含有一種副干酪乳桿菌的用于治療脂肪肝的保健食品的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及含有一種副干酪乳桿菌的用于治療脂肪肝的保健食品，其特征在于，采用保藏編號為CGMCC No.10059的副干酪乳桿菌ZPY01與中藥材提取物組成的復(fù)合配方，該配方中含副干酪乳桿菌ZPY01的重量百分比為20％～50％，其余為中藥提取物；所述中藥材提取物為下列重量配比的中藥材：蒲公英15份、馬齒筧25份、白術(shù)6份、白芍8份、茉莉花6份、桃仁8份、藏紅花1份，加水煎煮所得的提取物。可應(yīng)用于預(yù)防和治療非酒精性脂肪肝。
10059
20141126
【專利說明】含有一種副干酪乳桿菌的用于治療脂肪肝的保健食品

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及含有一種副干酪乳桿菌的用于治療脂肪肝的保健食品。

【背景技術(shù)】
[0002] 脂肪肝，是指由于各種原因引起的肝細(xì)胞內(nèi)脂肪堆積過多的病變。脂肪性肝病正 嚴(yán)重威脅國人的健康，成為僅次于病毒性肝炎的第二大肝病，已被公認(rèn)為隱蔽性肝硬化的 常見原因。脂肪肝是一種常見的臨床現(xiàn)象，而非一種獨立的疾病。其臨床表現(xiàn)輕者無癥狀， 重者病情兇猛。一般而言，脂肪肝屬可逆性疾病，早期診斷并及時治療?？苫謴?fù)正常。
[0003] 脂肪肝包括酒精性脂肪肝和非酒精性脂肪肝兩大類。酒精性脂肪肝一般不需特殊 治療，大多在戒酒和治療1個月左右，肝內(nèi)脂肪減少，輕者數(shù)月后消失，重者一到兩年消失。 非酒精性脂肪肝的診斷需符合以下3項條件：①無飲酒史或飲酒折合乙醇量小于140g / 周（女性<70g /周）；②除外病毒性肝炎、藥物性肝病、全胃腸外營養(yǎng)、肝豆?fàn)詈俗冃?、?身免疫性肝病等可導(dǎo)致脂肪肝的特定疾??；③肝活檢組織學(xué)改變符合脂肪性肝病的病理學(xué) 診斷標(biāo)準(zhǔn)。在中醫(yī)學(xué)中并無此病名，但根據(jù)其臨床表現(xiàn)，眾多學(xué)者認(rèn)為其當(dāng)歸屬于中醫(yī)學(xué)的 "脅痛"、"肥氣"、"肝著"、"痰濁"、"積聚"等范疇。
[0004] 目前本病治療的目標(biāo)是延緩疾病進(jìn)展及并發(fā)癥的發(fā)生。主要方法包括基礎(chǔ)治療和 藥物治療，極少數(shù)患者需肝移植?；A(chǔ)治療方法如控制飲食、增加有氧運(yùn)動、減肥等。西藥 尚無防治脂肪肝的有效藥物，如維生素 B、C、E，卵磷脂、熊去氧膽酸、水飛薊素、肌苷、輔酶 A、還原型谷胱甘肽、?；撬帷⑷舛緣A乳清酸鹽、肝泰樂，以及某些降脂藥物等。中醫(yī)藥治療本 病多是針對濕痰瘀阻互結(jié)，痹阻肝絡(luò)的基本病機(jī)，采用疏肝理氣、活血化瘀、健脾祛痰、清熱 利濕和補(bǔ)益肝腎等治法，臨床上確有療效。
[0005] 由于任何藥物進(jìn)入體內(nèi)都要經(jīng)過肝臟解毒，在選用藥物時更要慎重，謹(jǐn)防藥物的 毒副作用，特別對肝臟有損害的藥物絕對不能用，避免進(jìn)一步加重肝臟的損害。
[0006] 本發(fā)明所涉及的中藥材均可見記載于《中華本草》。
[0007] 現(xiàn)代的人體及動物實驗證明活的乳酸菌具有確切的降膽固醇作用。但是由于人體 腸道內(nèi)是含有膽鹽的酸性環(huán)境，所以常見的乳酸菌在人體消化道內(nèi)難以存活，以至于應(yīng)用 乳酸菌實現(xiàn)降低膽固醇的發(fā)現(xiàn)難以在臨床有效實施。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的目的在于提供一種含有一種副干酪乳桿菌與中藥材提取物復(fù)合配方的 保健食品。
[0009] 本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的： 含有一種副干酪乳桿菌的用于治療脂肪肝的保健食品，其特征在于，采用保藏編號為 CGMCC No. 10059的副干酪乳桿菌ZPYOl與中藥材提取物組成的復(fù)合配方，該配方中含副干 酪乳桿菌ZPYOl凍干粉的重量百分比為20%?50%，其余為中藥提取物； 所述中藥材提取物為下列重量配比的中藥材：蒲公英15份、馬齒筧25份、白術(shù)6份、白 芍8份、茉莉花6份、桃仁8份、藏紅花1份，加水煎煮所得的提取物。
[0010] 所述的副干酪乳桿菌ZPYOl按照以下步驟進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)：（1)制備脫脂乳培養(yǎng)基： IOOOml蒸餾水中加入IOOg脫脂奶粉，溶解后分裝到試管中，121°C條件下滅菌15min，備用； (2)菌種的活化：將菌種接種至脫脂乳培養(yǎng)基中，37°C恒溫培養(yǎng)；反復(fù)接種培養(yǎng)，直至活化 到凝乳時間為4~5h，得發(fā)酵液； 所述副干酪乳桿菌ZPYOl凍干粉的制備方法：將上述發(fā)酵液離心分離菌體得到菌泥， 向菌泥中加入1倍重量的海藻糖，乳化凍干，即得到所述的副干酪乳桿菌ZPYOl凍干粉。
[0011] 所述中藥材提取物的提取方法為：稱取所述重量配比的藥材，加8倍量水，煎煮 1. 5小時，過濾；濾渣加6倍量水，煎煮1小時，過濾；合并濾液，濃縮，干燥。
[0012] 所述的含有一種副干酪乳桿菌的用于治療脂肪肝的保健食品，應(yīng)用于預(yù)防和治療 非酒精性脂肪肝。
[0013] 發(fā)明人認(rèn)為，肝臟是脂質(zhì)代謝的中心，參與脂蛋白的合成和分解。非酒精性脂肪肝 以彌漫性肝細(xì)胞大泡性脂肪變?yōu)橹饕卣?，以肝?xì)胞脂肪變性和脂肪貯積為病理特征。因 此，降血脂和護(hù)肝是治療本病的根本。
[0014] 本發(fā)明所采用的保藏編號為CGMCC No. 10059的副干酪乳桿菌ZPYOl為發(fā)明人新 近提純的新菌種，該菌種具有較強(qiáng)的耐酸性，在PH2. 5的酸性條件下可以保持4h活性；對膽 鹽的抗性也比較明顯，能耐受0. 40%牛膽酸鈉。能夠?qū)崿F(xiàn)在人體消化道長時間存活并發(fā)揮 降低膽固醇的功效。
[0015] 非酒精性脂肪肝的病機(jī)主要為肝失疏泄，脾失健運(yùn)，濕熱內(nèi)蘊(yùn)、痰濕內(nèi)生、瘀血阻 滯，而最終形成痰瘀互結(jié)。本發(fā)明方中重用馬齒筧、蒲公英入肝經(jīng)，清熱解毒，利濕化濁；茉 莉花行氣化痰；白術(shù)健脾益氣；白芍養(yǎng)血柔肝；桃仁以及少量藏紅花活血化淤；諸藥合用， 共奏清熱解毒、利濕化濁、健脾柔肝、活血化瘀之功效。
[0016] 本發(fā)明采用副干酪乳桿菌ZPYOl與傳統(tǒng)中藥結(jié)合，從而實現(xiàn)從根本調(diào)理病根的同 時迅速降低膽固醇的功效，標(biāo)本兼治。
[0017] 本發(fā)明所選用的原料藥食兩用，安全性高，適于長期服用。
[0018] 下面結(jié)合實驗數(shù)據(jù)說明副干酪乳桿菌ZPYOl的特性： 一、實驗材料與方法 (一)、材料 1、菌種 實驗菌種來自臧牧民自制牦牛酸奶中，對其進(jìn)行篩選分離后，參照伯杰氏細(xì)菌鑒定手 冊(第八版）和《乳酸菌一生物學(xué)基礎(chǔ)及應(yīng)用》，對其進(jìn)行生理生化鑒定。形態(tài)觀察和生 理生化鑒定結(jié)果表明：分離菌為副干酪乳桿菌，命名為副干酪乳桿菌ZPY01，實驗編號為： Lp一ZPYOl ;對照菌株Lactobacillus paracasei為公知常見菌株，來自魯東大學(xué)生命科學(xué) 學(xué)院發(fā)酵室，實驗編號為：Lp - CK。
[0019] 2、培養(yǎng)基 MRS培養(yǎng)基；膽固醇培養(yǎng)基：在MRS培養(yǎng)基中添加0. 3mg/ml的膽固醇；脫脂乳培養(yǎng)基： 新西蘭恒天然脫脂奶粉，121°C滅菌lOmin。
[0020] 3、試劑 牛膽酸鈉；膽固醇。
[0021] 4、儀器與設(shè)備 722光柵分光光度計，恒溫水浴鍋、電熱蒸汽滅菌鍋、生化培養(yǎng)箱、pH計、超凈工作臺 等。
[0022] (二)、方法 1、脫脂乳培養(yǎng)基 10%脫脂乳培養(yǎng)基：IOOOml蒸餾水中加入IOOg脫脂奶粉，溶解后分裝到試管中，每支分 裝10ml，121°C、15min滅菌后備用。
[0023] 2、菌種的活化 將菌種接種至IOml已滅菌的脫脂牛奶中，37°C恒溫培養(yǎng)。反復(fù)接種培養(yǎng)，直至活化到 凝乳時間為4~5h。
[0024] 3、菌株抗酸性測定 用I. Omol/L的HCl將MRS培養(yǎng)基調(diào)至ρΗ3· 5、ρΗ2· 5。將活化好的菌液以L 0%的接種 量分別接種于MRS液體培養(yǎng)基中，37°C恒溫培養(yǎng)4. Oh后，重新接入新鮮培養(yǎng)基中（接種量 1. 〇%)，每隔7h取樣測定在波長600nm處的吸光度。繪制菌株的生長曲線，檢測菌株對酸的 耐受性，實驗重復(fù)3次，取其平均值。
[0025] 4、菌株抗膽鹽測定 在MRS培養(yǎng)基中分別加入牛膽酸鈉，使膽鹽濃度分別為0. 3%和0. 4%。將活化好的菌以 1. 〇%的接種量分別接種于MRS液體培養(yǎng)基中，每隔7h取樣測定在波長600nm處的吸光度。 繪制菌株的生長曲線，比較菌株生長與膽鹽含量的關(guān)系，實驗重復(fù)3次，取其平均值。
[0026] 5、膽固醇測定方法的建立 將活化好的菌液以1. 〇%的接種量分別接種于膽固醇培養(yǎng)基中，37°c恒溫培養(yǎng)72h，以 未接菌的培養(yǎng)基為空白對照。膽固醇含量的測定參照GB/T15206-1994食品中膽固醇的測 定方法：直接離心鐵礬比色法。用可見分光光度計在波長560nm處測定其光密度。膽固醇 清除率按下式計算：

【權(quán)利要求】
1. 含有一種副干酪乳桿菌的用于治療脂肪肝的保健食品，其特征在于，采用保藏編號 為CGMCC No. 10059的副干酪乳桿菌ZPY01與中藥材提取物組成的復(fù)合配方，該配方中含副 干酪乳桿菌ZPY01凍干粉的重量百分比為20%?50%，其余為中藥提取物； 所述中藥材提取物為下列重量配比的中藥材：蒲公英15份、馬齒筧25份、白術(shù)6份、白 芍8份、茉莉花6份、桃仁8份、藏紅花1份，加水煎煮所得的提取物。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的含有一種副干酪乳桿菌的用于治療脂肪肝的保健食品，其 特征在于，所述的副干酪乳桿菌ZPY01按照以下步驟進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)：（1)制備脫脂乳培養(yǎng) 基：1000ml蒸餾水中加入100g脫脂奶粉，溶解后分裝到試管中，121°C條件下滅菌15min，備 用；（2)菌種的活化：將菌種接種至脫脂乳培養(yǎng)基中，37°C恒溫培養(yǎng)；反復(fù)接種培養(yǎng)，直至活 化到凝乳時間為4~5h，得發(fā)酵液； 所述副干酪乳桿菌ZPY01凍干粉的制備方法：將上述發(fā)酵液離心分離菌體得到菌泥， 向菌泥中加入1倍重量的海藻糖，乳化凍干，即得到所述的副干酪乳桿菌ZPY01凍干粉。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的含有一種副干酪乳桿菌的用于治療脂肪肝的保健食品，其 特征在于，所述中藥材提取物的提取方法為：稱取所述重量配比的藥材，加8倍量水，煎煮 1. 5小時，過濾；濾渣加6倍量水，煎煮1小時，過濾；合并濾液，濃縮，干燥。
4. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的含有一種副干酪乳桿菌的用于治療脂肪肝的保健食品，其特 征在于，應(yīng)用于預(yù)防和治療非酒精性脂肪肝。
【文檔編號】A61K36/88GK104489687SQ201510008565
【公開日】2015年4月8日 申請日期:2015年1月8日 優(yōu)先權(quán)日:2015年1月8日
【發(fā)明者】張鵬宴, 衣華鵬 申請人:張鵬宴