬰幼兒腹瀉的重要病原，后來(lái)又發(fā)現(xiàn)了引起成人腹瀉的成人輪狀病毒。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種治療腹瀉的香薷提取物制劑。
本發(fā)明目的還在于提供香薷及其提取物的質(zhì)量控制方法。
本發(fā)明目的還在于提供香薷及其提取物的制藥新用途。
本發(fā)明目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的香薷揮發(fā)油的制備香薷全草，切段，加6-10倍量水，水蒸氣蒸餾提取4-8小時(shí)，分離出揮發(fā)油層，即得。
本發(fā)明揮發(fā)油(莫拉油)為微黃色的澄清液體，相對(duì)密度(20)為0.9572g/ml，折光率1.51。經(jīng)氣質(zhì)聯(lián)用色譜分析主要成分百里香酚及香芹酚含量不得低于55％，符合二類(lèi)新藥的要求。原料藥揮發(fā)油組分的定性和相對(duì)定量研究，已知組分為百里香酚(Thymol)58.131％，香芹酚(Cavacrol)11.946％，對(duì)-聚傘花素(P-Cymene)10.274％，γ-松油烯(γ-Terpinene)5.733％，乙酰百里香酚(Thymol Acetate)2.626％，β-香葉烯(β-Myrcene)1.832％，a-律草烯(a-Humulene)1.638％，檸檬烯(Limonene)1.564％，反式-石竹烯(trans-Caryophyllene)0.970％，a-松油醇(a-Terpinene)0.718％，龍腦(Borneol)0.514％，乙酰香芹酚(CavacrolAcetate)0.384％，β-蒎烯(β-Pinene)0.317％，a-蒎烯(a-Pinene)0.256％，已知組分總計(jì)為96.5％，揮發(fā)油成分穩(wěn)定，放置一年時(shí)間，各主要成分及其相對(duì)比例無(wú)明顯變化。
本發(fā)明膠囊制劑(莫拉膠囊〕的制備方法取莫拉油20-60重量份，加乙醇20-60體積份〔g/ml〕，攪勻；取β-環(huán)糊精120-360重量份，加360-1080體積份水加熱溶解，30-50℃保溫?cái)嚢柘戮徛尤肷鲜鰮]發(fā)油溶液，保溫?cái)嚢?-8分鐘，通過(guò)膠體磨包合2-4次，冷藏8-15小時(shí)以上，抽濾，包合物置30-50℃鼓風(fēng)干燥4-8小時(shí)，過(guò)篩，加入常規(guī)輔料，混勻，裝入膠囊。
本發(fā)明膠囊制劑的質(zhì)量控制方法含有下述鑒別和/或含量測(cè)定含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000版一部附錄VI D)測(cè)定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；50-70∶50-30∶1-3甲醇-水-冰醋酸為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為276nm。理論板數(shù)按百里香酚峰計(jì)算應(yīng)不低于10000，按香芹酚峰計(jì)算應(yīng)不低于15000。對(duì)照品溶液的制備，精密稱(chēng)取百里香酚對(duì)照品8mg和百里香酚對(duì)照品4mg，置100ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得，每ml中含百里香酚80μg，含香芹酚40μg。供試品溶液的制備，取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，研細(xì)，取0.12g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇20ml，密塞，稱(chēng)定重量，超聲處理30分鐘，放冷，稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液2ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。測(cè)定法，分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。每粒膠囊含百里香酚(C10H14O)和香芹酚(C10H14O)的總量不得少于25mg。
鑒別按莫拉膠囊含量測(cè)定方法，高效液相色譜圖在與百里香酚和香芹酚對(duì)照品相同的保留時(shí)間，有相應(yīng)的吸收峰。
本發(fā)明藥物制劑和中化濕、解表退熱。主治腹瀉、腹痛、惡寒發(fā)熱、頭身疼痛、以及輪狀病毒或某些細(xì)菌感染引起的腹瀉。
本發(fā)明所述莫拉膠囊的藥效學(xué)研究結(jié)果顯示，莫拉膠囊具有如下功能1.莫拉膠囊的抗病毒作用12.5～25nl/ml莫拉膠囊能抑制小兒輪狀病毒RDTA-I型(Wa株)在非洲綠猴腎細(xì)胞上生長(zhǎng)繁殖。
2.莫拉膠囊的抗細(xì)菌作用莫拉膠囊能降低腸炎沙門(mén)氏菌腹腔感染小鼠的死亡率(P＜0.05)；能降低腸炎沙門(mén)氏菌經(jīng)口感染的小鼠大便中致病菌的含量(P＜0.05～0.01)；在體外，對(duì)致病性大腸桿菌、志賀氏桿菌、普通變形桿菌、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌等常見(jiàn)致病菌，有較強(qiáng)的抑制生長(zhǎng)作用，試驗(yàn)用44株菌株中，最低抑菌濃度≤1ul油/ml的占79.5％。
3.莫拉膠囊的止瀉作用顯著地降低100％番瀉葉煎劑所致的腹瀉模型小鼠的稀便率、腹瀉率、腹瀉指數(shù)及腹瀉程度(P＜0.05～0.001)。
4.莫拉膠囊對(duì)胃腸功能的影響該藥能降低正常的和新斯的明所致亢進(jìn)的小鼠小腸推進(jìn)功能(P＜0.05～0.001)，延長(zhǎng)排便時(shí)間、降低排便數(shù)量(P＜0.05～0.001)，減緩胃排空運(yùn)動(dòng)(P＜0.01～0.001)，降低胃分泌功能(P＜0.001)，抑制正常豚鼠離體腸平滑肌自律運(yùn)動(dòng)和乙酰膽堿所致腸平滑肌興奮。
5.莫拉膠囊的止痛作用莫拉膠囊非常顯著地減少由0.7％醋酸所致的小鼠扭體數(shù)(均P＜0.001)，抑制率達(dá)51.3～55.7％。
6.莫拉膠囊的抗炎作用莫拉膠囊顯著地抑制由二甲苯所致小鼠耳腫脹(P＜0.01～0.001)，顯著地抑制組織胺引起的血管通透性(P＜0.05～0.001)，抑制羧甲基纖維素鈉所致腹腔白細(xì)胞游走(P＜0.05～0.001)。
7.莫拉膠囊的退熱作用莫拉膠囊對(duì)酵母菌所致的大鼠體溫升高和內(nèi)毒素所致家兔體溫升高均有顯著地抑制作用(P＜0.05～0.001)。
下列實(shí)驗(yàn)例用于進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明。
實(shí)驗(yàn)例莫拉膠囊抑制小兒輪狀病毒ROTA-I型(Wa株)的作用材料與方法1.藥物受試藥莫拉膠囊，試驗(yàn)直接用莫拉油，淡黃色，比重0.95726g/ml，16mg油/g生藥，批號(hào)20000601，北京巨杉醫(yī)藥研究所提供。取0.5ml莫拉油加0.5ml吐溫-80(上海第十八制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)960520)混均后加4ml生長(zhǎng)液稀釋。放4℃冰箱備用。
對(duì)照藥葛根芩連微丸，廣西柳州市中藥廠生產(chǎn)，桂衛(wèi)準(zhǔn)字(1991)第017004號(hào)，批號(hào)990721。取1g藥加蒸餾水10毫升溶解，2000轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，取上清液水浴煮沸10分鐘滅菌，放4℃冰箱保存。
上述藥用前調(diào)pH＝7.2
2.細(xì)胞非洲綠猴腎(Vero)傳代細(xì)胞，長(zhǎng)成單層的細(xì)胞經(jīng)胰酶消化液消化為單個(gè)細(xì)胞，用生長(zhǎng)液配成6萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/ml，接入細(xì)胞管，1ml/管。
3.病毒小兒輪狀病毒ROTA-1型(Wa株)，TCID50為10-7，由中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院病毒所提供，試驗(yàn)時(shí)用100個(gè)TCID500.1ml。Wa株用前，用1ml病毒液加0.05ml胰酶(200ug/ml)37℃水浴30分鐘。
4.試劑Eagles MEM干粉，美國(guó)GIBCO產(chǎn)品。胎牛血清，天津血液研究所生產(chǎn)；批號(hào)9925。L-谷氨酰胺，Sigma進(jìn)口分裝，批號(hào)911015。青霉素、鏈霉素。
試劑配制生長(zhǎng)液Eagles加1％青鏈霉素、1％谷氨酰胺、10％小牛血清，用前調(diào)PH＝7.4。
維持液Eagles加1％青鏈霉素、1％谷氨酰胺，200ug/ml胰酶(終濃度為2ug/ml)，用前調(diào)PH＝7.4。
細(xì)胞消化液0.25％胰酶，用無(wú)鈣鎂磷酸鹽緩沖液配制。
5.試驗(yàn)用品及儀器培養(yǎng)瓶、試管、刻度吸管、溫箱、冰箱、烤箱、水浴箱、低溫冰柜、液氮罐等，均為國(guó)產(chǎn)。
6.試驗(yàn)方法(1)莫拉油、葛根芩連微丸和吐溫-80對(duì)Vero細(xì)胞的毒性作用將稀釋好的藥物、吐溫-80接入長(zhǎng)成單層細(xì)胞的試管中，放37℃溫箱培養(yǎng)，每日觀察細(xì)胞變化。
(2)藥物對(duì)病毒的直接殺傷作用將稀釋好的藥物與病毒等量混合后放37℃溫箱1小時(shí)。然后接入長(zhǎng)成單層細(xì)胞的試管中，每管0.2ml，放37℃吸附1小時(shí)。用維持液洗兩次后加入維持液1ml。放37℃溫箱培養(yǎng)，每日觀察細(xì)胞病變(CPE)，當(dāng)病毒對(duì)照出現(xiàn)++++時(shí)，終止試驗(yàn)。
(3)藥物對(duì)病毒在細(xì)胞內(nèi)繁殖的抑制作用將已處理的病毒接入細(xì)胞管中，每管0.1ml放37℃吸附1小時(shí)，用維持液洗兩次后分別加入含不同藥物濃度的維持液1ml，放37℃培養(yǎng)，每日觀察細(xì)胞病變，當(dāng)病毒對(duì)照管出現(xiàn)++++時(shí)，終止試驗(yàn)。
注細(xì)胞病變+25％、++50％、+++75％、++++100％。
以上試驗(yàn)同時(shí)設(shè)藥物對(duì)照、病毒對(duì)照、細(xì)胞對(duì)照，每試驗(yàn)組4管細(xì)胞，重復(fù)做試驗(yàn)2次。
結(jié)果1.莫拉油對(duì)Vero細(xì)胞的毒性試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。
表1莫拉油對(duì)Vero細(xì)胞的毒性試驗(yàn)結(jié)果組別藥物濃度/ml 細(xì)胞管數(shù) 細(xì)胞毒性管數(shù)100nl 4450nl 40莫拉油25nl 4012.5nl 405mg44葛根芩連微丸 2.5mg 401.25mg 40200nl 42吐溫-80100nl 40Vero對(duì)照 40將4個(gè)濃度莫拉油分別接入細(xì)胞管，終濃度為100、50、25、12.5nl/ml。每個(gè)濃度4管，觀察7天。結(jié)果莫拉油濃度為100nl/ml時(shí)對(duì)細(xì)胞有毒性，濃度為50，25，12.5nl/ml時(shí)對(duì)細(xì)胞沒(méi)有毒性；葛根芩連微丸5mg/ml時(shí)對(duì)細(xì)胞有毒性，2.5mg/ml和1.25mg/ml時(shí)對(duì)細(xì)胞沒(méi)有毒性；吐溫-80 100nl/ml時(shí)對(duì)細(xì)胞沒(méi)有毒性。
2.莫拉油對(duì)病毒的直接殺傷作用試驗(yàn)結(jié)果結(jié)果見(jiàn)表2。
表2莫拉油對(duì)病毒的直接殺傷作用試驗(yàn)結(jié)果組別 藥物濃度/ml 接種管數(shù) 陽(yáng)性管數(shù) 陰性管數(shù)50nl 8 80莫拉油組25nl 8 80葛根芩連微丸組 10mg 8 805mg 8 80100nl8 80吐溫-80組50nl 8 80Wa株對(duì)照組 8 80細(xì)胞對(duì)照組 8 08如表所示莫拉油各給藥組對(duì)小兒輪狀病毒ROTA-1型，沒(méi)有直接滅活作用。
3.莫拉油對(duì)病毒在細(xì)胞內(nèi)的繁殖抑制作用試驗(yàn)結(jié)果結(jié)果見(jiàn)表3。
表3莫拉油對(duì)病毒在細(xì)胞內(nèi)的繁殖抑制作用試驗(yàn)結(jié)果組別 藥物濃度/ml 管數(shù) 陽(yáng)性管 陰性管25nl 8 0812.5nl 8 08莫拉油組6.25nl 8 263.12nl 8 802.5mg8 80葛根芩連微丸組1.25mg 8 80100nl8 80吐溫-80組50nl 8 80Wa株對(duì)照 8 80細(xì)胞對(duì)照 8 08
如表所示，莫拉油濃度為25nl/ml、12.5nl/ml時(shí)，可以完全抑制病毒在細(xì)胞內(nèi)的繁殖，濃度為6.25nl/ml時(shí)，對(duì)病毒在細(xì)胞內(nèi)繁殖有一定的抑制作用，濃度為3.1nl/ml時(shí)對(duì)病毒在細(xì)胞內(nèi)繁殖沒(méi)有抑制作用。葛根芩連微丸、吐溫-80各濃度組對(duì)病毒在細(xì)胞內(nèi)繁殖沒(méi)有抑制作用。
實(shí)施例1取莫拉油50g，加乙醇50ml，攪勻；取β-環(huán)糊精300g，加900ml水加熱溶解，40℃保溫?cái)嚢柘戮徛尤肷鲜鰮]發(fā)油溶液，保溫?cái)嚢?分鐘，通過(guò)膠體磨包合3次，冷藏12小時(shí)以上，抽濾，包合物置40℃鼓風(fēng)干燥6小時(shí)，過(guò)篩，加入硬脂酸鎂1g，混勻，裝入膠囊，制成1000粒。每粒裝0.35g，一日3次，一次2粒。
實(shí)施例2莫拉膠囊質(zhì)量控制方法含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000版一部附錄VI D)測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；60∶40∶2甲醇-水-冰醋酸為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為276nm。理論板數(shù)按百里香酚峰計(jì)算應(yīng)不低于10000，按香芹酚峰計(jì)算應(yīng)不低于15000。對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取百里香酚對(duì)照品8mg和百里香酚對(duì)照品4mg，置100ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得，每ml中含百里香酚80μg，含香芹酚40μg。供試品溶液的制備 取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，研細(xì)，取0.12g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇20ml，密塞，稱(chēng)定重量，超聲處理30分鐘，放冷，稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液2ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。測(cè)定法，分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得，每粒膠囊含百里香酚(C10H14O)和香芹酚(C10H14O)的總量不得少于25mg。
鑒別按莫拉膠囊含量測(cè)定方法，高效液相色譜圖在與百里香酚和香芹酚對(duì)照品相同的保留時(shí)間，有相應(yīng)的吸收峰。
權(quán)利要求
1.一種香薷揮發(fā)油，其特征在于該揮發(fā)油含有百里香酚58.131％，香芹酚11.946％，對(duì)-聚傘花素10.274％，γ-松油烯5.733％，乙酰百里香酚2.626％，β-香葉烯1.832％，a-律草烯1.638％，檸檬烯1.564％，反式-石竹烯0.970％，a-松油醇0.718％，龍腦0.514％，乙酰香芹酚0.384％，β-蒎烯0.317％，a-蒎烯0.256％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的香薷揮發(fā)油，其特征在于該揮發(fā)油經(jīng)氣質(zhì)聯(lián)用色譜分析主要成分百里香酚及香芹酚含量不得低于55％。
3.一種香薷揮發(fā)油膠囊制劑，其特征在于該制劑是由如下方法制成的取莫拉油20-60重量份，加乙醇20-60體積份，攪勻；取β-環(huán)糊精120-360重量份，加360-1080體積份水加熱溶解，30-50℃保溫?cái)嚢柘戮徛尤肷鲜鰮]發(fā)油溶液，保溫?cái)嚢?-8分鐘，通過(guò)膠體磨包合2-4次，冷藏8-15小時(shí)以上，抽濾，包合物置30-50℃鼓風(fēng)干燥4-8小時(shí)，過(guò)篩，加入常規(guī)輔料，混勻，裝入膠囊。
4.如權(quán)利要求3所述的一種香薷揮發(fā)油膠囊制劑，其特征在于該制劑是由如下方法制成的取莫拉油50g，加乙醇50ml，攪勻；取β-環(huán)糊精300g，加900ml水加熱溶解，40℃保溫?cái)嚢柘戮徛尤肷鲜鰮]發(fā)油溶液，保溫?cái)嚢?分鐘，通過(guò)膠體磨包合3次，冷藏12小時(shí)以上，抽濾，包合物置40℃鼓風(fēng)干燥6小時(shí)，過(guò)篩，加入硬脂酸鎂1g，混勻，裝入膠囊，制成1000粒。
5.一種如權(quán)利要求3或4所述制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于該質(zhì)量控制方法含有下述鑒別和/或含量測(cè)定含量測(cè)定照高效液相色譜法測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；50-70∶50-30∶1-3甲醇-水-冰醋酸為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為276nm；理論板數(shù)按百里香酚峰計(jì)算應(yīng)不低于10000，按香芹酚峰計(jì)算應(yīng)不低于15000；對(duì)照品溶液的制備，精密稱(chēng)取百里香酚對(duì)照品8mg和百里香酚對(duì)照品4mg，置100ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得，每ml中含百里香酚80μg，含香芹酚40μg；供試品溶液的制備，取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，研細(xì)，取0.12g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇20ml，密塞，稱(chēng)定重量，超聲處理30分鐘，放冷，稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液2ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得；測(cè)定法，分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；每粒膠囊含百里香酚和香芹酚的總量不得少于25mg；鑒別按含量測(cè)定方法，高效液相色譜圖在與百里香酚和香芹酚對(duì)照品相同的保留時(shí)間，有相應(yīng)的吸收峰。
6.如權(quán)利要求5所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中以60∶40∶2甲醇-水-冰醋酸為流動(dòng)相。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種香薷揮發(fā)油的膠囊制劑及其質(zhì)量控制方法，本發(fā)明香薷揮發(fā)油膠囊制劑有抗病毒、抗細(xì)菌、抗炎、止瀉、止痛、退熱的作用，并能抑制胃腸功能亢進(jìn)。
文檔編號(hào)A61P1/12GK1506092SQ0215399
公開(kāi)日2004年6月23日 申請(qǐng)日期2002年12月9日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月9日
發(fā)明者張瑞祥, 仝燕, 劉建勛, 李彩熙 申請(qǐng)人:張瑞祥