專利名稱：一種含三磷酸腺苷二鈉氯化鎂化合物藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領域，具體涉及一種三磷酸腺苷二鈉氯化鎂的藥物組合物，本發(fā)明還涉及其制備方法。
背景技術：
三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate, ATP)是一種核苷酸(又叫腺苷三磷酸)，作為細胞內(nèi)能量傳遞的物質(zhì)，儲存和傳遞化學能。三磷酸腺苷是體內(nèi)廣泛存在的輔酶，是體內(nèi)組織細胞所需能量的主要來源，蛋白質(zhì)、脂肪、糖和核苷酸的合成都需ATP參與。三磷 酸腺苷二鈉是核苷酸衍生物，參與體內(nèi)脂肪、蛋白質(zhì)、糖、核酸以及核苷酸的代謝。當體內(nèi)吸收、分泌、肌肉收縮及進行生化合成反應等需要能量時，三磷酸腺苷即分解成二磷酸腺苷及磷酸基，同時釋放出能量。三磷酸腺苷二鈉能夠穿透血-腦脊液屏障，能提高神經(jīng)細胞膜性結構的穩(wěn)定性和重建能力、促進神經(jīng)突起的再生長。三磷酸腺苷二鈉現(xiàn)有劑型有三磷酸腺苷二鈉氯化鎂針劑、三磷酸腺苷二鈉氯化鈉注射劑等劑型。與三磷酸腺苷二鈉氯化鈉相比，三磷酸腺苷二鈉氯化鎂由于具有鎂離子，能夠啟動損傷衰竭細胞功能恢復，激活代謝。三磷酸腺苷二鈉-氯化鎂注射液在體內(nèi)可以防止外源性三磷酸腺苷與血漿二價陽離子形成絡合物，從而發(fā)揮三磷酸腺苷的供能、改善線粒體功能的作用，加速腦、心、肝、腎及神經(jīng)細胞受損后恢復，減輕三磷酸腺苷血管擴張作用所致的持續(xù)低血壓，補充缺血后細胞能量代謝所需鎂，延滯外源性三磷酸腺苷在體內(nèi)快速脫氨基和去磷酸化作用。該藥能增加線粒體腺苷酸儲量，減輕缺血細胞的損傷，維持細胞器的完整性，改善微循環(huán)，對急性黃疸肝炎、缺血性腦血管病后遺癥、腦損傷、肺心病肺動脈高血壓、急慢性活動型肝炎、心肌炎、急慢性腎臟疾病、燒傷、外傷以及敗血癥具有輔助治療作用。然而，三磷酸腺苷二鈉氯化鎂的穩(wěn)定性一直是一個難以解決的難題。專利文獻CN1736392A指出，目前市售的三磷酸腺苷二鈉氯化鎂注射液是由兩瓶藥液組成，即A液和M液，分別含三磷酸腺苷二鈉和氯化鎂，臨床使用時配制較繁瑣，這是由于三磷酸腺苷二鈉和氯化鎂混合后不穩(wěn)定，易產(chǎn)生沉淀所致。該文獻給出的方式是通過添加輔料，制備成凍干粉來解決穩(wěn)定性的問題。然而，將其制備成凍干粉一方面增加了成本，另一方面并未從根本上解決注射劑存放穩(wěn)定性的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術中三磷酸腺苷二鈉氯化鎂注射液穩(wěn)定性差的問題，提供一種新的三磷酸腺苷二鈉氯化鎂藥物組合物。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術方案—種含三磷酸腺苷二鈉氯化鎂化合物藥物組合物，其包括以下重量份的成分三磷酸腺苷二鈉50 150、氯化鎂100 300、亞硫酸氫鈉10 30。優(yōu)選本發(fā)明藥物組合物包括以下重量份的成分三磷酸腺苷二鈉80 120、氯化鎂150 250、亞硫酸氫鈉15 25。更優(yōu)選本發(fā)明藥物組合物包括以下重量份的成分三磷酸腺苷二鈉100、氯化鎂200、亞硫酸氫鈉20。
本發(fā)明藥物組合物可以使水針劑也可以是粉針劑。當為水針劑時，還包括滅菌用水1000 10000重量份，優(yōu)先滅菌用水1500 8000重量份，更有選4000重量份。當為凍干粉針劑時，還包括10 20重量份的右旋糖酐40。本發(fā)明還提供制備上述藥物組合物水針劑的方法，該方法包括如下步驟將氯化鎂和亞硫酸氫鈉用全量體積20 25%的滅菌用水溶解，攪拌均勻，加入藥用活性炭，攪拌吸附，加入三磷酸腺苷二鈉，攪拌吸附，濾除活性炭，加滅菌用水至全量，過濾除菌。上述藥用活性炭加入量優(yōu)選為全量的O. 04% (g/ml)。上述過濾除菌優(yōu)選為兩級過濾除菌，分別采用O. 45 μ m微孔濾膜和O. 22 μ m微孔濾膜過濾。優(yōu)選所述滅菌用水的溫度不超過20°C，避免滅菌用水溫度過高而導致亞硫酸氫鈉以及三磷酸腺苷二鈉的功能或活性損失。優(yōu)選攪拌吸附的方式是攪拌均勻后靜置每隔5分鐘攪拌一次，攪拌3 4次。本發(fā)明涉及到兩次攪拌吸附，采用這種方式一方面可以使雜質(zhì)被有效吸附，另一方面可以減少溶液中溶解氧的量，從而有效防止亞硫酸氫鈉的氧化。本發(fā)明還提供制備上述藥物組合物凍干粉針劑的方法，其包括如下步驟I)將氯化鎂和亞硫酸氫鈉用注射用水溶解，攪拌均勻，加入藥用活性炭，攪拌吸附，加入三磷酸腺苷二鈉，攪拌吸附，濾除活性炭得溶液I ;2)將右旋糖酐用注射用水溶解，加入活性炭于50 60°C攪拌吸附，冷卻至20°C以下得溶液2 ；3)將將溶液I和溶液2混合，加注射用水至全量，再經(jīng)除菌濾器過濾至儲罐，半成品檢驗合格后，分裝入瓶；4)將分裝好的半成品置于冷凍干燥機制品室板層，4小時降溫至-40°C，并于-40°C保溫3小時，開啟捕水器制冷開關，于預凍保溫結束后，開啟真空泵，當真空泵讀數(shù)降至20帕以下時，按10°C /h逐漸升高板層溫度至_4°C，保溫3小時，升溫至0°C繼續(xù)保溫I小時，當制品溫度與板層溫度接近時，繼續(xù)升高板層溫度至30°C并保溫2小時，當制品溫度與板層溫度接近時結束凍干。本發(fā)明通過研究意外發(fā)現(xiàn)，通過添加亞硫酸氫鈉使三磷酸腺苷二鈉、氯化鎂及亞硫酸氫鈉在合理的比例中，能夠有效提高注射液的穩(wěn)定性，防止其發(fā)生沉淀。另外，適當提高氯化鎂的含量可以增強其在缺血性腦血管病后遺癥中的治療效果。
具體實施例方式以下實施例用于進一步說明本發(fā)明，但不應理解為對本發(fā)明的限制。在不背離本發(fā)明精神和實質(zhì)的前提下，對本發(fā)明所作的修飾或者替換，均屬于本發(fā)明的范疇。實施例I配方三磷酸腺苷二鈉100g、氯化鎂200g、亞硫酸氫鈉20g、滅菌用水4000ml。制備方法
將氯化鎂和亞硫酸氫鈉用全量體積20 %的滅菌用水溶解，攪拌均勻，加入全量體積的O. 04% (g/ml)藥用活性炭，攪拌均勻后靜置每隔5分鐘攪拌一次，攪拌3次，加入三磷酸腺苷二鈉，攪拌均勻后靜置每隔5分鐘攪拌一次，攪拌4次，濾除活性炭，加滅菌用水至全量，分別采用0.45 μ m微孔濾膜和0.22 μ m微孔濾膜過濾。過濾除菌。檢驗合格后分裝。其中滅菌用水的溫度不超過20°C。實施例2配方三磷酸腺苷二鈉50g、氯化鎂100g、亞硫酸氫鈉10g、滅菌用水1000ml。制備方法將氯化鎂和亞硫酸氫鈉用全量體積25 %的滅菌用水溶解，攪拌均勻，加入全量體積的O. 03%藥用活性炭，攪拌均勻后靜置每隔5分鐘攪拌一次，攪拌3次，加入三磷酸腺苷二鈉，攪拌均勻后靜置每隔5分鐘攪拌一次，攪拌4次，濾除活性炭，加滅菌用水至全量，分 別采用0.45 μ m微孔濾膜和0.22 μ m微孔濾膜過濾。過濾除菌。檢驗合格后分裝。其中滅菌用水的溫度不超過20°C。實施例3配方三磷酸腺苷二鈉80g、氯化鎂150g、亞硫酸氫鈉15g、滅菌用水1500ml。制備方法將氯化鎂和亞硫酸氫鈉用全量體積25 %的滅菌用水溶解，攪拌均勻，加入全量體積的O. 04%藥用活性炭，攪拌均勻后靜置每隔5分鐘攪拌一次，攪拌3次，加入三磷酸腺苷二鈉，攪拌均勻后靜置每隔5分鐘攪拌一次，攪拌3次，濾除活性炭，加滅菌用水至全量，分別采用0.45 μ m微孔濾膜和0.22 μ m微孔濾膜過濾。過濾除菌。檢驗合格后分裝。其中滅菌用水的溫度不超過20°C。實施例4配方三磷酸腺苷二鈉120g、氯化鎂250g、亞硫酸氫鈉30g、滅菌用水10000ml。制備方法將氯化鎂和亞硫酸氫鈉用全量體積20%的滅菌用水溶解，攪拌均勻，加入全量體積的O. 5%藥用活性炭，攪拌均勻后靜置每隔5分鐘攪拌一次，攪拌3次，加入三磷酸腺苷二鈉，攪拌均勻后靜置每隔5分鐘攪拌一次，攪拌3次，濾除活性炭，加滅菌用水至全量，分別采用0.45 μ m微孔濾膜和0.22 μ m微孔濾膜過濾。過濾除菌。檢驗合格后分裝。其中滅菌用水的溫度不超過20 °C。實施例5配方三磷酸腺苷二鈉150g、氯化鎂300g、亞硫酸氫鈉25g、滅菌用水8000ml。制備方法將氯化鎂和亞硫酸氫鈉用全量體積20 %的滅菌用水溶解，攪拌均勻，加入全量體積的O. 05%藥用活性炭，攪拌均勻后靜置每隔5分鐘攪拌一次，攪拌3次，加入三磷酸腺苷二鈉，攪拌均勻后靜置每隔5分鐘攪拌一次，攪拌3次，濾除活性炭，加滅菌用水至全量，分別采用0.45 μ m微孔濾膜和0.22 μ m微孔濾膜過濾。過濾除菌。檢驗合格后分裝。其中滅菌用水的溫度不超過20°C。實施例6配方三磷酸腺苷二鈉120g、氯化鎂150g、亞硫酸氫鈉20g、滅菌用水5000ml。
制備方法將氯化鎂和亞硫酸氫鈉用全量體積20 %的滅菌用水溶解，攪拌均勻，加入全量體積的O. 03%藥用活性炭，攪拌均勻后靜置每隔5分鐘攪拌一次，攪拌4次，加入三磷酸腺苷二鈉，攪拌均勻后靜置每隔5分鐘攪拌一次，攪拌3次，濾除活性炭，加滅菌用水至全量，分別采用0.45 μ m微孔濾膜和0.22 μ m微孔濾膜過濾。過濾除菌。檢驗合格后分裝。其中滅菌用水的溫度不超過20°C。實施例7配方三磷酸腺苷二鈉100g、氯化鎂200g、亞硫酸氫鈉20g、右旋糖酐4015g制備方法I)將氯化鎂和亞硫酸氫鈉用IOOOml的注射用水溶解,攪拌均勻,加入全量體積的O. 04% (g/ml)藥用活性炭，攪拌均勻后靜置每隔5分鐘攪拌一次，攪拌3次，加入三磷酸腺 苷二鈉，攪拌均勻后靜置每隔5分鐘攪拌一次，攪拌4次，濾除活性炭得溶液I ;2)將右旋糖酐用200ml注射用水溶解，加入活性炭于55°C攪拌吸附，冷卻至20°C以下得溶液2 ；3)將將溶液I和溶液2混合，加注射用水至4000ml，再經(jīng)除菌濾器過濾至儲罐，半成品檢驗合格后，分裝入瓶；4)將分裝好的半成品置于冷凍干燥機制品室板層，4小時降溫至-40°C，并于-40°C保溫3小時，開啟捕水器制冷開關，于預凍保溫結束后，開啟真空泵，當真空泵讀數(shù)降至20帕以下時，按10°C /h逐漸升高板層溫度至_4°C，保溫3小時，升溫至0°C繼續(xù)保溫I小時，當制品溫度與板層溫度接近時，繼續(xù)升高板層溫度至30°C并保溫2小時，當制品溫度與板層溫度接近時結束凍干。結果制得的凍干粉凍型良好，復溶性及澄清度均符合規(guī)定，長時間放置后(24個月)穩(wěn)定性高，含量、有關物質(zhì)、澄明度等各項指標變化均不明顯。實驗例I :安全性試驗參考林秀珍等(三磷酸腺苷二鈉2氯化鎂注射液的安全性試驗，海峽藥學，2006年，第18卷第4期)的實驗方法來考察本發(fā)明試劑的安全性，試驗方法及結果如下一、血管刺激性實驗取體重為2. 0-2. 5kg的新西蘭大白兔21只，隨機分為7組(實驗組I 7，分別對應注射施例I 7的三磷酸腺苷二鈉氯化鎂藥物組合物)，每組3只。分別用兔箱固定，雙側耳緣脫毛并用酒精消毒皮膚，左耳緣靜脈緩慢注射受試液O. 6mL · k^1,(將實施例I 7的三磷酸腺苷二鈉氯化鎂藥物組合物用生理鹽水注射液稀釋至三磷酸腺苷二鈉Img/ml (下稱lmgATP/ml))右耳緣靜脈注射同量生理鹽水注射液，做為陰性對照，注射速度為ImL ^irT1,每日I次，連續(xù)7天。每日注射的部位逐次由耳緣靜脈的遠端向近端前移，注意觀察給藥后兔耳緣靜脈反應情況，并于末次給藥后24h將兔放血處死，于末次注射部位的近端(距注射部位O. 5cm)和遠端(距末次注射部位I. 5cm)各剪取一段標本，放入10%甲醛固定液中固定，送病理科做常規(guī)組織切片，并觀察有無血栓形成，內(nèi)皮損傷及其它病理變化。目檢結果實驗組I 7組給藥側與注射生理鹽水側均未見明顯異常。鏡檢結果兩組兔耳組織學改變基本一致，無顯著差別；表皮均有輕度角化，無明顯萎縮或增厚改變。可見本發(fā)明三磷酸腺苷二鈉-氯化鎂注射液靜脈給藥無明顯刺激性。
二、溶血實驗取新西蘭白兔，清醒狀態(tài)下從心臟取血約20mL放入置有玻璃珠的燒杯中，不斷振搖以除去纖維蛋白，再倒入試管中并加入生理鹽水，搖勻，2500rpm離心5min，棄上清液后，沉淀的紅細胞再用生理鹽水洗滌和離心3次，至上清液不呈紅色。將所得紅細胞再用生理鹽水配成2 %紅細胞懸液，供試驗用。取干凈試管7支，按表I所示依次加入2 %紅細胞懸液和生理鹽水，置37°C恒溫水浴中溫育30min后，第I 5管分別加入受試液O. 1、0. 2、0. 3、O. 4,0. 5mL，第六管為生理鹽水對照管，第七管為蒸餾水對照管，搖勻后，置37°C保溫箱中，觀察4h內(nèi)各試管的溶液是否有溶血或紅細胞凝集現(xiàn)象。表I溶血試驗加藥表
權利要求
1.一種含三磷酸腺苷二鈉氯化鎂化合物藥物組合物，其包括以下重量份的成分三磷酸腺苷二鈉50 150、氯化鎂100 300、亞硫酸氫鈉10 30。
2.根據(jù)權利要求I所述的藥物組合物，其包括以下重量份的成分三磷酸腺苷二鈉80 120、氯化鎂150 250、亞硫酸氫鈉15 25。
3.根據(jù)權利要求2所述的藥物組合物，其包括以下重量份的成分三磷酸腺苷二鈉100、氯化鎂200、亞硫酸氫鈉20。
4.根據(jù)權利要求I 3任一項所述的藥物組合物，其特征在于，其為水針劑或凍干粉針劑。
5.根據(jù)權利要求4所述的藥物組合物，其特征在于，所述水針劑還包括滅菌用水1000 10000重量份。
6.根據(jù)權利要求4所述的藥物組合物，其特征在于，所述凍干粉針劑還包括10 20重量份的右旋糖酐40。
7.制備權利要求5所述藥物組合物的方法，其特征在于，該方法包括如下步驟將氯化鎂和亞硫酸氫鈉用全量體積20 25%的滅菌用水溶解，攪拌均勻，加入藥用活性炭，攪拌吸附，加入三磷酸腺苷二鈉，攪拌吸附，濾除活性炭，加滅菌用水至全量，過濾除菌。
8.根據(jù)權利要求7所述的方法，其特征在于，所述滅菌用水的溫度不超過20°C。
9.根據(jù)權利要求7所述的方法，其特征在于，所述攪拌吸附的方式是攪拌均勻后靜置每隔5分鐘攪拌一次，攪拌3 4次。
10.制備權利要求6所述藥物組合物的方法，其包括如下步驟 1)將氯化鎂和亞硫酸氫鈉用注射用水溶解，攪拌均勻，加入藥用活性炭，攪拌吸附，加入三磷酸腺苷二鈉，攪拌吸附，濾除活性炭得溶液I; 2)將右旋糖酐用注射用水溶解，加入活性炭于50 60°C攪拌吸附，冷卻至20°C以下得溶液2 ; 3)將將溶液I和溶液2混合，加注射用水至全量，再經(jīng)除菌濾器過濾至儲罐，半成品檢驗合格后，分裝入瓶； 4)將分裝好的半成品置于冷凍干燥機制品室板層，4小時降溫至-40°C，并于-40°C保溫3小時，開啟捕水器制冷開關，于預凍保溫結束后，開啟真空泵，當真空泵讀數(shù)降至20帕以下時，按10°C /h逐漸升高板層溫度至_4°C，保溫3小時，升溫至0°C繼續(xù)保溫I小時，當制品溫度與板層溫度接近時，繼續(xù)升高板層溫度至30°C并保溫2小時，當制品溫度與板層溫度接近時結束凍干。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種含三磷酸腺苷二鈉氯化鎂化合物藥物組合物，本發(fā)明藥物組合物包括以下重量比的成分三磷酸腺苷二鈉50～150、氯化鎂100～300、亞硫酸氫鈉10～30、滅菌用水1000～10000。本發(fā)明藥物組合物的制備方法是將氯化鎂和亞硫酸氫鈉用全量體積20～25％的滅菌用水溶解，攪拌均勻，加入藥用活性炭，攪拌吸附，加入三磷酸腺苷二鈉，攪拌吸附，濾除活性炭，加滅菌用水至全量，過濾除菌。本發(fā)明制備方法簡單，并且可以有效降低有效成分的損失。本發(fā)明藥物組合物穩(wěn)定性高，另外在在缺血性腦血管病后遺癥中的具有較佳的治療效果，具有較高的應用前景。
文檔編號A61K9/19GK102895259SQ201210354969
公開日2013年1月30日 申請日期2012年9月24日 優(yōu)先權日2012年9月24日
發(fā)明者羅誠 申請人:羅誠