專利名稱：3，5-雙取代-2-異唑烷和異唑、其制備方法，含有該成分的制劑及其應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及新的3，5-雙取代-2-異噁唑烷和異噁唑及新的藥劑，其特別適于預防和/或治療人和動物的病理性神經變性癥。
從German offenlegungsschrift3，736，113(HOE 87/F 316)中可知含磷3，5-雙取代-2-異噁唑烷和異噁唑。氨甲基羥異噁唑及其類似物收載于J.Med.Chem.27(1984)，585-591和J.Med.Chem.28(1985)，668-679。
大量的神經病理情況的特點為變性和神經元缺失，這特別適用于神經變性綜合癥。如中風、暫時性大腦局部缺血(TIA)，部分可逆性大腦梗塞(PRIND)，大腦性麻痹、大腦性低血糖、心搏停止或心肺區(qū)外科手術時的局部缺血、缺氧狀態(tài)(如溺水后)、中毒或脊索損傷、產期窒息、老年性神經變性、早老性癡呆(SDAT)、疼痛、生長激素及黃體化激素分泌過剩、精神分裂癥、癲癇、遺傳性慢性舞蹈病及其它慢性神經變性癥。
進一步了解到在哺乳類大腦中有許多興奮性突觸受體，其可被天然存在的L-谷氨酰胺和L-天冬氨酸激活，這些氨基酸被高親和性轉運系統(tǒng)吸收進突觸前小泡，以便完成一次神經元刺激。該轉運機制為Na+-依賴性。L-谷氨酰胺和L-天冬氨酸吸收和進突觸前小泡特別需要依賴ATP，以保持細胞內Na+濃度(Erecinska，Biochem.，Pharmacol36(1987)，3547-3555)。在缺氧或局部缺血情況下，突觸間隙中興奮性氨基酸的聚集，引起連續(xù)的神經沖動，導致病理性病變，最終導致不可逆的神經元變性。據文獻報道，可直接減少吸收于突觸小泡中氨基酸釋放或間接地幫助反轉運的制劑，以及受體激活拮抗劑均具有神經保護作用(Gell et al.，Neuroscience，25(1988)847-855;Jaruis et al.，Synapse，2(1988)577-584;Kaneko et al.，Arzneimittel-Forschung，39(1989)1614-1619;Weiss et al.，Brain Res.，380(1986)186-190)。
其它氨基酸，如N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)，紅藻氨酸和使君子酸也被認為是中低神經系統(tǒng)中有力的興奮性神經遞質，它們可用于谷氨酸受體亞型的特征鑒定，這些位于所謂的谷氨酸性神經元的興奮性受體可分為兩組NMDA受體和非-NMDA受體，根據目前的認識，NMDA受體參與了局部缺血(如中風)后的神經變性(Rothman et al，TINS，10(1987)299-302)
本發(fā)明基于找到新的、有力的“谷氨酸拮抗劑”，其可減少缺氧和/或局部缺血導致的細胞變性，且無副作用。
然而，由于具有大腦保護作用的NMDA受體拮抗劑的副作用(如運動失調、精神病反應，及其它局部毒副作用)，其在臨床應用上并未成功。(Handelmann，et al.，Eur.J.Pharmacol.，140(1987)69-73;Morris et al.，Nature，319(1986)774-776)。目前，市場上尚未有進行過臨床試驗，且具有良好耐受性并對神經變性癥有作用的已知物質。因此急需新的、耐受性好、具有大腦保持作用的物質，其適用預防和/或治療上述疾病，特別是中風。
令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，在2-異噁唑烷和異噁唑的3-或5-位引進某些基團(尤其是從烷基羧酸衍生者)，并在5-或3-位引進任意取代的堿性基團，所得到化合物的生化和藥理特性滿足上述要求，因此適于預防和/或愈后治療大腦神經性病變所伴隨的病癥。該類化合物與文獻中的已知化合物〔如氨甲基羥異噁唑〔5-(氨甲基)-3(2H)-異噁唑酮〕，MK-801〔(+)-5-甲基-10，11-二氨-5H-二苯并〔a，d〕環(huán)庚-5-烯〔0-亞胺〕和CCP〔3-(+)-2-羧基哌嗪-4-基-丙基-1-磷酸〕〕。(Lust et al.，Metabolic Brain Disease，3(1988)287-292，Rod et al.，Can.J.Neurol.Sci.，16(1989)340-344，Meldrum et al.，“Pharmacology of Cerebral Ischaemia”Ed.J.Krieglstein，CRC Press，1989，157-163)進行比較，具有很好的耐受性，并在生化“體外”及病理動物模型實驗中具有很強的作用，這些實驗可由下例實例說明大鼠腦突觸小泡制劑高親和性地吸收3H一天冬氨酸的促進從大鼠紋狀體部位釋放3H-乙酰膽堿的抑制3H-MK801結合于大鼠腦膜的抑制，NMDA-誘導的小鼠痛性痙攣的抑制，蒙古沙土鼠頸動脈兩側閉合后的神經保護作用，以及光化學誘導的大鼠病灶缺血后梗塞體積的減少。
本發(fā)明涉及式Ⅰa，Ⅰb或Ⅰc的新的3，5-雙取代-2-異噁唑烷和異噁唑。
其中R1為2-，3-或4-吡啶基或式Ⅱ中的基團
其中R3和R4為氫或C1-C4-烷基;
R5為自由電子對或氫;
R6和R7為氫;C1-C6-烷基;C3-C6-環(huán)烷基;
C6-C12-芳基-C1-C4-烷基;胍?；?，C1-C6-烷基羰基，C1-C4-烯基羰基，C1-C6-烷氧羰基，C6-C12-芳基-C1-C4-烷基羰基，C6-C10-芳基-C1-C4-烷氧基羰基，C6-C10-芳基羰基，或天然存在的a-氨基酸或c-氨基丁酸(Caba)的殘基，其可被C1-C6-烷基，羥基，鹵素，氨基或硝基取代;或R6和R7由氮原子相連，形成五-七元雜環(huán)，其中碳原子可被硫、氧或氮原子取代;或R5，R6和R7為C1-C4-烷基或C3-C6-環(huán)烷基，或R5為C1-C4-烷基，R6和R7由氮原子相連，形成五-七元雜環(huán)，或R5，R6和R7均與氮原子相連，形成一個六-十二元雙環(huán)雜環(huán);
R2為式Ⅲ的基團其中n為0或1-4的整數，X為羥基;C1-C4-烷氧基;羧基;鹵代甲?；?
甲酰基;氧亞氨基;C1-C12-烷氧羰基;芐氧基羰基或C3-C6-環(huán)烷氧羰基，其可被C1-C6-烷基單取代或多取代;或是由肽鍵連于天然a-氨基酸，c-氨基丁酸或二肽的羰基;或是氨基羰基，其中氨基可被C1-C6-烷基單一或雙取代，或被苯基-C1-C6-烷基單取代，或是由氮原子連接的兩個氨基殘基，其可形成五-七元雜環(huán)，其中碳原子可被氧或氮原子取代。
或X為式Ⅳ的基團
其中，Y和Z為羥基，C1-C4-烷基或C1-C4-烷氧基;
A為C，C-單或C，C-雙鍵，條件為，如果R2為式Ⅳ的基團則R1不是2-，3-或4-吡啶基，如果X為羥基或甲氧基，則n≠0。本發(fā)明還涉及其立體異構形式及其生理耐受性鹽類。
如未個別指出，烷基為直鏈或支鏈，同樣適于由其衍生的基團。如烷氧基，烷羰基、烷氧羰基、或芳烷基。
C6-C12-芳基優(yōu)選苯基、萘基或聯(lián)苯基，特別是苯基。由其衍生的基團亦可組合，如芳基羰基，或芳烷基。
鹵素為氟、氯、溴或碘，優(yōu)選氯。
本發(fā)明中的五-七元雜環(huán)為，例如吡咯，吡啶、氮雜
、噻唑、異噻唑、噁唑、異噁唑、吡唑、咪唑、噻嗪、1，2-噁嗪、1，3-噁嗪、嗎啉、噠嗪、嘧啶、吡嗪、1，2-硫氮雜
、1，3-硫氮雜
、1，4-硫氮雜
、1，2-氧氮雜
、1，3-氧氮雜
、1，4-氧氮雜
、1，2-二氮雜
、1，3-二氮雜
、1，4-二氮雜
、及其部分或全部飽和變化物。吡咯烷、哌啶、嗎啉、哌嗪或吡啶為特別優(yōu)選。
天然存在的a-氨基酸，如丙氨酸、精氨酸、半胱氨酸、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸、纈氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酸和谷氨酰胺收載于，例如Ann.Rev.Biochem.38(1969)137-158及FEBS Letters 64(1976)29-35。本發(fā)明中的二肽包括天然存在的a-氨基酸及c-氨基丁酸結構單元。
式Ⅰa和Ⅰb的優(yōu)選化合物為其中R1為2-，3-或4-吡啶基或為式Ⅱ的基團
其中R3和R4分別為氫或C1-C4烷基R5為自由電子對或氫原子R6及R7為;氫;C1-C4-烷基;或苯基-C1-C2-烷基R6和R7由氮原子相連，形成五-七元雜環(huán)，其中碳原子可被硫、氧或氮原子取代。
R6為氫，R7為胍酰;C1-C6-烷基羰基，C1-C4-烯基羰基，C1-C6-烷氧羰基，苯基-C1-C4-烷羰基，芐氧羰基，芐氧基，或天然存在a-氨基酸或c-氨基丁酸的殘基，其可被C1-C4-烷基，羥基，鹵素，氨基或硝基取代。R5，R6和R7為C1-C4-烷基或C3-C6-環(huán)烷基，R2為式Ⅲ的基團，
其中n為0或1-3的整數，X為羥基;C1-C4-烷氧基，羧基;C1-C4-烷氧羰基;芐氧羰基或C3-C6-環(huán)烷氧羰基，其可被C1-C6-烷基單取代或多取代;或為通過肽鍵與天然存在的a-氨基酸，c-氨基丁酸或二肽相連的羰基;或為氨基羰基，其中氨基可被C1-C4-烷基單一或雙取代，或被苯基-C1-C4-烷基單取代，或者兩個氨基由氮原子相連，形成五-七元雜環(huán)，其中碳原子可被氧或氮原子取代。
或X為式Ⅳ的基團。
其中Y和Z為羥基，C1-C4-烷基或C1-C4-烷氧基;
A為C，C-單鍵或C，C-雙鍵，條件為，若R2為式Ⅳ的基團，則R1不是2-，3-或4-吡啶基。
特別值得提出的式Ⅰa的化合物，其中R1為2-吡啶基或式Ⅱ的基團
其中R3和R4為氫或C1-C4-烷基。
R5為自由電子對或氫;
R6和R7為氫;C1-C4-烷基;或苯基-C1-C2-烷基;
R6和R7，由氮原子相連，形成五-七元飽和雜環(huán)，其中碳原子可被硫、氧或氮原子取代，R6為氫、R7為胍酰，C1-C6-烷羰基或天然存在的a-氨基酸或c-氨基丁酸殘基;
R5，R6和R7為C1-C4-烷基;
R2為式Ⅲ的基團其中n為0，1或2;
X為羥基;C1-C4-烷氧基;羧基;鹵代甲?；?C1-C4-烷氧羰基;芐氧羰基或C3-C6-環(huán)烷氧羰基，其可被C1-C6-烷基單一或多取代;或是通過肽鍵與天然存在的a-氨基酸或c-氨基丁酸相連的羰基;或為氨基羰基，其中氨基可被C1-C4-烷基單-或雙取代，或是兩個氨基由氮原子相連，形成五-七元雜環(huán)，其中碳原子可被氧或氮原子取代;
或X為式Ⅳ的基團
其中Y和Z為羥基，C1-C4-烷基或C1-C4-烷氧基;
A為C，C-單鍵或C，C-雙鍵，條件為，若R為式Ⅳ的基團，則R1不是2-吡啶基，若X為OH且n＝0，則A不是C，C雙鍵;
式Ⅰa的化合物，其中R1為2-吡啶基或式Ⅱ的基團
其中R3和R4為氫或C1-C4-烷基;
R5為自由電子對或氫R6和R7為氫;C1-C4-烷基;或芐基;
R6和R7，由氮原子相連形成五-六元飽和雜環(huán)，其中C原子可被硫、氧或氮原子取代;
R6為氫，R7為胍?；?C1-C6-烷羰基，或天然存在的α-氨基酸殘基;
R5，R6和R7為C1-C4-烷基;
R2為式Ⅲ的基團其中n為0，1或2;
X為羥基;羧基，C1-C4-烷氧羰基;
芐氧羰基;環(huán)己氧羰基，其可被C-C-烷基單一或多取代;通過肽鍵與天然存在的a-氨基酸相連的羰基;或氨基羰基，其中兩個氨基均與氮原子相連，形成五-六元雜環(huán)，其中碳原子可被氧或氮原子取代;
或式Ⅳ的基團
其中Y為羥基或C1-C4-烷氧基Z為C1-C4-烷基;
A為C，C-單鍵或C，C-雙鍵;
條件為若R2為式Ⅳ的基團，則R1不是2-吡啶基，若X為OH且n＝0，則A不是C，C-雙鍵。
式Ⅰb的化合物中，特別值得一提的化合物為其中R1為式Ⅱ的基團
其中R3和R4為氫;
R5為自由電子對或氫;
R6和R7為氫;C1-C4-烷基;或苯基-C1-C2-烷基;
R6和R7，與氮原子相連，形成五-六元飽和雜環(huán)，其中碳原子可被硫、氧、或氮原子取代。
R6為氫，R7為C1-C4-?；?C1-C6-烷基羰基，芐氧基或天然存在的a-氨基酸或c-氨基-丁酸的殘基;
R5，R6和R7為C1-C4-烷基或C3-C6-環(huán)烷基;R2為式Ⅲ的基團其中n為0，1或2;
X為羧基;鹵代甲酰基;C1-C4-烷氧羰基;芐氧羰基或C3-C6-環(huán)烷羰基，其可被C1-C6-烷基單-或多取代;或為通過肽鍵與天然存在的a-氨基酸或C-氨基丁酸相連的羰基;或為氨基羰基，其中氨基可被C1-C4-烷基單-或雙取代，或兩個氨基，與氮原子相連，形成一個五-七元雜環(huán)，其中碳原子可被氧或氮原子取代;
A為C，C-單鍵或C，C-雙鍵，及式Ⅰb的化合物其中R1為式Ⅱ的基團
其中R3和R4為氫;
R5為自由電子對;
R6和R7為氫或C1-C4-烷基;
R6和R7，均與氮原子相連，形成五-六元飽和雜環(huán)，其中碳原子可被硫、氧或氮原子取代;
R6為氫，R7為C1-C6-烷羰基;
R5，R6和R7為C1-C4-烷基;
R2為式Ⅲ的基團其中n為2X為羧基，C1-C4-烷氧羰基;芐氧羰基;
環(huán)己羰基，(其可被C1-C6-烷基單一或多取代);或<p>R6和R7，由氮原子相連，形成五-七元飽和雜環(huán)，其中碳原子可被硫、氧或氮原子取代，R6為氫、R7為胍酰，C1-C6-烷羰基或天然存在的a-氨基酸或c-氨基丁酸殘基;
R5，R6和R7為C1-C4-烷基;
R2為式Ⅲ的基團其中n為0，1或2;
X為羥基;C1-C4-烷氧基;羧基;鹵代甲?；?C1-C4-烷氧羰基;芐氧羰基或C3-C6-環(huán)烷氧羰基，其可被C1-C6-烷基單一或多取代;或是通過肽鍵與天然存在的a-氨基酸或c-氨基丁酸相連的羰基;或為氨基羰基，其中氨基可被C1-C4-烷基單-或雙取代，或是兩個氨基由氮原子相連，形成五-七元雜環(huán)，其中碳原子可被氧或氮原子取代;
或X為式Ⅳ的基團
3-羥基亞氨甲基-異噁唑-5-丙酸甲酯，3，5-二羧基-2-異噁唑烷，5-羥甲基-異噁唑-3-丙酸鈉鹽。
本發(fā)明還涉及式Ⅰa、Ⅰb和Ⅰc的化合物，其可能的立體異構形式，以及適宜的立體異構鹽的制備方法，其包括將Ⅴ的氧化腈
a)當式Ⅰa中的A為C，C-單鍵時，與式Ⅵ的烯烴反應進行1，3-環(huán)加成
b)當式Ⅰa中的A為C，C-雙鍵時，與式Ⅶ的炔丙基衍生物反應，進行1，3-二極環(huán)加成
其中，R2，R3和R4同前述定義，W為NR5R6R7基，(其中R5，R6和R7同前定義)，或者為可被任意取代的NR5R6R7胺，取代基為烷基磺酰基或芳基磺?；螓u素，這里優(yōu)選氯或溴。
或c)將根據a)或b)所制備的化合物(式Ⅷ)(其中
R2，R3，R4和A同前述定義)進行轉化，用任意取代的式NR5R6R7的胺取代W基團，使其成為式Ⅰa的化合物，或d)為制備式Ⅰb或Ⅰc的物質、將式Ⅸ、Ⅹ，Ⅻ或ⅩⅢ的烯酸或炔酸衍生物
(其中R10為氫、烷基、醇官能團或羧酯官能團的任意所需的保護基，n同前述定義，R3為任何所需的烷基或芳烷基)與式Ⅺ的氧化腈反應
(其中R2同前述定義，條件為R2不是α-氨基酸或二肽)，進行1，3-二極環(huán)加成，隨后按文獻方法除去保護基R10，將醇官能團轉變?yōu)槟軌蚺c胺、鹵素或甲苯磺酸鹽進行反應的活化的衍生物，再與式NR5R6R7的胺進行胺交換，其中R5-R7同前定義，或e)將a)-d)制備的式Ⅰa或Ⅰb的羧酸酯水解成為羧酸，或氫解除去芐酯，f)用適宜的取代的伯胺或仲胺將a)-d)中制備的烷基羧酸酯轉變成酰胺，或g)將a)或b)中制備的式Ⅰa的單烷基次膦酸酯或二烷基膦酸酯按文獻方法進行水解，成為膦酸單酯，膦酸或次膦酸，或
h)將根據e)所得到的羧酸轉化成活化的酸衍生物，隨后用醇將該衍生物酯化，再將酯與伯及仲胺反應生成酰胺，或與任意的羧基保護的氨基酸或低級肽反應，成為氮上酰化的肽，隨后，如果需要，除去肽基團上的羧基保護基，通過酯基轉移使其轉化成其它基團，或i)按文獻方法將方法a)-h)中得到的式Ⅰa的化合物中的氮原子上用做保護基的基團R7除去，j)將方法i)中制備的羧基為酯化或酰胺形式的化合物與活化的羧酸衍生物或如適宜，與氮上保護的氨基酸或低級肽反應，并使用肽化學上常用的試劑以轉化成氮上?；难苌?，或，k)將方法j)中制制備的化合物通過羧酸酯的解離，轉化成游離羧酸，l)將方法j)或k)中制備的化合物解離除去隨氨基酸基團引入的N-保護基，使其轉化成游離氨基化合物或甜菜堿化合物，或m)將方法c)-i)中制備的式Ⅰa或Ⅰb的化合物與烷基化試劑，優(yōu)選鹵代烷進行反應，轉化成季銨化合物，n)將方法a)-m)制備的式Ⅰa和Ⅰb的化合物(其化學結構為非對映異構體或對映體)按已知方法拆分成單一的立體異構體，o)將方法a)-n)所制備的式Ⅰa和Ⅰb化合物以其游離形式分離出，或在酸性或堿性基團存在下轉化成藥用鹽。
該藥用鹽的制備是按已知方法由可生成鹽的式Ⅰa和Ⅰb的化合物，包括其立體異構形式進行的。因此，羧酸、膦酸、次膦酸及膦酸單脂與堿性試劑生成堿金屬鹽、堿土金屬鹽、或是取代的銨鹽、堿性試劑包括如，氫氧化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽、醇化物、及氨，或有機堿，如，三甲基胺或三乙基胺、乙醇胺、或是堿性氨基酸如賴氨酸、鳥氨酸或精氨酸，將膦酸中兩個酸性OH基中的一個OH轉變可得到穩(wěn)定的膦酸氫鹽，如果式Ⅰa和Ⅰb的化合物R基團中有堿性基團，則可與強酸反應生成穩(wěn)定、無毒的酸加成鹽，適用于此的酸包括無機和有機酸，如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、苯磺酸、對-甲苯磺酸、4-溴苯磺酸、環(huán)己酰胺-磺酸，三氟甲磺酸、乙酸、草酸、酒石酸，或三氟醋酸。
方法m)中氨基化合物全烷基化所得到的季銨鹽的適宜的抗衡離子優(yōu)選烷基化試劑的陰離子，如烷基磺酸鹽或芳基磺酸鹽，及溴化物和碘化物，也可通過適宜的離子交換，用其它藥用陰離子取代這些離子。
用于1，3-兩極環(huán)加成的反應物氧化腈的制備和反應記載于文章(K.P.G.TorsellNitrile Oxides，Nitrones and Nitronates in Organic Synthesis，VCⅡ Verlagsgesellschaft，Weinheim，1988)中，用做前體的異羥肟酰鹵按文獻方法由適宜的醛肟類的鹵化，或由氯代肟乙酸酯(其通過最初甘氨酸烷基酯的重氮化反應所得)進行制備(G.S.Skinner J.Am.Chem.Soc.46(1942)，731 et Seq)，用三乙基胺使氯乙二肟脫去鹵化氫得到甲酰氧亞胺腈氧化物(A.P.Kozikowski，J.Org.Chem.48(1983)，366)，需用的硝基化合物從文獻可知或可按文獻中方法制備，例如，4-硝基丁酸酯可通過硝基甲烷的氟化物-或堿催化加成使成為丙烯酸衍生物進行制備(S.Kanbeet al.，Scient.Pap.Instit.phys.Chem.Res.(Jap)58(1964)，118-121;D.W.Chasar，Synthesis1982，841-42;N.Ono，Synthesis1984，226-227)。
用1，8-二氮二雜環(huán)(5，4，0)十一碳-7-烯(DBU)做堿進行一個特殊的反應，即將丙烯酸酯在60-100℃，優(yōu)選70-90℃溫度范圍內加到含有催化量的DBU的5到50倍過量的硝基甲烷中，收率比文獻記載有提高，并在最大程度上防止產生通常存在的難于分離的付產品雙加合物，根據該變化，硝基甲烷向乙烯膦酸酯的加成可提高約30%的收率
(T.A.Mastryukova，Izv.Akad.Nauk.SSSR，Ser.Khim.，6(1971)，1353-1354)并且適用于相應的烷基乙烯次膦酸酯，該方法目前尚未見于文獻中。丙烯酰氯與適宜的取代醇反應，使用酸凈化劑，如三乙基胺，高級的環(huán)形的且為手性醇的酯也可使用，這在文獻中無報道，其適用的無外消旋情況，并且優(yōu)先使用于下列合成步驟中。用做主要反應組分的式Ⅵ和Ⅶ的取代的烯丙基-和炔丙基胺衍生物通?？梢娪谖墨I或可市售。對于伯或仲胺、在環(huán)加成之前可引入文獻中可知的保護基團，優(yōu)選?；蚰蛲楸Ｗo基，如乙?；⒈郊柞；?，叔丁氧羰基，叔丁基，或芐氧羰基，若需要，則可按文獻方法在環(huán)加成后除去保護基。引入保護基的方法優(yōu)選肽化學中的方法，如通過適宜的胺與二叔丁基二碳酸酯在脂肪醚中反應可引入N-叔丁氧羰基，所用的胺為，如三乙基胺。氧化腈的制備中容易發(fā)生低聚，優(yōu)選不經中間分離，而在反應組分化合物Ⅵ或Ⅶ存在下就地進行，根據Mukaiyama法從硝基化合物進行制備時，優(yōu)選芳香異氰酸酯，如異氰酸苯酯，或優(yōu)選1，4-亞苯基二異氰酸酯，或甲苯-2，4-二異氰酸酯用于脫水，在該例中，建議使用非質子傳遞性溶劑或是對反應組分惰性的分散劑，例如，乙酸乙酯、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二烷基醚、四氫呋喃、鹵代烴、如二氯甲烷、氯仿或二氯乙烷，烴類，如、己烷、環(huán)己烷、苯、甲苯或其它取代的芳香族化合物，以及上述溶劑的混合物，有機堿或無機堿，如叔胺類、堿金屬的碳酸鹽、或氫氧化物用于從異羥肟酰鹵制備氧化腈。在該情況下，反應使用有機堿時，優(yōu)選在前述的氯化脂肪或芳香烴，或脂肪的或環(huán)化的醚中進行，而使用無機堿時，反應優(yōu)選在兩相溶劑混合物，如乙酸乙酯/水，或二氯甲烷/水中進行，氧化腈的制備及環(huán)加成的反應溫度通常在-20℃～+80℃，但優(yōu)選0℃-+40℃。
環(huán)加成中的反應組分優(yōu)選等摩爾量，但對易于低聚的氧化腈，用于凈化的烯烴用量也可達十多倍，從異羥肟酰鹵釋放氧化腈所用的堿也可等摩爾量或七倍過量，為了以低的恒定濃度制備氧化腈，用堿或異氰酸酯在較長時間內使其連續(xù)釋放，時間優(yōu)選2-24小時，并可通過往含有試劑的溶液中緩慢滴加一種反應組分，使反應進行。
加在式Ⅰa的R1取代基上的?；蚰蛲榈谋Ｗo基可按肽化學的方法除去，如在叔丁氧羰基的酸解離中，優(yōu)選用醇性鹽酸或三氟乙酸酸而芐氧羰基保護基可通過氫解或堿水解除去。除去質子分解保護基所用的酸優(yōu)選大大過量，當使用三氟醋酸時，使用純酸做溶劑或是與鹵代烴(如三氯甲烷)的混合使用可加速反應，當使用氫鹵酸時，使用其醇溶液，優(yōu)選其甲醇或乙醇溶液，保護基的酸性消除在約0-+80℃，更優(yōu)選約20-40℃溫度范圍內進行。適用于芐氧羰基保護基氫解消除的溶劑為文獻中的已知溶劑，如低級醇、或冰醋酸，優(yōu)選甲醇，優(yōu)選多相催化劑如鈀-碳做催化劑。氫化反應在常壓下或是氫過壓的高壓釜中進行，溫度約0-+80℃，優(yōu)選室溫。加于式Ⅰa的R2基上的酯基可通過酸或堿除去，芐基酯也可被氫解除去，對于取代的環(huán)酯如(+)-和(-)-
酯，三氟醋酸、及三氟甲磺酸與苯硫基甲烷的混合物被證實特別適用(見H.Yajima et al.，Chem.Pharm.Bull.34(1986)，4356-4361)。對于所用的叔丁基酯，上述的消除N-叔丁氧羰基保護基的條件同樣適用，即當使用適宜的結構單元時，雜環(huán)上兩個取代基的保護基可同時除去。1所用的烷基酯使用等摩爾到五倍過量的堿金屬氫氧化物在水溶液或水-醇溶液中進行堿水解，對于3-烷氧羰基異噁唑烷和-異噁唑，等摩爾量的堿金屬氫氧化物和0-+20℃的溫度足以除去活化酯基，而通過一或多個亞甲基連接于雜環(huán)上的酯基則需要更劇烈的條件，即更高的溫度和/或更過量的堿金屬氫氧化物，為除去常用做醇保護基的叔丁基或四氫吡喃基，優(yōu)選用酸，如三氟乙酸或醇性鹽酸優(yōu)選鹽酸的甲醇溶液。使用過量的酸、或對于三氟醋酸、用純酸做溶劑可加快反應速度。約0～+80℃，優(yōu)選約20-40℃的溫度范圍適于該反應。從膦酸酯和次膦酸酯轉變成相應游離酸的反應優(yōu)選在酸性條件下，優(yōu)選在無水溶媒中進行。因此，使用含有2-到100-倍過量的氫溴酸的有機酸(如0.5-4當量，優(yōu)選2-4當量的乙酸)和約+20-+50℃的溫度，可用于溫和解離。為了從膦酸二酯制備膦酸半酯，從次膦酸酯制備次膦酸，適宜的酯通常優(yōu)選在水溶媒中進行堿水解。于此，與水相容的低級醇優(yōu)選用于溶解二酯，隨后加1-到5-當量的堿水溶液，如氫氧化鈉，可用化學計量或達10倍過量的堿，優(yōu)選2-4倍過量的堿，溫度范圍約為0-+50℃，優(yōu)選約20-40℃。
通過氧化腈的酯基和胺的尿烷或?；Ｗo基的結合，可制備式Ⅰa和Ⅰb的雜環(huán)，其酸性及堿性官能團可按上述的堿性、酸性或氫解法同時或分別釋放出。為取代式Ⅷ的W取代基，這里主要是鹵原子，反應優(yōu)選用仲胺以約2-50倍過量進行。適宜的溶劑為上述的進行環(huán)加成的溶劑，當胺以液體形式存在時，其也可做溶劑。反應溫度從0℃到所用溶劑的沸點，優(yōu)選0℃-+50℃。當使用揮發(fā)的或氣體胺時，反應優(yōu)選在過壓下于高壓釜中進行。當使用R基團中含有一級酯(如甲酯或乙酯)的式Ⅷ的化合物時，用適當過量的胺，如需要，提高反應溫度，可使酯官能團同時轉化為相應的酰胺官能團。
R2含有游離羧酸官能團的式Ⅰa化合物，其羧基活化后，可由伯胺和仲胺使其轉化成相應的酰胺，同時還可用羧基保護的氨基酸或低級肽做反應組分。優(yōu)選肽化學中已知的方法用于活化如，羥基苯并三吡唑/二環(huán)己基碳化二亞胺法(W.Konig，R.Geiger，Chem.Ber.103(1970)，788-798和2034-2040;Z.Naturforsch.216(1966)426)，丙烷膦酸酐(PPA)活化(Angew.Chem.Int.Ed.19(1980)133)或通過甲乙基膦酸酐(MEPA)法(US專利4，426，325)，除脂肪醚及環(huán)醚外還可使用氯代烴，甲酰胺和二甲基甲酰胺做溶劑，優(yōu)選叔胺，如，三乙基胺，N-乙基嗎啉或吡啶用做輔助堿，反應在約-10℃到+50℃，優(yōu)選0℃到+20℃溫度范圍內進行。R基上有游離氨基、而R基上優(yōu)選保護的羧基的式Ⅰa化合物可被N上保護的氨基酸低級肽及其它可?；聂人嵫苌镛D化成酰胺或肽。顯然，當使用肽化學中已知的適當選擇的保護基技術，所需的氨基酸可縮合于化合物Ⅰa的R1和R2側鏈。
如果需要肽或其它?；苌餅橛坞x氨基酸或羧酸官能團形式，其相應的保護基可按前述方法單獨或同時除去。例如，使用強酸，如鹽酸或氫溴酸的脂肪一級醇溶液，可除去N-尿烷保護基，同時R2上的酯基(如烷基酯，叔丁酯或芐酯)可進行酯交換，成為所用醇的相應的酯。
為合成式Ⅰa的化合物，可按Mukaiyama法的Ⅰa的1，3-二極環(huán)加成原理，由戊烯酸或戊炔酸衍生物及氧上保護的硝基乙醇進行。按前述方法除去氧保護基后，與亞硫酰氯或磷酰氯反應，使其羥基官能團轉化成活化衍生物，得到3-氯甲基-異噁唑或-異噁唑烷。用于該反應的試劑為等摩爾或優(yōu)選5倍過量，適宜的溶劑為鹵代烴或優(yōu)選脂肪醚，如乙醚或四氫呋喃，反應溫度約為0到+60℃，優(yōu)選20到40℃。
活化的衍生物隨后與氨或適當取代的胺反應，生成取代的3-氨甲基衍生物，該反應優(yōu)選用含2-100倍過量胺的低級醇(如甲醇或乙醇)在0℃到溶劑沸點范圍內進行，當使用烷基酯取代的雜環(huán)時，為避免同時形成酰胺，需要約0-+20℃溫度并加入催化劑量的碘化四丁銨。如果需要5-位取代基為游離羧酸官能團，其酯基可按前述的或文獻中已知方法水解。如果羧基取代基上需進一步反應，則需用前述的N-保護基進行伯或仲胺基保護。選擇適宜的保護基，Ⅰa的R1和R2基的變形可用于式Ⅰb的化合物。
為轉化成季銨衍生物，R1上帶有伯，仲或叔胺基的式Ⅰa或Ⅰb的化合物與過量的烷基化試劑，如烷基鹵，甲磺酸酯或甲苯磺酸酯，(優(yōu)選烷基碘)和堿(如堿金屬碳酸鹽或氫氧化物)在偶極非質子傳遞溶劑(如，丙酮，二甲亞砜或二甲基甲酰胺)或是低級醇的混合物(如甲醇或乙醇與水混合)中在0℃到+50℃進行反應，優(yōu)選烷基碘時，所制備的碘化四丁銨可直接用做藥用。
如果式Ⅰa和Ⅰb的化合物以非對映異構體或對映體形式存在，且以其混合物形式制備，將其拆分為單一立體異構體可如下進行，在手性擔體上層析，或者，如果式Ⅰa和Ⅰb的外消旋化合物可形成鹽，則通過與輔助性的光學的活性堿式酸成鹽，可使非對映形式的鹽分步結晶析出，而對于式Ⅰa的手性醇的肽或酯，單一對映體形式的氨基酸或醇基的手性可用于拆分非對映異構體。以外消旋體得到的5-位上有不對稱碳原子的2-異噁唑烷的對映體進行薄層或柱層析拆分所需的適當的手性固定相為，例如，改性硅膠載體(即Pirkle相)和高分子量碳水化合物，如，三乙酰纖維素，為進行分析，還可在適當衍生后在手性固定相上做氣相層析，為使外消旋的羧酸，膦酸和次膦酸的對映體拆分，其與光學活性的堿，(通常為市售的堿)形成了具有不同溶解性的非對映鹽，這些堿為(-)-煙堿，(+)-和(-)-苯乙胺，奎寧堿，L-賴氨酸，或L-和D-精氨酸，較不溶性成分以固體分離，較易溶的非對映體從母液中沉淀出，單純的對映體鹽則按常法從所獲得的非對映鹽中得到，按相同的方法，使用光學活性的酸，如，(+)-樟腦-10-磺酸，羥基取代的D-和L-酒石酸，D-和L-乳酸及(+)-和(-)-扁桃酸，可使式Ⅰa和Ⅰb的外消旋氨基化合物轉化成單一對映體，為此所用的氨基化合物的手性酯常有助于通過分步結晶而使非對映體分離。
本發(fā)明的藥劑作為活性化合物，含有式Ⅰa，Ⅰb或Ⅰc的化合物，
其中
R1為2-，3-或4-吡啶基或式Ⅱ的基團
其中R3和R4為氫或C1-C4-烷基R5為自由電子對或氫R6和R7為氫;C1-C6-烷基;C3-C6-環(huán)烷基;C6-C12-芳基-C1-C4-烷基;胍?；?C1-C6-烷羰基，C1-C4-烯基羰基，C1-C6-烷氧羰基，C6-C12-芳基-C1-C4-烷羰基，C-C-芳基-C-C-烷氧羰基，或是天然a-氨基酸或c-氨基丁酸(Gaba)的基團，其可被C1-C6-烷基，羥基，鹵素，氨基或硝基取代，或R6和R7均與氮原子相連形成一個五-七元雜環(huán)，其中碳原子可被硫、氧或氮原子取代;或R5，R6和R7為C1-C4-烷基或C3-C6-環(huán)烷基，或R6和R7均與氮原子相連，形成六-十二元雜環(huán)，R2為式Ⅲ的基團其中n為0或1-4的整數X為羥基;C1-C4-烷氧基;羧基;鹵代甲?；?，甲?；?氧亞胺基;C1-C12-烷氧羰基;芐氧羰基或C3-C6-環(huán)烷氧羰基，其可被C1-C6-烷基單取代或多取代，或是通過肽鍵與天然a-氨基酸，c-氨基丁酸或二肽相連的羰基，或是氨基羰基，其中氨基可被C1-C6-烷基單一或雙取代，或被苯基-C1-C6-烷基單取代，或是兩個氨基基團均與氮原子相連，形成五-七元雜環(huán)且其中碳原子可被氧或氮原子取代。
或X為式Ⅳ的基團
其中Y和Z為羥基，C1-C4-烷基或C1-C4-烷氧基;
A為C，C-單鍵或C，C-雙鍵如果適合對映異構單體和/或藥用鹽，其本身或是以微膠囊形式，相互混合，或優(yōu)選與適當的藥劑賦形劑，稀釋劑和/或其它助劑混合所形成的藥物可以胃腸外給藥，直腸或口服給藥，適宜的固體或液體劑型為，例如，顆粒劑，粉劑，包衣片，片劑，(微)膠囊，栓劑，糖漿，酏劑，懸浮劑，乳劑，滴劑或注射液，及長期釋放活性物質的制劑，制劑中所用的輔劑包括賦形劑，崩解劑，粘合劑，包衣劑，溶脹劑，助滑劑或潤滑劑，增香劑，甜味劑或助溶劑。常用的輔劑為，如碳酸錳，二氧化碳，乳糖，甘露糖醇及其它糖，滑石，乳蛋白，明膠，淀粉，纖維素及其衍生物，動物及植物油，如鱈魚肝油，葵花籽油，花生油或芝麻油，聚乙二醇及溶劑，如，無菌水，生理鹽水及一元醇或多元醇，如甘油。為制備式Ⅰa和Ⅰb的強酸，羧酸，膦酸和次膦酸的水溶液制劑，將活性化合物配制成具有生理可耐受PH的鹽的制劑。
藥劑優(yōu)選以劑量單位制備和給藥，每個劑量單位含有式Ⅰa和Ⅰb至少一個化合物的具體的劑量，如果可能則以立體異構單體和/或鹽的形式做活性成分。固體劑量單位，如片劑、膠囊、包衣片或栓劑，劑量可達約1，000mg，優(yōu)選約50-300mg，安瓿注射液劑量達約300mg，但優(yōu)選約10-100mg。為治療約70kg體重的成年患者，根據式Ⅰa和Ⅰb化合物的活性，口服給藥每日劑量約50-3，000mg活性化合物，優(yōu)選150-1，000mg，靜脈給藥每日劑量約50-1，000mg，優(yōu)選約100-300mg，而在某些情況下，較高或較低的每日劑量也適宜。每日劑量可以單劑量形式一次給藥也可以幾個小劑量單位給藥，也可在特定的時間間隔內以分開的劑量重復給藥。最后，式Ⅰa和Ⅰb的化合物，其立體異構型和/或如需要，其藥用鹽也可與其它適宜的活性化合物結合，如循環(huán)促進物質、血小板聚集抑制劑，血小板聚集抑制劑和鈣拮抗劑，制備前述的藥劑。
實施例下列實施例在不限定其范圍條件下描述本發(fā)明。
下述的化合物的結構由元素分析，IR，1H-NMR和13C-NMR譜確定，如下所示的NMR譜的d值由ppm和偶合常數J以HZ表示，下述的制備實施例的結構式列于表1中。
實施例13-羧基-5-氨甲基異噁唑a)N-叔丁氧羰基炔丙胺將24g(0.44mol)的炔丙胺和44.5g(0.44mol)的三乙胺加到350ml乙醚中，在冰浴冷卻下，將含有96g(0.44mol)的二叔丁基重碳酸鹽的150ml乙醚滴加進混合物，隨后在室溫下攪拌2小時，隨后用飽和氯化銨溶液洗滌，直到PH為6，隨后用水洗滌，干燥并濃縮后，產品于冷凍室從石油醚中結晶出。
產量62g，熔點41℃。
b)用乙氧羰基腈氧化物進行環(huán)加成按文獻方法(G.S.Skinner，J.Am.Chem Soc.46(1924)，731)由甘氨酸乙酯鹽酸鹽制備氯代肟基乙酸乙酯。將14.55g(0.096mol)該產品溶解于100ml四氫呋喃中，并將其在室溫下5小時內滴加到含有17.07g(0.11mol)a)中制備的保護的炔丙胺和11.14g(0.11mol)三乙胺的400ml乙醚的溶液中。混合物攪拌過夜，用稀氯化銨溶液和水洗，真空干燥并濃縮。產量25g，產品5-叔丁氧碳酰氨甲基異噁唑-3-羧酸乙酯可用乙酸乙酯/石油醚結晶進一步純化，熔點為72℃。
c)羧酸酯的水解將9.75g(0.036mol)b)中制備的產品溶于80ml乙醇，加75ml的N/N NaOH，混合物室溫攪拌，TLC檢查，直到水解完全，真空除去乙醇，混合物用稀鹽酸酸化到PH2-3，用二氯甲烷或乙酸乙酯提取數次，用少量水洗，干燥并濃縮，用乙醚/石油醚結晶，產量7.18g，分析純產品，熔點120-121℃。
d)除去叔丁氧羰基保護基將6.9g)c)中制備的產品溶于125ml二氯甲烷中，冰浴冷卻下加約25ml三氟醋酸，隨后將混合物于室溫攪拌，TLC檢查至反應完全，真空濃縮，過量的三氟醋酸用二氯甲烷做共沸劑經數次除去，剩余的固體殘余物用乙醚攪拌完全，得到7.16g分析純的5-氨甲基-3-羧基異噁唑的三氟醋酸鹽。為轉化為其甜菜堿，將鹽溶于水中，用稀氨水調到PH7，緩慢加丙酮，將甜菜堿沉淀出，熔點153℃。
1H-NMR(三氟醋酸化物的DMSO-d6)δ＝4.5(S，2H，CH2-N)，7.1(S，1H，4-H)，9.4(vb，5酸性H)
實施例25-芐氨甲基-3-羧基異噁唑按實例1a)中的方法，用二叔丁基重碳酸保護N-芐基炔丙胺，按實例1b)-1d)的方法，用乙氧羰基腈氧化物進行環(huán)加成，酯基水解，除去N-保護基，從三氟醋酸化物中沉淀出甜菜堿化合物，所得分析純產品熔點為128℃。
1H-NMR(甜菜堿化合物物的D20/NaOD)δ＝3.6和3.7(2S，2H，各為，2CH2)，6.3(S，1H，4-H)，7.0-7.3(m，s芳基-H)實例35-吡咯烷甲基-3-吡咯烷羰基-2-異噁唑烷鹽酸鹽a)用烯丙基溴環(huán)加成將48.39g(0.4mol)烯丙基溴和45.47g0.3mol)氯代肟基乙酸乙酯加到700ml乙醚中，并在6小時內滴加含35.44g(0.35mol)三乙胺的200ml醚溶液，混合物攪拌過夜，濾除沉淀的鹽，濾液用稀氯化銨溶液和水洗，直到呈中性，干燥濃縮后，得到65g的5-溴甲基-3-乙氧基羰基-2-異噁唑烷，并可用乙醚/石油醚重結晶。熔點54℃b)吡咯烷的取代反應將11.8g(0.05mol)的a)中的產品溶于200ml乙醇和82ml吡咯烷中，混合物回流加熱2.5小時。真空濃縮后，殘余物溶于2N鹽酸，溶液用乙醚洗，使水相成中性，用二氯甲烷提取數次，有機相干燥、濃縮、最后通過加鹽酸乙醇溶液使所需的產品從乙醚中沉淀出，得到10.7g熔點為207℃的分析純的鹽酸化物。
1H-NMR(鹽酸化物的CDcl3)δ＝1.8-2.4(m，8H，4CH2)，2.8-4.0(m，12H，4-H和4CH2-N)，5.3-5.9(mc，1H，5-H)實例45-氨甲基異噁唑-3-乙酸a)3-羥肟基丙酸乙酯用甲酸乙酯和乙酸乙酯為起始物，用文獻方法(美國專利，3，499，278)進行合成。
b)用叔丁氧羰基炔丙胺進行環(huán)加成將6.6g(0.05mmol)a)中制備的產品溶于100ml二氯甲烷并冷至0℃，并在30分鐘內滴加含有6g(0.055mol)叔丁基次氯酸鹽的20ml二氯甲烷，除去冰浴后，將混合物攪拌1小時，加含有7.8g(0.05mol)N-叔丁氧羰基炔丙胺的50ml二氯甲烷，隨后在6小時內滴加含8.3ml(0.06mol)三乙胺的100ml二氯甲烷，混合物攪拌過夜，反應液用水，稀檸檬酸和水洗，干燥并濃縮，所得到的14.2g油狀物可經硅膠層析進一步純化，叔丁甲醚和石油醚(1∶1)做流動相。
c)乙醇的水解和N-保護基的除去這兩步反應按類似于實例1c)到1d)的方法進行，油狀的該產品的三氟硎酸化物溶于丙酮，用氨醇溶液調PH5-6，用空吸法濾除沉淀的甜菜堿化合物，真空干燥，用8g步驟b)的產物，得到3.5g熔點為216℃的分析純的甜菜堿化合物。1H-NMR(甜菜堿化合物的D2O)δ＝3.6(S，2H，CH2)，4.3(S，2H，CH2-N)，6.5(S，1H，4-H)為進行實例5-11的環(huán)加成，根據變化了的Mukaiyama方法(J.Am.Chem.Soc.82(1960)，5339-5342)，用異氰酸酯使硝基丁酸結構單元脫水，從丙烯酸衍生物和硝基甲烷起始進行的反應通過下列實例描述了市場上沒有的具有代表性的硝基丁酸芐酯的制備途徑，使用適當的取代的乙烯膦酸和乙烯次膦酸酯，該方法也適用于4-硝基丙基次膦酸和-膦酸衍生物。
在冰浴冷卻下，將286g(2.65mol)的芐醇和366ml(2.65mol)的三乙胺加到31的叔丁甲醚中，滴加240g(2.65mol)丙烯酰氯，混合物于室溫下攪拌2小時，有機相用水洗數次，真空干燥并濃縮，定量制備的丙烯酸芐酯在70℃溫浴下滴加到2.51硝基甲烷和10ml1，8-二氮二雜環(huán)-(5，4，0)十一碳-7-烯(DBU)的溶液中，PH的下降歸因于不斷加入適量的DBU而產生的微量的丙烯酸。待放熱反應完成(溫度升到90℃)，混合物冷卻60分鐘，用稀鹽酸水溶液和水洗數次，真空干燥，濃縮，得到464g紅棕色油狀物，其可不經純化用于環(huán)加成。
下列需用的硝基化合物可按同樣方法制備4-硝基丁酸甲酯和乙酯4-硝基丁酸叔丁酯(+)-和(-)-4-硝基丁酸
酯順-(3，3，5)-三甲基環(huán)己基4-硝基丁酸酯3-硝基丙基膦酸二甲酯和二乙酯(起始物為乙烯膦酸酯)3-硝基丙基-P-甲基次膦酸乙酯(起始物為乙烯-P-甲基次膦酸乙酯)實例55-氨甲基異噁唑-3-丙酸芐酯鹽酸鹽a)環(huán)加成于70℃將78g(0.5mol)的N-叔丁氧羰基炔丙胺與2.5ml三乙胺和96g(0.6mol)苯二異氰酸酯加到21甲苯中，往上述的112g(0.5mol)的4-硝基丁酸芐酯中，在5小時內，滴加2.5ml的三乙胺?；旌衔锸覝財嚢柽^夜，空吸濾除沉淀的尿素，并用二氯甲烷洗，濃縮后，得到200g油狀粗產后，其可經硅膠層析進一步純化(洗脫相石油醚。叔丁甲醚混合物)。
b)除去N-保護基a)中制備的產品25g(0.064mol)在室溫下用含75ml三氟醋酸的375ml的二氯甲烷溶液處理，直到不再生成氣體(約1小時)。濃縮后得到的三氟醋酸化物用甲醇溶解，加鹽酸醚溶液以沉淀出鹽酸化物，其可經甲醇/叔丁甲醚重結晶，轉化為分析純的產物，產量15g;熔點172℃。
1H-NMR(鹽酸化物的DMSO-d6)δ＝2.8-3.0(m，4H，2CH2)，4.2(S，2H，CH2-N)，5.1(S，2H，CH2-O)，6.6(S，1H，4-H)，7.25-7.45(m，5芳基-H)列于表2a中的式Ⅰa的實例6-11，其中A為，-C，C雙鍵，按類似于實例5的方法，將適當取代的硝基化合物與N-叔丁氧羰基炔丙胺環(huán)加成并除去N-保護基，進行合成。
實例125-氨甲基異噁唑-3-丙酸按實例5方法，由4-硝基丁酸叔丁酯和N-叔丁氧羰基炔丙胺進行環(huán)加成，所得的粗產品同實例5b)用含過量三氟醋酸的二氯甲烷處理，同時除去酯和尿烷保護基，濃縮所得的殘余物用丙酮溶解，用活性碳處理并過濾，用濃氨水調到PH6。24小時后，空吸濾除結晶出的甜菜堿化合物。用丙酮洗并干燥，如需要可用水/丙酮重結晶。
熔點218℃(分解)1H-NMR(甜菜堿化合物的1NNaOD)δ＝2.5和2.9(各為t，2H，J＝7.5，-CH2-CH2-)，3.9(S，2H，CH2-N)，6.3(S，1H，4-H)。
實例135-(1-氨基-1-甲基乙基)異噁唑-3-丙酸按實例1a)用叔丁氧羰基保護基得到的3，3-二甲基炔丙胺，按實例5a)與4-硝基丁酸叔丁酯進行環(huán)加成，同實例12，除去保護基將三氟醛酸化物轉化為甜菜堿化物，得到熔點為219℃的分析純產品。
1H-NMR(甜菜堿化物的D2O)δ＝1.7(S，6H，2CH3)，2.5和2.9(各為t，2H，J＝7.5，-CH2-CH2-)，6.4(S，1H，4-H)。
實施例145-芐氨甲基異噁唑-3-丙酸同實例2，用BOC保護基得到的N-芐基-N-叔丁氧羰基炔丙胺與4-硝基丁酸叔丁酯進行實例5a)的反應，隨后如實例12除去保護基，產品以甜菜堿化物沉淀出，熔點153℃。1H-NMR(甜菜堿化物的MeOH-d4)δ＝2.7和3.0(各為t，2H，J＝7.5，-CH2-CH2-)，3.85和3.93(各為S，2H，2CH2-N)，6.2(S，1H，4-H)，7.2-7.4(m，5芳基-H)。
實例155-二甲氨甲基異噁唑-3-丙酸如實例5a)所述，由N，N-二甲基炔丙胺和4-硝基丁酸叔丁酯進行環(huán)加成，如實例12方法除去叔丁酯基，得到的粗產品經硅膠層析純化(流動相叔丁甲醚/甲醇混合物并加入1%氨水)，用三氟醋酸調到PH6.5，從丙酮中沉淀出甜菜堿化物。熔點85℃1H-NMR(甜菜堿化物的DMSO-d6)δ＝2.2(S，6H，2N-Me)，2.6和2.76(各為mc，2H，-CH2-CH2-)，3.6(S，2H，CH2-N)，6.3(S，1H，4-H)。
實例162-(5-氨甲基異噁唑-3-基)乙基-2-(P-甲基)次膦酸鹽酸鹽實例10中的產品5g(0.019mol)在室溫下用含有33%HBr的冰醋酸強溶液處理70小時，真空濃縮后，殘余物用丙酮攪拌完全，并用丙酮/水重結晶，得到3g氫溴酸鹽;熔點198℃。
1H-NMR(氫溴酸鹽的DMSO-d6)δ＝1.3(d，J＝14.3H，P-Me)，1.95和2.85(各為mc，2H，-CH2-CH2-)，4.3(S，2H，CH2-N)，6.6(S，1H，4-H)，8.55(4酸性H)。
實例175-乙酰氨基甲基異噁唑-3-丙酸在猛烈攪拌下，將7g(0.0413mol)的實例12的產物分散于含70ml乙酐的140ml吡啶中，反應物緩慢形成溶液，反應完成后(TLC檢查)，混合物經真空濃縮，產物用丙酮結晶，產量5.5g，熔點134℃。
1H-NMR(在DMSO-d6中);δ＝1.9(S，3H，Ac)，2.8-3.05(m，4H，-CH2-CH2-)，4.3(d，J＝6，2H，CH2-N)，6.3(S，1H，4-H)，8.5(t，J＝6，1H，NH)。
實例18(-)5-三甲氨甲基異噁唑-3-丙酸
酯碘化物將9.6g(0.02mol)實例8的產物和16.6g(0.12mol)的碳酸鉀加到250ml丙酮中，滴加6.25ml(0.1mol)甲基碘后，混合物于室溫下攪拌3天。濾除沉淀的鹽，濾液濃縮，殘余物用水結晶，產量6.5g，熔點131℃(分解)。
〔α〕20D＝-40.0°(c＝1乙醇)1H-NMR(碘化物，于MeOH-d4中)δ＝0.7(d，j＝7，3H，Me)，0.85-2.05(m，15H，2Me，3CH2，3CH)，2.77和3.05(各為mc，2H，-CH2-CH2-)，3.2(S，9H，NMe3+)，4.7(mc，1H，CHO)，4.9(S，2H，CH2-N)，6.85(S，1H，4-H)實例19(+)5-三甲基氨甲基異噁唑-3-丙酸
酯碘化物按實例18所述方法，將實例7的產物與甲基碘化反應，產品用水結晶，熔點130℃。
〔α〕20D＝+39.9°(c＝1乙醇)1H-NMR同實例18實例20(+)5-(L-苯基丙氨酰氨基)甲基-異噁唑-3-丙酸
酯鹽酸鹽a)肽偶聯(lián)將12.8g(0.042mol)實例7中的堿形式產品加到200ml四氫呋喃中，加11.05g(0.042mol)的N-叔丁氧羰基-L-苯丙氨酸和26.7ml(0.21mol)的N-乙基嗎啉后，在0℃滴加26.9ml(＝0.042mol)50%的丙烷膦酸酐的二氯甲烷溶液，混合物攪拌4小時，同時溫至室溫，用乙酸乙酯稀釋有機相用檸檬酸和水洗，干燥并濃縮，產品用叔丁甲醚/石油醚結晶。
產量17.5g，熔點122℃b)除去保護基按實例5b)方法，除去N-保護基，剩余的殘余物溶于乙酸乙酯，用1N的氫氧化鈉溶液振搖，使轉化為堿，并可用石油醚結晶。
利用鹽酸醚溶液，使分析醇的鹽酸化物從甲醇中沉淀出，熔點為148℃。
〔α〕20D＝+15.9°(c＝1水中)1H-NMR(鹽酸化物于MeOH-d4中)δ＝0.7(d，3H，J＝7，Me)，0.75-2.0(m，15H，2Me，3CH2，3CH)，2.7 and 2.95(eachmc，2H，-CH2-CH2-)，3.0-3.3(mc，2H，Ph-CH2)，4.1(mc，1H，CHN)，4.35-4.8(mc，3H，CHO and CH2-N)，6.1(s，1H，4-H)，7.2-7.45(m，5 aryl-H).
實例21(-)5-(L-苯基丙氨酰氨基)甲基-異噁唑-3-丙酸
酯鹽酸鹽將實例8的產物按實例20的方法進行肽偶聯(lián)和保護基消除，沉淀的鹽酸化物產品熔點為135℃。
〔α〕20D＝-43.5°(c＝1，于水中)1H-NMR同實例20實例225-(L-苯基丙氨酰氨甲基)甲基異噁唑-3-丙酸甲酯鹽酸鹽由實例11的產物，按實例20的方法進行肽偶聯(lián)和保護基的斷裂，沉淀出的鹽酸化物產品熔點為133℃。
〔α〕20D＝+3.6°(c＝1于水中)1H-NMR(鹽酸化物于MeOH-d4中)δ＝2.65 and 2.9(eachmc，2H，-CH2-CH2-)，3.1(mc，2H，Ph-CH2)，3.63(s，3H，OMe)，4.03(t，J＝7.5，1H，CHN)，4.3-4.55(AB，J＝16，2H，CH2-N)，6.0(s，1H，4-H)，7.1-7.4(m，5aryl-H).
實例235-胍基甲基異噁唑-3-丙酸將6.8g(0.04mol)的實例12的產品溶于40ml1N的NaOH溶液，加5.56g固體的S-甲基異硫脲·硫酸氫酯(＝0.04mol尿素)。混合物于室溫下攪拌24小時，其間產物緩慢結晶出?？瘴鼮V出，并用水洗，產量2.8g，熔點＞297℃。
1H-NMR(甜菜堿化物于TFA-d1中)，δ＝2.95和3.22(各為mc，2H，-CH2-CH2-)，4.7(S，2H，CH2-N)，6.5(S，1H，4-H)。
實例24N-(S-氨甲基異噁唑-3-基)丙酰甘氨酸a)選擇性酯斷裂將100g實例5a)的環(huán)加合物(粗產品)溶于500ml異丙醇和500ml11的NaOH溶液以便水解芐酯。反應完成后(TLC檢查)，水溶液用叔丁甲醚提取兩次，冰浴冷卻下用鹽酸水溶液酸化，用乙酸乙酯提取水相數次干燥并濃縮后用叔丁甲醚結晶，產量32g，熔點80℃。
b)肽偶聯(lián)將11.6g(0.043mol)a)中的產物與7.1g(0.043mol)的甘氨酸芐基酯和27.23mol(0.215mol)的N-乙基嗎啉溶解于210ml四氫呋喃和210mlN，N-二甲基甲酰胺中，并在冰浴冷卻下，將27.23ml(＝0.043mol)的50%丙烷膦酸酐的二氯甲烷溶液滴加其中，混合物于室溫攪拌5小時，同時用TLC檢查，用乙酸乙酯稀釋，用檸檬酸和水洗，干燥濃縮后，得到17g油狀產物。
c)酯基水解將12gb)中的產物溶于390ml異丙醇，加150ml的1N氫氧化鈉溶液，反應完全后，混合物在冰浴冷卻下用鹽酸酸化，產品用乙酸乙酯提取數次，有機相干燥并濃縮，得到5.9g油狀物。
d)除去N-叔丁氧羰基保護基。
將5g c)中的產品溶于15ml三氟醋酸和75ml二氯甲烷的混合物中，反應1小時后，溶液經真空濃縮，殘余物溶于丙酮，所得溶液用濃氨水調到PH6.5，空吸濾出甜菜堿化物，并干燥，產量2.5g，熔點204℃。
實例255-氨甲基-3-(2-羥乙基)異噁唑鹽酸鹽a)環(huán)加成同實例5a)方法由38.8g(0.25mol)N-叔丁氧羰基炔丙胺和39.56g(0.25mol)的3-硝基丙基叔丁基醚進行環(huán)加成(參考R ohrlein et al.，Synthesis 1986，535-538)。分離出油狀產物5-叔丁氧碳酰氨甲基-3-(2-羥基)乙基異噁唑，產量為61.6g。
b)除去保護基按實例5b)的方法用三氟醋酸除去N-和O-保護基，并將溶液濃縮、為進行純化，粗產品的甲醇溶液加到含有強酸性陽離子交換劑(H+型)的柱中用甲醇洗柱子，隨后用4N氨的甲醇溶液洗脫產物，將產物餾分濃縮，隨后用鹽酸的醚溶液使分析純的鹽酸化物從甲醇中沉淀出，其熔點為163℃。
1H-NMR(鹽酸化物于D2O中)δ＝2.85和3.8(各為t，2H，J＝6，-CH2-CH2-)，4.3(S，2H，CH2-N)，6.5(S，1H，4-H)。
實例26雙(3-〔2-羧基乙基〕異噁唑-5-基甲基)胺二胺鹽a)環(huán)加成按實例1a)的方法，用N-叔丁氧羰基保護基得到二炔丙基胺，按實例5a)的方法，用60g(0.36mol)的苯二異氰酸酯使30g(0.16mol)的該二炔丙基胺與60g(0.32mol)4-硝基丁酸叔丁酯進行1，3-二極環(huán)加成，所得到的100g粗產品硅膠柱層析純化，用叔丁甲基醚/石油醚混合物洗脫。
b)除去保護基按實例5b)的方法用三氟醋酸除去BOC保護基和叔丁醚，濃縮后的殘余物用丙酮溶解，加入濃氨水使析出銨鹽，產量15g;熔點146℃(30g前體)1H-NMR(銨鹽，于DMSO-d6)δ＝2.36和2.74(各為t，2H，J＝6.5，-CH-CH-)，3.8(S，2H，CH2-N)，5.4(b，NH4+)，6.2(S，1H，4-H)。
實例27(+)5-氨甲基-2-異噁唑烷-3-丙酸
酯甲苯-4-磺酸鹽c)環(huán)加成按實例1a)的方法，用N-叔丁氧羰基保護基得到烯丙基胺，分離出固體產品，濃縮后熔點為38℃。41.1g(0.26mol)的該產品按實例5a)的方法與72g(0.26mol)的(+)4-硝基丁酸
酯和50.1g(0.3mol)的二氰酸亞苯酯進行環(huán)加成，得到95g油狀粗產品，其可按實例26a)的方法進一步純化。
b)除去BOC保護基按實例5b)的方法，除去保護基，產品以堿的形式通過用叔丁甲醚提取，從稀氫氧化鈉溶液中分離出，加1當量的甲苯-4-磺酸使產品以甲苯磺酸鹽的形式從叔丁甲醚中沉淀出，根據GC分析，兩個C-5差向異構體的混合物的比為1∶1，熔點144-145℃。
1H-NMR(甲苯磺酸鹽于DMSO-d6中)δ＝0.7(d，J＝6.8，3H，Me)，0.8-1.95(m，15H，2Me，3CH2，3CH)，2.3(s，Tos-OH)，2.55-3.3(m，8H，-CH2-CH2-，CH2-N，4-H)，4.5-4.8(m，2H，5-H and CHO)，7.1 and 7.66(AA′BB′，Tos-OH)，8.0(acidic H).
實例28(-)5-氨甲基-2-異噁唑烷-3-丙酸
酯甲苯-4-磺酸鹽按實例27的方法，由(-)4-硝基丁酸
酯起始進行制備，產品以甲苯磺酸鹽的形式沉淀出，熔點142-144℃，并以差向異構體混合物存在，1H-NMR同實例27實例295-氨甲基-2-異噁唑烷-3-丙酸外消旋體按實例12方法，由4-硝基丁酸叔丁酯和N-叔丁氧羰基烯丙胺起始制備外消旋產品，除去其保護基后，用丙酮溶取，利用濃氨水調到PH6以析出沉淀的甜菜堿化合物，熔點為201℃(分解)1H-NMR(甜菜堿化合物于D2O中)δ＝2.48和2.65(各為mc，2H，-CH2-CH2-)，2.85-3.45(m，4H，4-H和CH2-N)，4.8(vb，酸性H)，4.9(mc，1H，5-H)。
實例305-氨甲基-2-異噁唑烷-3-丙酸，(-)對映體a)對映體拆分80g(0.26mol)從實例27產品釋出的堿溶于21的甲基乙基酮，并加93g(0.26mol)的(-)-O，O′-二苯甲?；?L-酒石酸，緩慢析出結晶，空吸濾出，結晶用相同溶劑重結晶，得到30g熔點為162℃的鹽，根據GC分析，其對映體純度＞98%。
b)除去
酯20g(0.03mol)實例a)的產品通過加叔丁甲醚振搖，從1N的氫氧化鈉中提取，而轉化為堿形式，濃縮后的殘余物于0℃溶取于270ml三氟醋酸中，加3.5ml苯硫基甲烷和26.5ml三氟甲基磺酸，混合物于冰浴中攪拌1小時，隨后緩慢加約300ml的乙醚，結晶后，空吸濾出殘余物，溶于乙醇中，用濃氨水調到PH6.0，由此分離出的甜菜堿化合物用水/乙醇重結晶，得到2.5g熔點為176℃(分解)的甜菜堿化合物，經GC分析其對映體純度＞99%。
〔α〕20D＝-123.5。(c＝1，水中)1H-NMR(甜菜堿化合物于D2O中)，同外消旋體。
實例315-氨甲基-2-異噁唑烷-3-丙酸，(+)-對映體a)對映體拆分實例30a)分步結晶所剩余的母液，如前述轉化為游離堿形式，將其66g(0.21mol)溶于乙醇，加31.5g(0.21mol)D(-)-酒石酸后，沉淀出酒石酸鹽，并用乙醇重結晶，得到30g、熔點為163℃的鹽，根據GC分析，其對映體純度＞98%。
b)除去
酯按實例30b)方法，釋出游離堿后進行
酯的斷裂，重結晶后，從20g酒石酸鹽中得到2.9g的熔點183℃(分解)的甜菜堿化合物，據GC分析，其對映體純度＞99%。
〔α〕20D＝+121°(c＝1，水中)實例325-乙酰氨基甲基-2-異噁唑烷-3-羧酸鈉按實例17的方法，將2.5g(0.015mol)實例29的外消旋體乙?；玫?.8g無定形產品，將其溶于丙酮，加入相當量的10%的2-乙基己酸鈉的丙酮溶液，可沉淀出分析純的鈉鹽，熔點為238℃。
1H-NMR(Na salt in D2O)δ＝1.94(s，3H，Ac)，2.37 and 2.54(each mc，2H，-CH2-CH2-)，2.75 and 3.1(AB of ABX，2H，4-H)，3.3(d，J＝5，2H，CH2-N)，4.7(mc，1H，5-H).
實例333-(2-羧乙基)-5-(2-吡啶基)-2-異噁唑烷按實例5a)，59g(0.38mol)的4-硝基丙酸叔丁酯與80g(0.76mol)的2-乙烯吡啶和69.5g(0.42mol)苯二異氰酸酯進行環(huán)加成，反應后的殘余物溶于二氯甲烷，溶液用硅藻土充填的短柱過濾，得到77g油狀物，按實例12方法，除去其酯基，經硅膠層析進一步純化，用甲醇/叔丁甲醚混合物加1%氨水洗脫，產品餾分濃縮后，用三氟醋酸將其丙酮溶液酸化到PH4，得到甜菜堿化合物的結晶產品，熔點為93℃。
1H-NMR(甜菜堿化合物，于DMSO-d6中)δ＝2.5(mc，4H，-CH2-CH2-)，3.2和3.4(ABX的AB，2H，4-H)，5.5(mc，1H，5-H)，7.2-7.5，7.8和8.55(各為m，5吡啶-H)。
實例343-氨甲基-2-異噁唑烷-5-丙酸甲酯甲苯-4-磺酸鹽a)環(huán)加成為制備烯烴成分，按文獻中的已知方法，將4-戊烯羧酸用亞硫酰氯和甲醇酯化，按實例5a)的方法用2-硝基乙基2-四氫吡喃基醚進行環(huán)加成(見V.Jager et al.，Angew.Chem.93(1981)，576-578)，粗產品可不經進一步純化繼續(xù)反應。
b)除去四氫吡喃保護基將a)中的產品200g用500ml的1N鹽酸甲醇溶液于室溫下處理過夜，濃縮后，混合物用石油醚/叔丁甲醚洗脫進行硅膠層析，
c)3-氯甲基-2-異噁唑烷-5-丙酸甲酯將7.4ml(0.081mol)的磷酰氯和33.8ml(0.243mol)的三乙胺加于200ml四氫呋喃中，于室溫下滴加溶有5g(0.027mol)b)中產品的50ml四氫呋喃，20小時后，混合物用甲醇隨后用水進行水解，產品用二氯甲烷提取，經干燥，濃縮后，殘余物按b)的方法層析純化。
d)用NH3取代2g c)中的產物與100mg的碘化四丁銨溶于50ml的2N氨的甲醇溶液，混合物置于室溫下3-5天，同時用TLC檢查，反應完成后，混合物經濃縮，和硅膠層析(洗脫相∶甲醇/叔丁甲醚并加1%氨水)，利用4-甲苯磺酸從甲醇/叔丁甲醚中得到甲苯磺酸鹽結晶，熔點為168℃。
1H-NMR(甲苯磺酸鹽于CDcl3/MeOH-d41∶1中)δ＝1.9和2.4(各為m，2H，-CH2-CH2-)，2.33(S，甲苯磺酸-OH)，2.7和3.13(ABX的AB，2H，4-H)，3.62(S，3H，COOme)，3.85(vb，2H，CH2-N)，4.7(mc，1H，4-H)7.2和7.7(AA′BB′，甲苯磺酸-OH)。
實例35-54列下表2b的實例35-54按上述方法進行合成，并分別列于表中，并用波譜數據表示其特性。
實例595-羥甲基-異噁唑-3-丙酸鈉鹽a)炔丙醇-叔丁醚將101ml(1.9mol)炔丙醇，于0℃，溶于裝有1l二氯甲烷的壓力瓶中，加20ml濃硫酸和450g(8mol)異丁烯，5小時后，于0℃，除去過量的丁烯，用碳酸鈉溶液洗，干燥、濃縮，最后蒸餾得到產品。
b)用硝基丁酸苯酯進行環(huán)加成將33.7g(0.3mol)a)中所得產品，按實例5，用66.9g(0.3mol)的硝基丁酸芐酯，0.35mol的苯二氰酸酯和三乙胺處理，粗產品經硅膠層析純化，洗脫相∶乙酸乙酯/石油醚1∶1。
c)除去叔丁醚保護基將100gb)中所得的粗產品溶于1.5l二氯甲烷和30ml三氟醋酸中，反應經TLC檢查完成。粗產品濃縮后經硅膠層析(洗脫相∶乙酸乙酯/石油醚1∶1)，得到油狀產物。
d)苯甲酸酯的水解將2g(0.0077mol)c)中制備的產品溶于10ml甲醇中，并加10ml1N的NaOH，攪拌，直到反應完成(TLC-檢查)，產品通過加丙酮沉淀并用甲醇/叔丁甲醚重結晶數次。
熔點168℃1H-NMR(D2O)δ＝2.45和2.85(jew.t，2H，-CH2-CH2-)，4.6(S，2H，CH2-O)，6.26(S，1H，4-H)式Ⅰ的化合物進行下列試驗，這些試驗對于評價對CNS起作用的該類化合物的活性極為適宜，通過進行這些試驗可評價化合物有效的神經保護特性和良好的耐受性。
1.大鼠腦小泡制劑中3H-天冬氨酸的高親和性吸收試驗原理大鼠皮層中的新鮮突觸小泡用緩沖液培養(yǎng)，測定3H-D天冬氨酸與對照突觸小泡比較的制劑增加了3H-天冬氨酸吸收的高親和性，那些防止3H-D-天冬氨酸釋放損失的制劑特別令人感興趣。
實驗記錄3H-D-天冬氨酸吸收實驗按Anand et al的方法進行(Biochem.Pharmacol.，35(1986)，1055-1057)，從雄性Sprague-Dawley大鼠的大腦皮層解剖出突觸小泡，該制劑在四個濃度用兩個樣品與含有緩沖液的對照樣品作平行試驗，培養(yǎng)基(PH7.4)含有1.2mMKH2PO4，5mMKcl，5mM丙酮酸鹽，1.2mM葡萄糖，1.2mMMgCL2，1.4mMNacl，25mMNaHCO3，為了非特定的3H-D-天冬氨酸吸收，用114mM氯化膽堿取代Nacl，用25mMKHCO3取代NaHCO3，將1份小泡懸浮液(約25ug/ml的試驗溶液)加到控溫于37℃并用卡波金(5%CO2，95%O2)充氣并預培養(yǎng)2分鐘的試驗樣品中，加入50ul的3H-D-天冬氨酸(比放射性為25Ci/mmol，10pmol/ml的試驗溶液)進行3分鐘的培養(yǎng)，進行氨基酸吸收，過濾從培養(yǎng)基中分離出小泡，用Titertak細胞捕獲器(FlowLaboratories，Meckenheim)洗脫吸附的標記氨基酸，利用液閃記數器(Canberra-Packard，Model 1500，F(xiàn)rankfurt)測定H-D-天冬氨酸的吸收。
制劑的活性以特定的3H-D-天冬氨酸吸收的百分比與對照值(100%)比較，于表3中列出，三磷酸腺甙(ATP)做為標準物質用作參比(見表3)，且使用其1mM時引起3H-D-天冬氨酸吸收增加35%，ATP濃度低于500um時無效，但在較高濃度顯示其濃度依賴性活性。
表33H-D-天冬氨酸吸收的促進實例號 制劑濃度 促進um (%)1. 500 152. 500 12
3. 500 205. 10 266. 10 178. 10 139. 100 1910. 500 2312. 500 1713. 500 3314. 500 1916. 1000 1918. 100 4619. 100 2522. 100 2324. 500 2825. 500 2031. 500 2132. 100 1939. 1000 1450. 500 1556. 500 1758. 10 35ATP 500 31
ATP 1000 35ATP 2000 57ATP 5000 1212.大鼠腦紋狀體中釋放3H-乙酰膽堿的抑制試驗結果在特殊的容器中，大鼠腦的新鮮紋狀體切片用緩沖液洗，用NMDA刺激后，測定釋放的3H-標記的乙酰膽堿，具有NMDA-拮抗劑活性的制劑抑制了乙酰膽堿釋放。
實驗記錄按Wichman等人(Naunyn-Schmi-ed.Arch.Phrmacol.，338(1988)，623-631)的方法進行過熔融實驗，0.5mm厚的大鼠腦切片于含有0.1umol/l的3H-膽堿，比放射性為80Ci/mmol的2ml培養(yǎng)基中預培養(yǎng)30分鐘，在六個熔融容器的每個容器中，腦切片以1.5ml/min的速度轉移并融合90分鐘，融合2分鐘的部分連續(xù)收集，為刺激乙酰膽堿的釋放，每個腦切面每次用25umol/l的NMDA融合2次，每次2分鐘，第一次刺激(S1)在第54和第56分鐘之間，第二次刺激(S2)在第76和第78分鐘之間，培養(yǎng)基含有(以mmol/l表示)Nacl 118，Kcl 4.8，Cacl21.2，MgSO41.2，NaHCO325，KH2PO41.2和葡萄糖10。培養(yǎng)基用卡波金于37℃飽和，PH調到7.4，將試驗的NMDA和新型制劑溶于融合基質中，用Mg2+激離基質進行融合，溶于腦切片和融合物中的3H用Packard1900 CA(Frankfurt)以50%的效率進行液閃計數測定。
結果計算基礎釋放和S1和S2NMDA-刺激的釋放以每個部分的%/min表示(Limberger et al.，Naunyn Schmied.Arch.Pharmacol.339(1988)，53-61)，作為對照的刺激釋放S2/S1的值的計算為0.69±0.09，如果物質，如從文獻所知的NMDA受體拮抗劑CPP(3-(+)-2-羧基哌嗪-4-基丙基-1-膦酸)抑制MDA-刺激的釋放，該值則減小，制劑對刺激的釋放的抑制相對于對照值以百分比計算，列于表4中。
表4紋狀體切片3H-乙酰膽堿釋放的抑制實例號 制劑濃度 抑制率um (%)1. 10 137. 10 288. 10 3018. 10 2219. 10 1620. 10 1821. 10 2022. 10 1533. 10 2634. 10 956. 10 1159. 10 26CPP 10 303.3H-MK-801結合于大鼠腦膜的抑制。
試驗原理MK-801為非競爭性拮抗劑，其與和NMDA受體偶聯(lián)的離子通道結合(Yoneda et al.，Brain Res.499(1989(，305)，試驗中將含有制劑和3H-MK-801的腦膜進行培養(yǎng)，3H-MK-801的結合，或其被制劑(拮抗劑)的取代，可利用放射化學方法進行測定。實驗記錄結合實驗按Reynolds等人的方法進行(Proc.Natl.Acad.Sci.USA，84(1987)，7744)。膜的制備按Reynolds方法進行，吸取試驗樣品隨后加緩沖液和試驗的制劑，用蛋白質預培養(yǎng)2分鐘，并由3H-MK801起始，膜在37℃融化，并在37℃培養(yǎng)10分鐘，使用Polytron以最大速度的一半速度均化15秒鐘，隨后在冷卻狀態(tài)下使用。培養(yǎng)基包括PH7.4的Hepes緩沖液20mM，三個濃度的制劑5um，10um和50um，含膜500ug/ml的試驗溶液，3H-MK801 1nM。于室溫(23℃)下培養(yǎng)60分鐘，經過濾中止，使用濾紙為Schleicher和Schull32號玻璃纖維紙，并在實驗前一天在0.03%聚乙烯亞胺中浸泡30分鐘，并干燥切下的濾紙于4ml的“Packard 199TM”閃爍液(Frankfurt)中計數，利用液閃計數(Packard 1500)測定3H。
結果計算利用小型計算器(HP-97)計算在60分鐘內結合蛋白量(單位10-15mol/mg)。如果某物質拮抗蛋白結合，該值下降，物質的活性與對照比較，以百分比，如%結合列一于表5中。
測定5um，10um和50um的參比制劑CPP(3-(+)-2-羧基哌嗪-4-基-丙基-1-膦酸)的活性常用于檢查試驗。
表5結合于NMDA受體-通道的3H-MK-801的抑制。
實例號 制劑濃度 抑制μM (%)2. 50 105. 50 7819. 50 1621. 50 4557. 50 43CPP 50 81
4.NMDA誘發(fā)的小鼠痙攣的抑制下列實例表明拮抗NMDA(N-甲基-(D)-天冬氨酸)誘發(fā)痙攣的神經保護作用。給體重22-24g的雄性NMRI(Naval Medical Research Institute小鼠靜脈注射20-30mg/kg的NMDA，其可導致定型的、陣攣性的痙攣，大部分是致死的，為研究試驗物質的NMDA-拮抗活性，其在給NMDA前一小時口服給藥。隨后在60分鐘內觀察動物的上述癥狀將發(fā)生陣攣性痙攣和死亡率與對照組比較，以百分比變化表示，作為評價的標準，文獻記載的GABA興奮劑氨甲基羥異噁唑和用作NMDA拮抗劑的物質MK801據報導具有對抗神經變性病變的作用，可用作對照制劑。
由研究實例表明，與標準物質比較毒性具有相當大的差別，LD50值亦列于表6中。
5.沙土鼠前腦局部缺血后的神經保護下列的實驗步驟及其它發(fā)表的文章(K.Rudolphi et al.，J.Cereb.Blood Flow Metabl.，774，1987)，表明下列的實例可以保護大腦神經細胞，對抗嚴重的局部缺血損傷。
在鹵代烷麻醉下，用動脈瘤小夾使頸動脈兩側鎖閉。使20只雄性蒙古沙土鼠經5分鐘前腦局部缺血后重新循環(huán)。7天后，將動物在鹵代烷麻醉下斷頭，大腦浸于卡諾依氏液中固定，并在5-級組織病理學評價幫助下，“盲”測海馬CA1區(qū)的神經損傷程度，將試驗化合物在局部缺血前15分鐘時給每級的10只沙土鼠腹內注射或口服給藥，一個局部缺血對照組(10只動物)用相應于實驗化合物的各試劑處理，治療組與對照組比較，結果以平均神經行為評分或組織病理學評分(各評價分數之和/動物數目)的%變化表示，列于表7中。
表7蒙古沙土鼠前腦局部缺血3分鐘后CA1維體細胞的壞死實例號 劑量 細胞壞死 行為評分(mg/kg) (%變化) (%變化)氨甲基羥 5i.p. -74 +41異噁唑MK801 5i.p. -23 +248 50p.o. -46 012 10i.p. -32 012 50p.o. -14 016 50p.o. -27 018 50p.o. -23 +1519 50p.o. -25 0由表中數據可見，標準物質氨甲基羥異噁唑和MK801給藥后也可導致死亡細胞的減少。但在行為評分中可見明顯的局部缺血后付作用癥狀，而試驗物質對神經癥狀無付作用。
6.大鼠前腦光化學誘發(fā)的梗塞試驗如下
該方法的理論基礎和實際應用早已被敘述(Grome et al，J.Cereb.Blood Flow Metabol.8(1988)89-95)，300-350g的雄性Sprague-Dawley大鼠用含1%鹵代烷的氧麻醉，在頭皮中做一小切口，靜注給1ml具有光化學活性染料孟加拉玫紅(%mg/ml的氯化鈉溶液)，一段顱骨(直徑3mm)用氙燈(75w)的綠光(570nm)照射15分鐘。此時，麻醉終止，大鼠被隨機分成給藥組和空白對照組(n＝6)，在實驗中，所給物質皆有一個劑量，局部缺血后30分鐘時給試驗物質，24小時后，這些物質被斷頭處死，大腦迅速取出并冷凍，連續(xù)低溫控制的切片損傷的全部用結晶紫染色，這些切片的90利用象分析系統(tǒng)測定以確定局部缺血引起損傷的體積，體積以微升計算，并與空白對照比較以百分比的變化表示，在局部缺血后的2小時內，仔細觀察動物，給出行為評分從0(無癥狀)到4(嚴重的運動癥狀包括攝食困難)。
表1(續(xù))
表1(續(xù))
表6小鼠NMDA誘發(fā)驚厥的抑制和毒性
權利要求
1.式Ⅰa，Ⅰb或Ⅰc化合物的制備方法
其中R1為2-，3-或4-吡啶基或式ⅠⅠ的基團
其中R3和R4為氫或C1-C4-烷基，R5為自由電子對或氫R6和R7為氫；C1-C6-烷基；C3-C6-環(huán)烷基；C6-C12-芳基-C1-C4-烷基；胍?；籆1-C6-烷羰基；C1-C4-烯基羰基；C1-C4-烯基羰基；C1-C6-烷氧羰基；C6-C12-芳基-C1-C4-烷基羰基，C6-C10-芳基-C1-C4-烷氧羰基；C6-C10-芳基羰基，或是天然α-氨基酸或γ-氨基丁酸的基團，其可被C1-C6-烷基，羥基，鹵素，氨基或硝基取代；或R6和R7均與氮原子相連，形成五一七元雜環(huán)，其中碳原子可被硫，氧或氮原子取代，或R5，R6和R7為C1-C4-烷基或C3-C6-環(huán)烷基，或R5為C1-C4-烷基，R6和R7均由氮原子相連，形成五一七元雜環(huán)，或R5，R6和R7均與氮原子相連形成六一十二元雜環(huán)；R2為式Ⅲ的基團其中n為0或1-4的整數X為羥基；C1-C4-烷氧基；羧基；鹵代甲酰基；C1-C12-烷氧羰基；芐氧羰基或C3-C6-環(huán)烷氧-羰基，其可被C1-C6-烷基單取代或多取代，或是由肽鍵連于天然α-氨基酸、γ-氨基丁酸或二肽的羰基；或是氨基羰基，其中氨基可被C1-C6-烷基單取代或雙取代，或被苯基-C1-C6-烷基單取代，或是兩個氨基均與氮原子相連，形成五一七元雜環(huán)，其中碳原子可被氧或氮原子取代；或X為式IV的基團
其中Y和Z為羥基，C1-C4-烷基或C1-C4-烷氧基；A為C，C-單鍵或C，C-雙鍵；條件為如果R2為式IV的基團，則R1不是2-，3-或4-吡啶基，如果X為羥基或甲氧基，則n≠0，及其立體異構形或其藥用鹽的制備，其包括將式V的氧化腈
a)當式Ia中的A為C，C-單鍵時，與式VI的稀反應，進行環(huán)加成
或b)當式Ia中的A為C，C-雙鍵時，與式Ⅶ的炔丙基衍生物反應，進行環(huán)加成，
其中，R2，R3和R4同前述定義，W為NR5R6R7的基團，(R5，R6和R7同前述定義)或為可被式NRRR的胺取代的取代基，如烷基磺?；蚍蓟酋；螓u素，這里優(yōu)選氯或溴，或c)將根據a)或b)所制備的式Ⅷ的化合物轉化為式Ia的化合物，
其中R2，R3，R4和A如前述定義，W用式NR5R6R7的胺進行取代，或d)為制備式Ib或Ic的物質，將式Ⅸ，Ⅹ，Ⅻ或XIII的烯酸或炔酸衍生物，
(其中R10為氫，烷基，醇官能團保護基或羧酸酯保護基，n如前定義，R3為烷基或芳烷基)與式(Ⅺ)的氧化腈進行1，3-二極環(huán)加成反應，(其中R2如前定義，條件為R2不是α-氨基酸或二肽)，隨一按文獻方法除去保護基R10，并將醇基官能團轉化為活化衍生物以便與胺進行交換，如鹵化物，或甲苯磺酸酯，隨后該衍生物與R5-R7同前定義的式NR5R6R7的胺反應，或，e)將a)-d)中制備的式Ia或Ib的羧酸酯水解為羧酸，或將可能存在的芐酯氫解斷裂，或，f)用適當取代的伯或仲胺，將方法a)-d)中制備的羧酸烷基酯轉人為酰胺，或，g)按文獻方法，將a)或b)中制備的式Ia的次膦酸單烷基酯或膦酸二烷基酯水解為膦酯單酯，膦酸或次膦酸，或，h)首先將e)中得到的羧酸轉化為活化的酸衍生物，隨后用醇將該衍生物酯化，用伯胺或仲胺將酯轉化為酰胺，或用羧基保護的氨基酸或低級肽將酯轉化為氮上?；碾?，隨后除去肽基上的羧基保護基或經酯交換將其轉化為其它基團，或i)按文獻方法將方法a)-h)中制備的式Ia的化合物中的氮原子上用做保護基R7除去，或j)將方法i)中制備的、羧基為酯或酰胺形式的化合物與活化的羧酸衍生物或如適合，與氮上保護的氨基酸或低級肽，并使用肽化學中常用的試劑進行反應，轉化為氮上乙酰化的衍生物，或k)將方法j)中制備的化合物除去可能存在的羧酸酯而轉化為游離羧酸，或l)將方法j)或k中化合物除去可能由氨基酸基團引入的N-保護基，而轉化為游離氨基化合物或甜菜堿化合物，或，m)將方法c)-i)制備的式Ia或Ib化合物與烷基化試劑(優(yōu)選烷基鹵)反應，轉化為季銨化合物，或n)按已知方法，將方法a)-m)中制備的化學結構為非對映立體異構或對映體形式的式Ia和Ib的化合物拆分為單一的立體異構體，o)方法a)-n)中的式Ia和Ib化合物可以是游離型，或在酸性或堿性基團存在時，可轉化為藥用結晶鹽。
2.權利要求1的方法，制備出式Ⅰa和Ⅰb的化合物，其中R1為2-，3-或4-吡啶基或式Ⅱ的基團
其中R3和R4為氫或C1-C4-烷基;R5為自由電子對或氫;R6和R7為氫，C1-C4-烷基;或苯基-C1-C2-烷基;R6和R7均與氮原子相連形成五-七元雜環(huán)，其中碳原子可被硫，氧或氮原子取代;R6為氫，R7為胍?；?C1-C6-烷羰基;C1-C4-烯基羰基，C1-C6-烷氧羰基，苯基-C1-C4-烷羰基，芐氧羰基，苯甲酰基，或天然存在α-氨基酸或γ-氨基丁酸的基團，其可被C1-C4-烷基，羥基，鹵素，氨基或硝基取代;R5，R6和R7為C1-C4-烷基或C3-C6-環(huán)烷基;R2為式Ⅲ的基團其中n為0或1到3的整數，X為羥基;C1-C4-烷氧基;羧基;C1-C4-烷氧羰基;芐氧羰基或C3-C6-環(huán)烷氧羰基，其可被C1-C6-烷基單一或多取代;或是通過肽鍵與天然α-氨基酸，γ-氨基丁酸或二肽相連的羰基，或是氨基羰基，其中氨基可被C1-C4-烷基單一或雙取代，或被苯基C1-C4-烷基單取代，或是兩個氨基均與氮原子相連形成五-七無雜環(huán)，其中碳原子可被氧或氮原子取代，或X為式Ⅳ的基團
其中Y和Z為羥基，C1-C4-烷基或C1-C4-烷氧基;且A為C，C-單鍵或C，C-雙鍵;條件為如果R2為式Ⅳ的基團，R1不是2-，3-或4-吡啶基。
3.權利要求1或2的方法，其中制備的式Ⅰa的化合物中R1為2-吡啶基或式Ⅱ的基團，
其中R3和R4為氫或C1-C4-烷基;R5為自由電子對或氫;R6和R7為氫;C1-C4-烷基;或苯基-C1-C2-烷基;R6和R7均與氮原子相連，形成五-七元飽和雜環(huán)，其中碳原子可被硫、氧、或氮原子取代;R6為氫，R7為胍?；珻1-C6-烷羰基，或天然α-氨基酸或γ-氨基丁酸的基團;R5，R6和R7為C1-C4-烷基;R2為式Ⅲ的基團其中n為0或1到4的整數;X為羥基;C1-C4-烷氧基;羧基;鹵代甲?；?C1-C4-烷氧羰基;芐氧羰基;或是C3-C6-環(huán)烷氧羰基，其可被C1-C6-烷基單一或多取代;或是通過肽鍵與天然α-氨基酸或γ-氨基丁酸相連的羰基;或是氨基羰基，其中氨基可被C1-C4-烷基單一或雙取代、或兩個氨基均與氮原子相連，形成五-七元雜環(huán)，其中碳原子可被氧或氮原子取代;或X為式Ⅳ的基團
其中Y和Z為羥基，C1-C4-烷基或C1-C4-烷氧基;A為C，C-單鍵或C，C-雙鍵;條件為如果R2為式Ⅳ的基團則R1不是2-吡啶基，如果X為OH，n＝0，則A不是C，C-雙鍵。
4.權利要求1到3中的方法，其中制備式Ⅰa的化合物中，R1為2-吡啶基或式Ⅱ的基團
其中R3和R4為氫或C1-C4-烷基;R5為自由電子對或氫R6和R7為氫，C1-C4-烷基;或芐基;R6和R7均與氮原子相連，形成五-六元飽和雜環(huán)，其中碳原子可被硫，氧或氮原子取代;R6為氫，R7為胍?；?，C1-C6-烷羰基，或是天然α-氨酸的基團;R5，R6和R7為C1-C4-烷基R2為式Ⅲ的基團其中n為0，1或2;X為羥基;羧基;C1-C4-烷氧基;芐氧羰基，或是環(huán)己氧羰基，其可被C1-C6-烷基單或多取代，或是通過肽鍵與天然α-氨基酸相連的羰基;或是氨基羰基，其中兩個氨基均與氮原子相連，形成五-六元雜環(huán)，雜環(huán)中碳原子可被氧或氮原子取代;或是式Ⅳ的基團
其中Y為羥基或C1-C4-烷氧基，和Z為C1-C4-烷基;A為C，C-單鍵或C，C-雙鍵;條件為如果R2為式Ⅳ的基團則R1不是2-吡啶基，如果X為OH，n為0則A不是C，C-雙鍵。
5.權利要求1或2的方法，其中制備的式Ⅰb化合物中，R1為式Ⅱ的基團
其中R3和R4為氫;R5為自由電子對或氫;R6和R7為氫;C1-C4-烷基;或苯基-C1-C2-烷基;R6和R7均與氮原子相連，形成五-六元飽和雜環(huán)，其中碳原子可被硫、氧或氮原子取代;R6為氫，R7為C1-C4-?；?C1-C6-烷羰基，苯甲?；蛱烊沪?氨基酸或γ-氨基酸的基團;R5，R6和R7為C1-C4-烷基或C3-C5-環(huán)烷基;R2為式Ⅲ的基團其中n為0，1或2;X為羰基;鹵代甲?；?C1-C4-烷氧羰基;芐氧羰基或C3-C6-環(huán)烷羰基，其可被C1-C6-烷基單一或多取代，或是通過肽鍵與天然α-氨基酸或γ-氨基丁酸相連的羰基，或是氨基羰基，其中氨基可被C1-C4-烷基單一或雙取代，或是兩個氨基均與氮原子相連，形成五-七元雜環(huán)，其中碳原子可被氧或氮原子取代，及A為C，C-單鍵或C，C-雙鍵。
6.權利要求1，2或5中的方法，其中制備的式Ⅰb的化合物中，R1為式Ⅱ的基團
其中，R3和R4為氫;R5為自由電子對;R6和R7為氫或C1-C4-烷基;R6和R7均與氮原子相連，形成五-六元飽和雜環(huán)，其中碳原子可被硫、氧或氮原子取代;R6為氫，R7為C1-C4-烷羰基;R5，R6和R7為C1-C4-烷基;R2為式Ⅲ的基團其中n為2X為羧基，C1-C4-烷氧羰基;芐氧羰基;環(huán)己羰基，其可被C1-C6-烷基單一或多取代;或是通過肽鍵與天然α-氨基酸相連的羰基;或是氨基羰基，其中兩個氨基均與氮原子相連，形成五-六元雜環(huán)，其中碳原子可被氧或氮原子取代，A為C，C-單鍵或C，C-雙鍵。
7.權利要求1-4的方法，其中制備的式Ⅰa化合物中A為C，C-雙鍵。
8.權利要求1-7的方法，系列制備的式Ⅰa，Ⅰb或Ⅰc化合物包括5-氨甲基異噁唑-3-丙酸芐酯鹽酸鹽，5-氨甲基異噁唑-3-丙酸乙酯鹽酸鹽，(+)5-氨甲基異噁唑-3-丙酸
酯甲苯-4-磺酸鹽，(-)5-氨甲基異噁唑-3-丙酸
酯甲苯-4-磺酸鹽，順-(3，3，5)三甲基環(huán)己基5-氨甲基異噁唑-3-丙酸酯甲苯-4-磺酸鹽，2-(5-氨甲基異噁唑-3-基)乙基-2-(P-甲基)次膦酸二乙酯鹽酸鹽，5-氨甲基異噁唑-3-丙酸甲酯鹽酸鹽，5-氨甲基異噁唑-3-丙酸，5-(1-氨基-1-甲乙基)異噁唑-3-丙酸，5-芐基氨甲基異噁唑-3-丙酸，5-二甲基氨甲基異噁唑-3-丙酸(-)-孟基-3-羧基-2-異噁唑烷-5-基-羧酸-二環(huán)己基銨鹽，順-(3，3，5)-三甲基環(huán)己基-5-三甲基氨甲基-異噁唑-三丙酸酯碘化物，3-羥基亞胺甲基-異噁唑-5-丙酸甲酯，3，5-二羧基-2-異噁唑烷，5-羥甲基-異噁唑-3-丙酸鈉鹽，2-(5-氨甲基異噁唑-3-基)乙基-2-(P-甲基)-次膦酸酯鹽酸鹽，5-乙酰胺甲基異噁唑-3-丙酸，(-)5-三甲基氨甲基異噁唑-3-丙酸
酯碘化物，(+)5-三甲基氨甲基異噁唑-3-丙酸
酯碘化物，(+)5-(L-苯丙酰氨甲基)異噁唑-3-丙酸
酯鹽酸鹽，(-)5-(L-苯丙酰氨甲基)異噁唑-3-丙酸
酯鹽酸鹽，5-(L-苯丙酰氨甲基)異噁唑-3-丙酸甲酯鹽酸鹽，5-胍基甲基異噁唑-3-丙酸，N-(5-氨甲基異噁唑-3-基)丙酰甘氨酸，雙(3-(2-羧基乙基)異噁唑-5-基甲基)胺·二銨鹽，(+)5-氨甲基-2-異噁唑烷-3-丙酸
酯甲苯-4-磺酸鹽，(-)5-氨甲基-2-異噁唑烷-3-丙酸
酯甲苯-4-磺酸鹽，3-(2-羧基乙基)-5-(2-吡啶基)-2-異噁唑烷，5-三甲基氨甲基異噁唑-3-丙酸酯，5-哌啶基甲基異噁唑-3-丙酸鹽酸鹽，5-氨甲基異噁唑-3-丙酰胺鹽酸鹽，5-(L-苯丙酰氨甲基)異噁唑-3-基丙酰甘氨酸三氟醋酸鹽。
9.藥劑的制備方法，其中包括至少一個式Ⅰa，Ⅰb或Ⅰc的化合物
其中R1為2-，3-或4-吡啶基或式Ⅱ的基團
其中R3和R4為氫或C1-C4-烷基;R5為自由電子對或氫;R6和R7為氫;C1-C5-烷基;C3-C6-環(huán)烷基;C6-C12-芳基-C1-C4-烷基;胍酰基;C1-C6-烷羰基;C1-C4-烯羰基;C1-C6-烷氧-羰基;C6-C12-芳基-C1-C4-烷基羰基，C6-C10-芳基-C1-C4-烷氧羰基，C6-C10-芳基-羰基，或天然α-氨基酸或γ-氨基丁酸的基團，其可被C1-C6-烷基，羥基，鹵素，氨基或硝基取代;或R6和R7，均與氮原子相連，形成五-七元雜環(huán)，其中碳原子可被硫、氧或氮原子取代;或R5、R6和R7為C1-C4-烷基或C3-C6-環(huán)烷基，或R5為C1-C4-烷基，而R6和R7，均與氮原子相連，形成五-七元雜環(huán)，或R5，R6和R7均與氮原子相連，形成六-十二元雜環(huán);R2為式Ⅲ的基團其中n為0或1-4的整數X為羥基;C1-C4-烷氧基;羰基;甲?；?氧亞胺基;鹵代甲?；?C1-C12-烷氧羰基;芐氧羰基或C3-C6-環(huán)烷氧羰基，其可被C1-C6-烷基單一或多取代;或是通過肽鍵與天然α-氨基酸，γ-氨基丁酸或二肽相連的羰基，或是氨基羰基，其中氨基可被C1-C6-烷基單一或雙取代，或被苯基-C1-C6-烷基單取代，或兩個氨基均與氮原子相連，形成五-七元雜環(huán)，其中碳原子可被氧或氮原子取代;或X為式Ⅳ的基團
其中Y和Z為羥基，C1-C4-烷基或C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷基或C1-C4-烷氧基;而A為C，C-單鍵或C，C-雙鍵如可能，還包括立體異構純的化合物和/或藥用鹽，使用藥用賦形劑，如需要還可用其它添加劑和/或助劑，以制成藥劑。
10.權利要求9的方法，其中式Ⅰa或Ⅰb的化合物中R1為2-，3-或4-吡啶基或式Ⅱ的基團
其中R3和R4為氫或C1-C4-烷基;R5為自由電子對或氫;R6和R7為氫;C1-C4-烷基;或苯基-C1-C2-烷基;R6和R7均與氮原子相連，形成五-七元雜環(huán)，其中碳原子可被硫、氧或氮原子取代;R6為氫，R7為胍酰基;C1-C6-烷羰基;C1-C4-烯羰基;C1-C6-烷氧羰基，苯基-C1-C4-烷羰基，芐氧羰基，苯甲?；?，或天然α-氨基酸或γ-氨基丁酸的基團，其可被C1-C4-烷基、羥基，鹵素，氨基或硝基取代。R5，R6和R7為C1-C4-烷基或C3-C6-環(huán)烷基;R2為式Ⅲ的基團其中n為0或1到3的整數;X為羥基;C1-C4-烷氧基;羧基;C1-C4-烷氧羰基;芐氧羰基或C3-C6-環(huán)烷氧羰基，其可被C1-C6-烷基單一或多取代;或是通過肽鍵與天然α-氨基酸，γ-氨基丁酸或二肽相連的羰基;或氨基羰基，其中氨基可被C1-C4-烷基單一或雙-取代，或被苯基-C1-C4-烷基單取代，或兩個氨基均與氮原子相連，形成五-七元雜環(huán)，其中碳原子可被氧或氮原子取代;或X為式Ⅳ的基團
其中Y和Z為羥基，C1-C4-烷基或C1-C4-烷氧基;A為C，C-單鍵、或C，C-雙鍵
11.權利要求9的方法，其中所用的式Ⅰa化合物中R1為2-吡啶基或式Ⅱ的基團
其中R3和R4為氫或C1-C4-烷基;R5為自由電子對或氫;R6和R7為氫;C1-C4-烷基;或苯基-C1-C2-烷基;R6和R7，均與氮原子相連，形成五-七元飽和雜環(huán)，其中碳原子可被硫、氧或氮原子取代，R6為氫，R7為胍酰基，C1-C6-烷羰基或是天然α-氨基酸或γ-氨基酸基團，R5，R6和R7為C1-C4-烷基;R2為式Ⅲ的基團其中n為0，1或2;X為羥基;C1-C4-烷氧基;羧基;鹵代甲?；?C1-C4-烷氧羰基;芐氧羰基或C3-C6-環(huán)烷氧羰基，其可被C1-C6-烷基單一或多取代;或是通過肽鍵與天然α-氨基酸或γ氨基丁酸相聯(lián)的羰基;或是氨基羰基，其中氨基可被C1-C6-烷基單一或雙取代，或兩個氨基均與氮原子相連，形成五-七元雜環(huán)，其中碳原子可被氧或氮原子取代;或X為式Ⅳ的基團
其中Y和Z為羥基，C1-C4-烷基或C1-C4-烷氧基;A為C，C-單-或C，C-雙鍵。
12.權利要求9的方法，其中所用式Ⅰa的化合物中R1為2-吡啶基或式Ⅱ的基團
其中R3和R4為氫或C1-C4-烷基;R5為自由電子對或氫;R6和R7為氫;C1-C4-烷基;或芐基;R6和R7均與氮原子相連，形成五-六元飽和雜環(huán)，其中碳原子可被硫、氧或氮原子取代，R6為氫，R7為胍酰基;C1-C6-烷羰基，或天然α-氨基酸的基團，R5，R6和R7為C1-C4-烷基，R2為式Ⅲ的基團其中n為0，1或2Y為羥基;羧基;C1-C4-烷氧羰基;芐氧羰基;或環(huán)己氧羰基，其可被C1-C6-烷基單或多取代;或是通過肽鍵與天然α-氨基酸相連的羰基，或是氨基羰基，其中兩個氨基均與氮原子相連，形成五-六元雜環(huán)，其中碳原子可被氧或氮原子取代，或X為式Ⅳ的基團
其中Y為羥基或C1-C4-烷氧基，Z為C1-C4-烷基A為C，C-單鍵或C，C-雙鍵。
13.權利要求9的方法，其中所用的式Ⅰb的化合物中R1為式Ⅱ的基團
其中R3和R4為氫R5為自由電子對或氫;R6和R7為氫;C1-C4-烷基;或苯基-C1-C2-烷基;R6和R7均與氮原子相連、形成五-六元飽和雜環(huán)，其中碳原子可被硫、氧或氮原子取代;R6為氫，R7為C1-C4-?；?C1-C6-烷基羰基，苯甲?；蛱烊沪?氨基酸或γ-氨基丁酸的基團;R5，R6和R7為C1-C4-烷基或C3-C6-環(huán)烷基;R2為式Ⅲ基團。其中n為0，1或2;X為羧基;鹵代甲?；?C1-C4-烷氧羰基;芐氧羰基或C3-C6-環(huán)烷羰基，其可被C1-C6-烷基單一或多取代，或是通過肽鍵與天然α-氨基酸或γ-氨基丁酸相連的羰基;或是氨基羰基，其中氨基可被C1-C4-烷基單一或雙取代或兩個氨基均與氮原子相連，形成五-七元雜環(huán)，其中碳原子可被氧或氮原子取代，A為C，C-單鍵或C，C-雙鍵。
14.權利要求9的方法，其中所用的式Ⅰb的化合物其中R1為式Ⅱ的基團
其中R3和R4為氫R5為自由電子對R6和R7為氫或C1-C4-烷基;R6和R7均與氮原子相連，形成五-六元飽和雜環(huán)，其中碳原子可被硫，氧或氮原子取代R6為氫，R7為C1-C6-烷羰基;R5，R6和R7為C1-C4-烷基;R2為式Ⅲ的基團R1為2-，3-或4-吡啶基或式Ⅱ的基團
其中R3和R4為氫或C1-C4-烷基;R5為自由電子對或氫;R6和R7為氫;C1-C4-烷基;或苯基-C1-C2-烷基;R6和R7均與氮原子相連，形成五-七元雜環(huán)，其中碳原子可被硫、氧或氮原子取代;R6為氫，R7為胍?；?C1-C6-烷羰基;C1-C4-烯羰基;C1-C6-烷氧羰基，苯基-C1-C4-烷羰基，芐氧羰基，苯甲?；蛱烊沪?氨基酸或γ-氨基丁酸的基團，其可被C1-C4-烷基、羥基，鹵素，氨基或硝基取代。R5，R6和R7為C1-C4-烷基或C3-C6-環(huán)烷基;R2為式Ⅲ的基團其中n為0或1到3的整數;X為羥基;C1-C4-烷氧基;羧基;C1-C4-烷氧羰5-二甲基氨甲基異噁唑-3-丙酸，2-(5-氨甲基異噁唑-3-基)乙基-2-(P-甲基)一次膦酸鹽酸鹽，5-乙酰氨甲基異噁唑-3-丙酸，(-)5-三甲基氨甲基異噁唑-3-丙酸
酯碘化物，(-)-孟基-3-羧基-2-異噁唑烷-5-基-羧酸-二環(huán)己銨鹽，順-(3，3，5)-三甲基環(huán)己基-5-三甲基氨甲基-異噁唑-3-丙酸酯碘化物，3-羥亞胺甲基-異噁唑-5-丙酸甲酯，3，5-二羧基-2-異噁唑烷，5-羥甲基-異噁唑-3-丙酸鈉鹽，(+)5-三甲基氨甲基異噁唑-3-丙酸
酯碘化物，(+)5-(L-苯丙氨酰氨甲基)異噁唑-3-丙酸
酯鹽酸鹽，(-)5-(L-苯丙氨酰氨甲基)異噁唑-3-丙酸
酯鹽酸鹽，5-(L-苯丙氨酰氨甲基)異噁唑-3-丙酸
酯鹽酸鹽，5-胍基甲基異噁唑-3-丙酸，N-(5-氨甲基異噁唑-3-基)丙酰甘氨酸，雙(3-(2-羧乙基)異噁唑-5-基甲基)胺·二銨鹽，(+)5-氨甲基-2-異噁唑烷-3-丙酸
酯·甲苯-4-磺酸鹽，(-)5-氨甲基-2-異噁唑烷-3-丙酸
酯·甲苯-4-磺酸鹽，3-(2-羧乙基)-5-(2-吡啶基)-2-異噁唑烷，5-三甲基氨甲基異噁唑-3-丙酸酯，5-哌啶基甲基異噁唑-3-丙酸鹽酸鹽，5-氨甲基異噁唑-3-丙酰胺鹽酸鹽，5-(L-苯丙氨酰氨)甲基異噁唑-3-基-丙酰甘氨酸三氟醋酸鹽。
17.權利要求9到16的方法，其中制備的藥劑用于預防和/或治療病理的神經變性病。
18.使用式Ⅰa，Ⅰb或Ⅰc的化合物，其可能的立體異構形式和/或，如需要及權利要求9到16中的藥用鹽制備的藥劑用于預防和/或治療人和動物的病理的神經變性病。
19.使用式Ⅰa，Ⅰb或Ⅰc的化合物，其可能的立體異構形式和/或，如需要，及其藥用鹽制備權利要求9到16的藥劑。
全文摘要
本發(fā)明記載了新的3，5-雙取代-2-異唑烷和異唑及特別適于預防和/或治療人和動物的病理性神經變性癥的新的藥劑。另外還說明了這些3，5-雙取代-2-異唑烷和異唑的制備方法。
文檔編號A61P25/28GK1055537SQ9110228
公開日1991年10月23日 申請日期1991年4月11日 優(yōu)先權日1990年4月12日
發(fā)明者威福里德·薩瓦博, 赫思特·阿南奧斯陶普羅, 誒樂南·泊謝-韋伯京, 瓊·格若莫 申請人:赫徹斯特股份公司