專利名稱：去氧氟尿苷注射液的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種新的藥物制劑，特別是涉及一種抗腫瘤藥物去氧氟尿苷的注射用溶液制劑。
背景技術(shù)：
癌癥是對人類生命威脅最大的疾病之一，其死亡率在全世界僅次于心血管疾病占第二位，其中消化道腫瘤發(fā)病率最高。近年來，5-氟尿嘧啶(5-FU)及其衍生物5-氟-2′-去氧尿嘧啶核苷(FUDR)和呋喃氟尿嘧啶(FT-207)等目前已被公認為有效的抗腫瘤藥物。5′-去氧-5-氟尿苷(5′-DFUR)是繼上述化合物之后合成的又一個新的具有很強抗腫瘤活性的氟尿嘧啶衍生物，其抗腫瘤效果明顯比5-FU、FUDR和FT-207好，而毒副作用最小，特別對消化道腫瘤抑制作用最強。去氧氟尿苷的大鼠口服生物利用度平均為63.4±16.9％。人口服生物利用度在48.0～80.0％之間，平均為65.0％。而5-FU口服吸收不規(guī)則，個體間生物利用度差異大；起效快，最高血濃度達峰時間在1小時左右，具有較長的半衰期(T1/2為119min)，24h仍保持較高的血濃度，而5-FU的T1/2僅為10～20min；毒性低，對小鼠口服、靜注、皮下注射的LD50分別為＞5000、＞1000和2000mg/kg；療效好，Bollage W等報道，如將半致死量(LD50)與對肉瘤S180抑制作用達到67％所需劑量之比稱為治療比，其結(jié)果為

以往的氟尿嘧啶系列藥物在服藥后，主要由肝臟的藥物代謝酶或自然分解轉(zhuǎn)換成5-FU，而5′-DFUR是5-FU的前體藥物，在細胞代謝研究中發(fā)現(xiàn)，在體內(nèi)5′-DFUR能被嘧啶核苷磷酸化酶(PyNPase)轉(zhuǎn)化成游離的5-FU而顯示抗腫瘤活性。PyNPase在腫瘤組織中的活性大大高于正常組織和血清，且專一性強，因而5′-DFUR被轉(zhuǎn)化成有活性的5-FU的濃度在腫瘤組織中大大高于正常組織和血清。所以5′-DFUR的抑瘤作用比上述藥物高，毒性小，具有其獨特的優(yōu)點。5’-DFUR對腫瘤細胞有選擇性的抑制作用，特別對乳腺癌、胃癌、直腸癌和結(jié)腸癌等有特別高的作用；5′-DFUR通過PyNPase的作用，能抑制腫瘤惡病體質(zhì)誘導因子，從而改善由于惡病體質(zhì)所致的體重下降、血糖下降、運動能力下降和對化療的反應降低等一系列癥狀，使癌癥病人的生活質(zhì)量得到提高；5′-DFUR與PyNPase一起對惡性腫瘤細胞的擴散有很強的抑制作用，因而能延長癌癥患者的生存壽命。大鼠口服15、35、85mg/kg/天，連續(xù)13周，未顯示明顯的毒性。給大鼠口服連續(xù)5周明顯出現(xiàn)造血系統(tǒng)、淋巴組織及生殖器官毒性的劑量5′-DFUR、FT-207及5-FU分別為400、200和20mg/kg/天。FUDR、FT-207及5-FU在對腫瘤細胞產(chǎn)生抑制作用的劑量時就會引起白細胞減少，而5′-DFUR在不引起白細胞減少的劑量時就產(chǎn)生較強的抑瘤作用。說明5′-DFUR的毒副作用小，尤其對免疫系統(tǒng)抑制輕微，因此本品特別適用于老年病人、免疫功能低下或晚期癌癥病人及用5-FU等抗癌藥不能耐受的病人。
臨床方面國外專家分別做了如下研究注射用去氧氟尿苷4g/m2×5治療頭頸部鱗癌，12例病人1例達CR，2例達PR，有效率25％。注射用去氧氟尿苷4g/m2×5治療晚期大腸癌，42例病人，27例可以評價，有效率達26％。注射用去氧氟尿苷3g/m2×5和口服去氧氟尿苷1.2g/m2×21治療晚期大腸癌，靜脈組有效率為29％，口服組有效率為12％。隨機比較口服和注射去氧氟尿苷加四氫葉酸鈣治療初治晚期大腸癌，口服去氧氟尿苷750mg/m2每12天重復，注射用去氧氟尿苷3g/m2×5每21天重復。結(jié)果口服組有效率為15％，而注射組有效率為41％。口服組中位復發(fā)時間4個月，注射組中位復發(fā)時間為7個月。另外還有專家用注射用去氧氟尿苷持續(xù)靜脈滴注，去氧氟尿苷0.75g/m2 iv 24h×90day。20例晚期大腸癌病人7例達PR，有效率35％，毒性可以耐受。
去氧氟尿苷的含水溶液通常不穩(wěn)定，特別是對光照和熱的環(huán)境下更加不穩(wěn)定。去氧氟尿苷的含水溶液隨時間的推移會降解產(chǎn)生一定的降解物質(zhì)。由于藥物制劑中存在的雜質(zhì)量在許多情況下會影響制劑的毒理學特性，所以，期望開發(fā)穩(wěn)定的去氧氟尿苷溶液制劑，使其產(chǎn)生的雜質(zhì)量明顯降低，有利于提高產(chǎn)品質(zhì)量。
本發(fā)明的目的在于提供一種穩(wěn)定的非凍干型的去氧氟尿苷注射液。
本發(fā)明的目的在于提供一種穩(wěn)定的含有去氧氟尿苷、穩(wěn)定劑和可藥用載體的去氧氟尿苷溶液制劑，及其制備方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種穩(wěn)定的去氧氟尿苷注射液。
本發(fā)明的注射液含有藥物活性成分和適合配制注射液的藥物可接受的載體，載體可以起到助溶、穩(wěn)定、防腐、增容、緩沖等作用。
本發(fā)明的注射液為使本發(fā)明的注射液穩(wěn)定化，本發(fā)明使用了丙二酸和吐溫-80結(jié)合作為本發(fā)明注射液的穩(wěn)定化劑，起到了使去氧氟尿苷注射溶液穩(wěn)定的作用。
本發(fā)明的去氧氟尿苷溶液制劑的pH值通常在4-7的范圍內(nèi)，優(yōu)選為4-5，最優(yōu)選的為4.5。
本發(fā)明的注射液其配方組成如下處方1、(100瓶)去氧氟尿苷500.0g丙二酸2g吐溫-80 5g葡萄糖或氯化鈉適量注射用水加至 25000ml或處方2、(100瓶)去氧氟尿苷250.0g丙二酸2g吐溫-80 5g葡萄糖或氯化鈉適量注射用水 加至 25000ml制備工藝將葡萄糖或氯化鈉、丙二酸、吐溫-80和去氧氟尿苷溶解于適量注射用水(約為處方量的1/10)中，加針用活性炭適量(0.1％)，攪勻，煮沸15分鐘，過濾脫炭，注射用水稀釋至配制量，調(diào)pH值至4.5±0.5，測中間體(含量、pH值)，合格后通過0.45μm微孔濾膜過濾，灌裝(250ml/瓶)，115℃熱壓滅菌30分鐘，即得。
其中，葡萄糖的量可以是1250g，氯化鈉的量可以是225g。
本發(fā)明的配方是經(jīng)過篩選得到的，本發(fā)明采用了不同的配方進行比較篩選，找出了最優(yōu)選的配方即本發(fā)明的配方。以下穩(wěn)定性實驗可以證明本發(fā)明的優(yōu)越性。
穩(wěn)定性實驗按實施例1的方法配制去氧氟尿苷的溶液，只是其中不含丙二酸，也不含吐溫-80，制備工藝同實施例1，我們將使用該法制得產(chǎn)品為“不含穩(wěn)定劑的產(chǎn)品”，見表1。將實施例1和“不含穩(wěn)定劑的產(chǎn)品”的制劑在光照(4000lx)、高溫(60℃)條件下進行穩(wěn)定性比較試驗，分別于5、10天取樣，用HPLC法檢查降解產(chǎn)物，表明本發(fā)明產(chǎn)品的穩(wěn)定性加強。參見表2、表3。
表1 實施例1與“不含穩(wěn)定劑的處方”的組成

表2 實施例1和不含穩(wěn)定劑的產(chǎn)品在60℃條件下實驗結(jié)果

表3 實施例1和不含穩(wěn)定劑的處方在光照試驗(4000Lx)條件下實驗結(jié)果

我們還對實施例1的制劑，進行了刺激、過敏和溶血試驗結(jié)果該制劑對家兔的血管、皮下組織無明顯刺激反應，也不產(chǎn)生溶血和過敏現(xiàn)象，臨床應用比較安全。
將本發(fā)明按實施例1制備產(chǎn)品，產(chǎn)品置于40℃、相對濕度為75％的條件下6個月，結(jié)果產(chǎn)品比較穩(wěn)定。參見表4。
表4 實施例1產(chǎn)品的穩(wěn)定性結(jié)果

為了進一步考察本品的穩(wěn)定性，我們將按處方制得的樣品經(jīng)光照、高溫(40℃、60℃、80℃)考察5天、10天，對溶液的色澤、澄明度、pH值、有關(guān)物質(zhì)及含量進行考核。結(jié)果表明，除80℃高溫條件下降解產(chǎn)物有增加(仍在合格范圍內(nèi))外，其他條件下各項指標均沒有明顯變化，故本品是比較穩(wěn)定的。本處方也是可行的。
經(jīng)過小試樣品的加速試驗、室溫留樣考察24個月及中試樣品的加速試驗、室溫留樣考察24月試驗，結(jié)果表明各項指標均符合規(guī)定。說明本品穩(wěn)定性較好，本發(fā)明還提供本發(fā)明的注射劑的質(zhì)量控制方法，該方法包括，對本發(fā)明的注射劑的性狀、鑒別、檢查、有關(guān)物質(zhì)、重金屬、不溶性微粒、無菌、熱原及含量測定等內(nèi)容進行控制和測定。
具體質(zhì)量控制方法如下(以下所述本品為實施例1方法得到的產(chǎn)品)性狀本品為無色澄明液體。
鑒別(1)取本品適量，加0.1mol/L鹽酸溶液制成每1ml含去氧氟尿苷0.05mg的對照品溶液；另取供試品適量，加0.1mol/L鹽酸溶液制成每1ml含去氧氟尿苷0.05mg的供試品溶液；照有關(guān)物質(zhì)項下色譜條件測定，供試品主峰保留時間應與對照品主峰保留時間一致。
(2)取含量測定項下的溶液，照分光光度法(中國藥典2000年版二部附錄IVA)測定，在269nm的波長處有最大吸收，在234nm的波長處有最小吸收。
(3)取本品1ml，緩緩滴入溫熱的堿性酒石酸銅試液中，即生成氧化亞銅的紅色沉淀。
檢查pH值應為3.5～5.5(中國藥典2000年版二部附錄VI H)。
有關(guān)物質(zhì) 取本品，用0.1mol/L鹽酸溶液制成每1ml含0.50mg的供試品溶液和每1ml含0.005mg的對照溶液。照高效液相色譜法(中國藥典2000年版二部附錄V D)測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水(20∶80)為流動相；流量1ml/min；檢測波長269nm。理論板數(shù)按去氧氟尿苷峰計算應不低于2000。重復進樣，其相對標準差(RSD)應小于1.0％。取對照溶液20μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢查靈敏度，使主成分色譜峰的峰高為滿量程的10～25％；再取供試品溶液20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分保留時間的2.5倍。供試品溶液的色譜圖中如顯雜質(zhì)峰，除溶劑峰外，量取各雜質(zhì)峰面積和不得大于對照溶液的主峰面積的2倍(2.0％)。
重金屬 取本品50ml，蒸發(fā)至約20ml，放冷，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml與水適量使成25ml，依法檢查(中國藥典2000年版二部附錄VIII H第一法)，含重金屬不得過千萬分之三。
不溶性微粒 取本品1瓶，依法檢查(中國藥典2000年版二部附錄IX C)，應符合規(guī)定。
無菌 取本品不少于2瓶，依法檢查(中國藥典2000年版二部附錄XI H)，應符合規(guī)定。
熱原 取本品，依法檢查(中國藥典2000年版二部附錄XI D)，劑量按家兔體重每1kg注射1ml，應符合規(guī)定。
其他 應符合注射劑項下有關(guān)的各項規(guī)定(中國藥典2000年版二部附錄IB)。
含量測定去氧氟尿苷 取本品，精密量取適量，用0.1mol/L鹽酸溶液制成每1ml中約含12μg的溶液，照分光光度法(中國藥典2000年版二部附錄IV A)，在269nm波長處測定吸收度。另取經(jīng)105℃干燥至恒重的去氧氟尿苷對照品適量，精密稱定，用0.1mol/L鹽酸溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中約含12μg的溶液，同法測定，計算，即得。
具體實施例方式以下通過實施例進一步說明本發(fā)明，但不作為對本發(fā)明的限制。
實施例1處方1、(100瓶)去氧氟尿苷500.0g丙二酸2g吐溫-80 5g葡萄糖或氯化鈉適量注射用水加至 25000ml制備工藝將葡萄糖或氯化鈉、丙二酸、吐溫-80和去氧氟尿苷溶解于適量注射用水(約為處方量的1/10)中，加針用活性炭適量(0.1％)，攪勻，煮沸15分鐘，過濾脫炭，注射用水稀釋至配制量，調(diào)pH值至4.5±0.5，測中間體(含量、pH值)，合格后通過0.45μm微孔濾膜過濾，灌裝(250ml/瓶)，115℃熱壓滅菌30分鐘，即得。
實施例2或處方2、(100瓶)去氧氟尿苷250.0g丙二酸2g吐溫-80 5g葡萄糖或氯化鈉適量注射用水 加至 25000ml制備工藝將葡萄糖或氯化鈉、丙二酸、吐溫-80和去氧氟尿苷溶解于適量注射用水(約為處方量的1/10)中，加針用活性炭適量(0.1％)，攪勻，煮沸15分鐘，過濾脫炭，注射用水稀釋至配制量，調(diào)pH值至4.5±0.5，測中間體(含量、pH值)，合格后通過0.45μm微孔濾膜過濾，灌裝(250ml/瓶)，115℃熱壓滅菌30分鐘，即得。
權(quán)利要求
1.一種去氧氟尿苷注射劑，是注射用溶液制劑，其特征在于，含有有效量的去氧氟尿苷，丙二酸和吐溫-80，pH值在4-7的范圍內(nèi)。
2.權(quán)利要求1的注射劑，其特征在于，還含有葡萄糖或氯化鈉。
3.權(quán)利要求2的注射劑，其特征在于，100瓶注射劑含有以下配比的成分去氧氟尿苷250-500g丙二酸1-3g吐溫-80 3-7g葡萄糖或氯化鈉適量注射用水加至 25000ml。
4.權(quán)利要求2的注射劑，其特征在于，100瓶注射劑含有以下配比的成分去氧氟尿苷500.0g丙二酸2g吐溫-80 5g葡萄糖或氯化鈉適量注射用水加至 25000ml。
5.權(quán)利要求2的注射劑，其特征在于，100瓶注射劑含有以下配比的成分去氧氟尿苷250.0g丙二酸2g吐溫-80 5g葡萄糖或氯化鈉適量注射用水加至 25000ml。
6.權(quán)利要求1的注射劑，其特征在于，100瓶注射劑含有以下配比的成分去氧氟尿苷250.0g丙二酸2g吐溫-80 5g注射用水加至 25000ml。
7.權(quán)利要1-6任何一項注射劑的制備方法，其特征在于，經(jīng)過以下步驟將葡萄糖或氯化鈉、丙二酸、吐溫-80和去氧氟尿苷溶解于適量注射用水中，加針用活性炭適量，攪勻，煮沸15分鐘，過濾脫炭，注射用水稀釋至配制量，調(diào)pH值至4.5±0.5，測中間體含量、pH值，合格后通過0.45μm微孔濾膜過濾，灌裝成250ml/瓶，115℃熱壓滅菌30分鐘，即得。
8.權(quán)利要求1-6任何一項注射劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于，經(jīng)過以下步驟對所述注射劑進行性狀、鑒別、檢查、有關(guān)物質(zhì)、重金屬、不溶性微粒、無菌、熱原及含量進行測定。
9.權(quán)利要求9的質(zhì)量控制方法，其特征在于，經(jīng)過以下步驟性狀本品為無色澄明液體；鑒別(1)取本品適量，加0.1mol/L鹽酸溶液制成每1ml含去氧氟尿苷0.05mg的對照品溶液；另取供試品適量，加0.1mol/L鹽酸溶液制成每1ml含去氧氟尿苷0.05mg的供試品溶液；照有關(guān)物質(zhì)項下色譜條件測定，供試品主峰保留時間應與對照品主峰保留時間一致；(2)取含量測定項下的溶液，照分光光度法測定，在269nm的波長處有最大吸收，在234nm的波長處有最小吸收；(3)取本品1ml，緩緩滴入溫熱的堿性酒石酸銅試液中，即生成氧化亞銅的紅色沉淀；檢查pH值應為3.5～5.5；有關(guān)物質(zhì)取本品，用0.1mol/L鹽酸溶液制成每1ml含0.50mg的供試品溶液和每1ml含0.005mg的對照溶液。照高效液相色譜法測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以20∶80的甲醇∶水為流動相；流量1ml/min；檢測波長269nm；理論板數(shù)按去氧氟尿苷峰計算應不低于2000；重復進樣，其相對標準差應小于1.0％。取對照溶液20μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢查靈敏度，使主成分色譜峰的峰高為滿量程的10～25％；再取供試品溶液20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分保留時間的2.5倍；供試品溶液的色譜圖中如顯雜質(zhì)峰，除溶劑峰外，量取各雜質(zhì)峰面積和不得大于對照溶液的主峰面積的2倍；重金屬取本品50ml，蒸發(fā)至約20ml，放冷，加醋酸鹽緩沖液2ml與水適量使成25ml，依法檢查，含重金屬不得過千萬分之三；不溶性微粒 取本品1瓶，依法檢查，應符合規(guī)定；無菌 取本品不少于2瓶，依法檢查，應符合規(guī)定；熱原 取本品，依法檢查，劑量按家兔體重每1kg注射1ml，應符合規(guī)定；其他 應符合注射劑項下有關(guān)的各項規(guī)定；含量測定去氧氟尿苷 取本品，精密量取適量，用0.1mol/L鹽酸溶液制成每1ml中約含12μg的溶液，照分光光度法，在269nm波長處測定吸收度；另取經(jīng)105℃干燥至恒重的去氧氟尿苷對照品適量，精密稱定，用0.1mol/L鹽酸溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中約含12μg的溶液，同法測定，計算，即得。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種去氧氟尿苷注射劑，是注射用溶液制劑，其特征在于，含有有效量的去氧氟尿苷，丙二酸和吐溫－80，pH值在4－7的范圍內(nèi)。
文檔編號A61K31/7042GK1712016SQ200510080060
公開日2005年12月28日 申請日期2005年6月28日 優(yōu)先權(quán)日2005年6月28日
發(fā)明者董澤賢 申請人:董澤賢