專利名稱：一種復(fù)方斑蝥總提取物制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種復(fù)方斑蝥總提取物制劑及其制備方法，屬于中藥制藥 技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
中藥注射制劑是以中藥材為原料，經(jīng)提取、分離、精制等步驟制成的滅 菌制劑。它改變了中藥傳統(tǒng)的給藥方式，具備藥效迅速，生物利用度高，劑量更準(zhǔn)確，適用于 不宜口服或急重癥的病例，并可使某些藥物發(fā)揮定向或定位給藥等特點，較好地發(fā)揮了中 藥治療急病重癥及疑難病的作用。但是，隨著臨床應(yīng)用的日益增多，中藥注射劑引起藥物不 良反應(yīng)的事件屢有發(fā)生，已引起廣大醫(yī)藥工作者的關(guān)注。中藥注射制劑發(fā)生不良反應(yīng)的主 要原因在于中藥注射劑原料的化學(xué)成份十分復(fù)雜，其中一些高分子化合物，如鞣質(zhì)、動植 物蛋白極易引起過敏反應(yīng)；另外，由于中藥注射劑的生產(chǎn)工藝有欠成熟，造成個別批號藥液 純度欠佳，進(jìn)而引起過敏反應(yīng)。復(fù)方斑蝥由斑蝥、人參、黃芪、刺五加、三棱、半枝蓮、莪術(shù)、山茱萸、女貞子、熊膽 粉、甘草共十一味藥物組成，具有破血消瘦、攻毒蝕瘡的作用，臨床上主要用于治療原發(fā)性 肝癌、肺癌、直腸癌、惡性淋巴瘤、婦科惡性腫瘤等，其中復(fù)方斑蝥膠囊為《國家衛(wèi)生部藥品 標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第十七冊收載品種。目前公開的復(fù)方斑蝥藥材提取工藝有很多，大致方 法有方中君藥斑蝥的提取有粉末直接入藥、氯仿浸泡提取或氯仿滲漉法提??；人參、山茱 萸、女貞子、半枝蓮四味藥材或粉碎成細(xì)粉入藥，或采用水提/醇提方法獲得清膏濃縮液; 黃芪等五味加水煎煮濃縮成稠膏；熊膽粉加水溶解。但是經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，上述劑型工藝中還存 在藥物直接入藥導(dǎo)致雜質(zhì)含量高、藥液中成分變化不穩(wěn)定、制備工藝中有效成分提取分離 不完善等缺點，不利于產(chǎn)品的質(zhì)量控制；另外采用氯仿提取藥材，生產(chǎn)安全性差，對環(huán)境影 響大；同時由于有效藥物成分損失多，收率低，也使得大量具有抗腫瘤作用的多糖成分沒有 得到利用。本申請人在研究的過程中發(fā)現(xiàn)將方中斑蝥藥材采用醇提或者水提，熊膽粉直接入 藥，其余九味藥材先用水提或醇提得到粗提取物，然后進(jìn)行有機(jī)溶劑萃取、大孔樹脂吸附、 多次醇沉或者中空纖維柱超濾純化有效成分。上述工藝引入了藥材中所含有的大量多糖， 使療效有所提高，但是其對多糖沒有有效截留，這是由于多糖的分子量范圍很大，極小分子 的多糖藥用效率低，大分子量的多糖在注射給藥中又容易引起不良反應(yīng)；同時在大孔樹脂 洗脫純化步驟中，樹脂的選擇、洗脫液的選擇、洗脫速度的控制都極大地影響了對有效成分 的獲取。所以探索一種可行有效的中藥注射制劑的制備方法，以提高療效，降低中藥注射制 劑的不良反應(yīng)是醫(yī)藥工作者要解決的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種復(fù)方斑蝥總提取物制劑及其制備方法。本發(fā)明將藥 材分別進(jìn)行醇、水分提，然后采用無機(jī)陶瓷膜微濾、有機(jī)膜超濾等膜分離技術(shù)結(jié)合樹脂精制 處理相結(jié)合的方法對提取液進(jìn)行純化、分離和濃縮，富集有效成分，濾除雜質(zhì)，從而降低了 藥品的不良反應(yīng)，提高了療效。本發(fā)明所述復(fù)方斑蝥總提取物制劑是從斑蝥、人參、黃芪、刺五加、三棱、半枝蓮、莪術(shù)、山茱萸、女貞子、熊膽粉、甘草中提取出的具有藥用價值的提取物制成的制劑。按照重量配比計算，復(fù)方斑蝥總提取物制劑是用斑蝥4-12份、人參10-30份、黃芪 50-150份、刺五加50-150份、三棱16-48份、半枝蓮60-180份、莪術(shù)16-48份、山茱萸20-60 份、女貞子20-60份、熊膽粉0. 4-1. 2份、甘草10-30份按制成。優(yōu)選的配比為斑蝥7. 9份、人參19. 8份、黃芪99. 2份、刺五加99. 2份、三棱31. 7 份、半枝蓮119份、莪術(shù)31. 7份、山茱萸39. 7份、女貞子39. 7份、熊膽粉0. 8份、甘草19. 8 份其中復(fù)方斑蝥提取物是按下述方法制成的步驟1)斑蝥粉碎成粗粉，用75% -95%的乙醇超聲提取，提取液用水進(jìn)行沉淀，過 濾，濾液高速離心，離心液濃縮，干燥，粉碎，得斑蝥素提取物；步驟幻取人參切片，用乙醇回流提取，提取液回收乙醇，得人參提取液備用；藥渣 與除熊膽粉外的黃芪等七味藥材共水提取，提取液與人參醇提液混合，濃縮，過濾，精制，得 總皂苷提取物；步驟幻刺五加粉碎，用60%-80%的乙醇回流提取，合并提取液，回收乙醇，濃縮， 無機(jī)膜過濾，樹脂精制，得刺五加總苷提取物；步驟4)將上述刺五加總苷提取物、人參等共9味的總皂苷提取物混合均勻，用有 機(jī)膜進(jìn)行超濾，然后與斑蝥素提取物混合，再加入熊膽粉混勻，即得復(fù)方斑蝥總提取物。具體的制備方法為步驟1)取斑蝥，粉碎成40-60目的粗粉，放入超聲振蕩器中，加入6-10倍量 75% -95%的乙醇浸泡30-40分鐘后超聲振蕩提取，時間20-40分鐘，頻率30_50Hz，提取 2-3次，合并提取液，靜置，過濾，濾液減壓濃縮成稠膏，加入6-10倍量的水，攪拌，靜置，過 濾，濾液以10000轉(zhuǎn)/分以上的速度離心10-20分鐘，離心液減壓濃縮，干燥，粉碎，得斑蝥 素提取物；步驟2)取人參切片，用60%-90%乙醇浸泡10-14小時，然后回流提取2-4次，每 次加入乙醇6-10倍量、提取0. 5-2小時，合并提取液，回收乙醇，得人參醇提取液備用；藥渣 與除熊膽粉外的黃芪等七味藥材加4-6倍量水提取2-4次，每次0. 5-2小時，合并提取液， 與人參醇提取液混合，適當(dāng)濃縮，無機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過濾，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以 每秒0. 5-2ml過柱，用1-5倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用1_5倍柱體積0. 05-0.2% NaOH溶液洗脫，收集洗脫液調(diào)PH至4-6，得總皂苷提取物；步驟幻刺五加粉碎，用60%-80%乙醇回流提取2-4次，每次加入乙醇6-10倍量、 提取0. 5-2小時，合并提取液，回收乙醇，即得刺五加初提取液；將初提取液濃縮，無機(jī)陶瓷 膜進(jìn)行過濾，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒0. 5-2ml過柱，用1-5倍柱體積去離子 水洗脫，收集藥液，用1-5倍柱體積0. 05-0. 2% NaOH溶液洗脫，收集洗脫液調(diào)PH至4_6，即 得刺五加總苷提取物；步驟4)將上述刺五加總苷提取物、人參等共9味的總皂苷提取物混合均勻，用有 機(jī)膜進(jìn)行超濾，然后與斑蝥素提取物混合，再加入熊膽粉混勻，即得復(fù)方斑蝥總提取物。優(yōu)選的制備方法為步驟1)取斑蝥，粉碎成60目的粗粉，放入超聲振蕩器中，加入8倍量85%的乙醇 浸泡30分鐘后超聲振蕩提取，時間30分鐘，頻率30-50HZ，提取3次，合并提取液，靜置，過濾，濾液減壓濃縮成稠膏，加入8倍量的水，攪拌，靜置，過濾，濾液以10000轉(zhuǎn)/分以上的速 度離心15分鐘，離心液減壓濃縮，干燥，粉碎，得斑蝥素提取物；步驟2)取人參切片，用80%乙醇浸泡12小時，然后回流提取3次，每次加入乙醇 8倍量、提取1小時，合并提取液，回收乙醇，得人參醇提取液備用；藥渣與除熊膽粉外的黃 芪等七味藥材加5倍量水提取3次，每次1小時，合并提取液，與人參醇提取液混合，適當(dāng)濃 縮，無機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過濾，過濾時分多次加入2-3倍藥液體積量的水洗滌有效成分，過濾后 的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒Iml過柱，用2倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用2倍柱 體積0. 1 % NaOH溶液洗脫，收集洗脫液調(diào)PH至5，得總皂苷提取物；步驟幻刺五加粉碎，用70%乙醇回流提取3次，每次加入乙醇8倍量、提取1小 時，合并提取液，回收乙醇，即得刺五加初提取液；將初提取液濃縮，無機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過濾， 過濾時分多次加入2-3倍藥液體積量的水洗滌有效成分，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱， 以每秒Iml過柱，用2倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用2倍柱體積0. 1 % NaOH溶液洗 脫，收集洗脫液調(diào)PH至4-6，即得刺五加總苷提取物；步驟4)將上述刺五加總苷提取物、人參等共9味的總皂苷提取物混合均勻，用有 機(jī)膜進(jìn)行超濾，然后與斑蝥素提取物混合，再加入熊膽粉混勻，即得復(fù)方斑蝥總提取物。本發(fā)明的復(fù)方斑蝥總提取物制劑可以根據(jù)需要加入一種或多種藥學(xué)上可以接受 的載體，如稀釋劑、賦形劑、填充劑、崩解劑、濕潤劑、粘合劑、表面活性劑、吸收促進(jìn)劑、潤滑 劑等等，按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)方法，制備需要的劑型。本發(fā)明所述的復(fù)方斑蝥總提取物制劑包括膠囊劑、片劑、顆粒劑、口服液、丸劑、水 針、輸液、粉針和凍干粉針制劑等。優(yōu)選為膠囊劑。中藥材提取液的組分復(fù)雜，其中除了有效成分外還含有大量的雜質(zhì)，各組分的結(jié) 構(gòu)不同，分子大小也不一樣，使用膜技術(shù)(包括超濾膜、微濾膜、半透膜、反滲透膜等)可以 在原生物體系環(huán)境下實現(xiàn)物質(zhì)分離，可以高效濃縮富積產(chǎn)物，有效脫出雜質(zhì)。陶瓷膜微濾 是以新型無機(jī)陶瓷膜為濾過介質(zhì)的一種高效、節(jié)能、無污染的新型分離技術(shù)，具有分離精度 高，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，富集產(chǎn)物或濾除雜質(zhì)效率高，無需加熱濃縮、藥效成分不被破壞，縮短生 產(chǎn)周期，提高生產(chǎn)效率等優(yōu)點；樹脂純化是近年來國內(nèi)外新發(fā)展的處理技術(shù)，并在醫(yī)藥領(lǐng)域 特別是天然藥物精制中廣為運用，是提取精制中草藥中水溶性有效成分的一種有效方法。 因此，本發(fā)明采用無機(jī)陶瓷膜、聚酰胺樹脂和有機(jī)膜相結(jié)合的方法純化精制中藥注射制劑， 其特點為用物理方法取代了傳統(tǒng)的化學(xué)方法，可有效除去中藥提取液中的大分子物質(zhì)，同 時不引入其它的無機(jī)離子，較好地保持了中藥復(fù)方制劑的特點，能有效降低藥物的不良反 應(yīng)。本發(fā)明所述的技術(shù)方案是申請人經(jīng)過大量試驗研究而獲取的，主要試驗內(nèi)容如 下實驗例1、提取工藝分析1. 1刺五加提取工藝原艾迪注射液的工藝是將刺五加與黃芪等共同煎煮，本發(fā)明人將刺五加單獨進(jìn)行 處理，與原方法進(jìn)行比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)將刺五加單獨提取更有利于后續(xù)工藝處理。1.1.1提取方法選擇取刺五加藥材，分別采用加水煎煮、乙醇回流兩種方法進(jìn)行提取，以含量、提取液色澤、澄明度為指標(biāo)，考察藥材的提取率。水提、醇提刺五加效果評價表
工藝色澤含量(mg/L)澄明度水提深棕褐色768渾濁醇提棕紅1216澄明結(jié)果表明，采用醇提工藝，提取液經(jīng)處理后澄明度較好、色澤較淺，淺棕紅色；而水 提的刺五加在澄明度、色澤、含量等方面均較差，色澤較深，淺褐色。故選擇醇提。1.1.2提取工藝研究提取溶媒的加入量，提取時間和次數(shù)是影響提取工藝的重要因素，以紫丁香苷含 量為指標(biāo)，對以上參數(shù)進(jìn)行考察，以優(yōu)選最佳工藝條件。a.乙醇濃度考察樣品制備取刺五加藥材50g，粉碎，按下表濃度加入乙醇溶液，加熱回流3次，每 次1小時，合并回流液，濾過。乙醇濃度考察表
乙醇濃度50%60%70%80%90%含量(mg/L)8621174121312201225表中數(shù)據(jù)顯示，乙醇濃度為60% -80%時紫丁香苷幾乎已經(jīng)提取完全，其中70% 濃度為最佳，比較經(jīng)濟(jì)合理。b.提取時間考察取刺五加藥材50g共6份，切片，同等乙醇量分別加熱回流0. 5、1、1· 5、2、2· 5、3小 時，濾過，定容至一定體積，取樣測定。結(jié)果如下提取時間考察表
提取時間0. 511. 522. 53含量(mg/L)95210831135115711761181由表中數(shù)據(jù)可看出，提取2小時后，紫丁香苷含量無明顯改變，說明刺五加提取2 小時后，物質(zhì)的溶出已趨于飽和?？紤]到實際生產(chǎn)效率，優(yōu)選提取時間為1小時。c.乙醇用量的考察樣品制備取刺五加藥材50g共3份，依下表條件加入不同量70%乙醇，加熱回流 3次，每次1小時，濾過，收集濾液。結(jié)果如下乙醇用量考察表
權(quán)利要求
1.一種復(fù)方斑蝥總提取物制劑，按照重量配比計算，它是用斑蝥4-12份、人參10-30 份、黃芪50-150份、刺五加50-150份、三棱16-48份、半枝蓮60-180份、莪術(shù)16-48份、山 茱萸20-60份、女貞子20-60份、熊膽粉0. 4-1. 2份、甘草10-30份制成，其特征在于其中 復(fù)方斑蝥總提取物是按下述方法制成的步驟1)斑蝥粉碎成粗粉，用75% -95%的乙醇超聲提取，提取液用水進(jìn)行沉淀，過濾， 濾液高速離心，離心液濃縮，干燥，粉碎，得斑蝥素提取物；步驟幻取人參切片，用乙醇回流提取，提取液回收乙醇，得人參提取液備用；藥渣與除 熊膽粉外的黃芪等七味藥材共水提取，提取液與人參醇提液混合，濃縮，過濾，精制，得總皂 苷提取物；步驟3)刺五加粉碎，用60%-80%的乙醇回流提取，合并提取液，回收乙醇，濃縮，無機(jī) 膜過濾，樹脂精制，得刺五加總苷提取物；步驟4)將上述刺五加總苷提取物、人參等共9味的總皂苷提取物混合均勻，用有機(jī)膜 進(jìn)行超濾，然后與斑蝥素提取物混合，再加入熊膽粉混勻，即得復(fù)方斑蝥總提取物。
2.按照權(quán)利要求1所述的復(fù)方斑蝥總提取物制劑，其特征在于按照重量配比計算，它 是用斑蝥7. 9份、人參19. 8份、黃芪99. 2份、刺五加99. 2份、三棱31. 7份、半枝蓮119份、 莪術(shù)31. 7份、山茱萸39. 7份、女貞子39. 7份、熊膽粉0. 8份和甘草19. 8份制成的。
3.按照權(quán)利要求1或2所述復(fù)方斑蝥總提取物制劑，其特征在于所述復(fù)方斑蝥總提 取物的制備方法為步驟1)取斑蝥，粉碎成40-60目的粗粉，放入超聲振蕩器中，加入6-10倍量75 % -95 % 的乙醇浸泡30-40分鐘后超聲振蕩提取，時間20-40分鐘，頻率30-50HZ，提取2_3次，合 并提取液，靜置，過濾，濾液減壓濃縮成稠膏，加入6-10倍量的水，攪拌，靜置，過濾，濾液以 10000轉(zhuǎn)/分以上的速度離心10-20分鐘，離心液減壓濃縮，干燥，粉碎，得斑蝥素提取物；步驟2)取人參切片，用60% -90%乙醇浸泡10-14小時，然后回流提取2-4次，每次加 入乙醇6-10倍量、提取0. 5-2小時，合并提取液，回收乙醇，得人參醇提取液備用；藥渣與除 熊膽粉外的黃芪等七味藥材加4-6倍量水提取2-4次，每次0. 5-2小時，合并提取液，與人 參醇提取液混合，適當(dāng)濃縮，無機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過濾，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒 0. 5-2ml過柱，用1-5倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用1_5倍柱體積0. 05-0. 2% NaOH 溶液洗脫，收集洗脫液調(diào)PH至4-6，得總皂苷提取物；步驟幻刺五加粉碎，用60% -80%乙醇回流提取2-4次，每次加入乙醇6-10倍量、提 取0. 5-2小時，合并提取液，回收乙醇，即得刺五加初提取液；將初提取液濃縮，無機(jī)陶瓷膜 進(jìn)行過濾，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒0. 5-2ml過柱，用1-5倍柱體積去離子水 洗脫，收集藥液，用1-5倍柱體積0. 05-0. 2% NaOH溶液洗脫，收集洗脫液調(diào)PH至4_6，即得 刺五加總苷提取物；步驟4)將上述刺五加總苷提取物、人參等共9味的總皂苷提取物混合均勻，用有機(jī)膜 進(jìn)行超濾，然后與斑蝥素提取物混合，再加入熊膽粉混勻，即得復(fù)方斑蝥總提取物。
4.按照權(quán)利要求3所述復(fù)方斑蝥總提取物制劑，其特征在于所述復(fù)方斑蝥總提取物 的制備方法為步驟1)取斑蝥，粉碎成60目的粗粉，放入超聲振蕩器中，加入8倍量85%的乙醇浸泡30分鐘后超聲振蕩提取，時間30分鐘，頻率30-50HZ，提取3次，合并提取液，靜置，過濾，濾液減壓濃縮成稠膏，加入8倍量的水，攪拌，靜置，過濾，濾液以10000轉(zhuǎn)/分以上的速 度離心15分鐘，離心液減壓濃縮，干燥，粉碎，得斑蝥素提取物；步驟2、取人參切片，用80%乙醇浸泡12小時，然后回流提取3次，每次加入乙醇8倍 量、提取1小時，合并提取液，回收乙醇，得人參醇提取液備用；藥渣與除熊膽粉外的黃芪等 七味藥材加5倍量水提取3次，每次1小時，合并提取液，與人參醇提取液混合，適當(dāng)濃縮， 無機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過濾，過濾時分多次加入2-3倍藥液體積量的水洗滌有效成分，過濾后的 藥液直接上聚酰胺柱，以每秒Iml過柱，用2倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用2倍柱體 積0. 1 % NaOH溶液洗脫，收集洗脫液調(diào)PH至5，得總皂苷提取物；步驟3)刺五加粉碎，用70%乙醇回流提取3次，每次加入乙醇8倍量、提取1小時，合 并提取液，回收乙醇，即得刺五加初提取液；將初提取液濃縮，無機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過濾，過濾時 分多次加入2-3倍藥液體積量的水洗滌有效成分，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒 Iml過柱，用2倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用2倍柱體積0. 1 % NaOH溶液洗脫，收集 洗脫液調(diào)PH至4-6，即得刺五加總苷提取物；步驟4)將上述刺五加總苷提取物、人參等共9味的總皂苷提取物混合均勻，用有機(jī)膜 進(jìn)行超濾，然后與斑蝥素提取物混合，再加入熊膽粉混勻，即得復(fù)方斑蝥總提取物。
5.按照權(quán)利要求1所述復(fù)方斑蝥總提取物制劑，其特征在于所述的復(fù)方斑蝥總提取 物制劑包括膠囊劑、片劑、顆粒劑、口服液、丸劑、水針、輸液、粉針和凍干粉針制劑。
6.按照權(quán)利要求按照權(quán)利要求5所述復(fù)方斑蝥總提取物制劑，其特征在于所述的復(fù) 方斑蝥總提取物制劑為膠囊劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種復(fù)方斑蝥總提取物制劑及其制備方法，它是用斑蝥4-12份、人參10-30份、黃芪50-150份、刺五加50-150份、三棱16-48份、半枝蓮60-180份、莪術(shù)16-48份、山茱萸20-60份、女貞子20-60份、熊膽粉0.4-1.2份、甘草10-30份，將斑蝥醇提離心，人參、黃芪等分別進(jìn)行醇、水分提，提取液經(jīng)濃縮，無機(jī)陶瓷膜微濾，聚酰胺樹脂精制，再用有機(jī)膜進(jìn)行超濾，然后與斑蝥的提取液混合，再加入熊膽粉制成的不同制劑。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明將藥材分別進(jìn)行醇、水分提，采用膜分離技術(shù)與樹脂精制處理相結(jié)合的方法對提取液進(jìn)行純化、分離和濃縮，富集有效成分，有效除去中藥提取液中的大分子物質(zhì)，較好地保持了中藥復(fù)方制劑的特點，有效降低了藥物的不良反應(yīng)，從而提高和保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
文檔編號A61K35/413GK102078560SQ20091010289
公開日2011年6月1日 申請日期2009年11月26日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月26日
發(fā)明者竇啟玲 申請人:貴州益佰制藥股份有限公司