專利名稱：作為用于對(duì)抗癌癥的激酶抑制劑的2,4-二芳基取代的[1,8]二氮雜萘化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的[1，8] 二氮雜萘衍生物以及該化合物的用途，其中通過(guò)消耗ATP的蛋白如激酶進(jìn)行的信號(hào)傳導(dǎo)的抑制、調(diào)節(jié)和/或調(diào)控起作用，特別是涉及TGF-β受體激酶的抑制劑，以及該類化合物用于治療激酶誘導(dǎo)的疾病的用途。
現(xiàn)有技術(shù)結(jié)合ATP并利用其能量來(lái)改變構(gòu)象、使底物磷酸化和啟動(dòng)信號(hào)級(jí)聯(lián)的蛋白質(zhì)已知來(lái)自許多類型，如激酶、磷酸酶、侶伴蛋白或異構(gòu)酶。使用特定的工具和技術(shù)可以富集ATP-結(jié)合蛋白。 來(lái)自分為亞族酪氨酸激酶和絲氨酸蘇氨酸激酶的蛋白激酶大家族的部分清單包括 cAbl、Akt、ALK、ALKl 及其家族成員如 ALKl 和 ALK5、Axl、Aurora A 和 B、Btk、Dyrk2、EGFR、Erk、肝配蛋白受體如EphA2、FAK、FGF受體如FGFR3、胰島素受體IR和胰島素樣生長(zhǎng)因子受體 IGFlR、IKK2、Jak2、JNK3、cKit、LimK、VEGF 受體 1、2 和 3、Mekl、Met、P70s6K、PDGFR、PDK1、PI3K、PlkUPKDUbRaf, RSKl、Src 及其家族成員、TAKl、Trk A、B、C、Zap70。不同的激酶可以以本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的并且在查找具有可選名稱、分類、基因注解、序列和基因結(jié)構(gòu)的基因和蛋白質(zhì)報(bào)道的數(shù)據(jù)庫(kù)如Kinweb以及pdb 3D結(jié)構(gòu)信息的鏈接中可獲得的數(shù)種同義詞進(jìn)行描述。類似地，蛋白質(zhì)組學(xué)服務(wù)器將提供有關(guān)基因和蛋白質(zhì)、包括激酶的大量信息和分析和預(yù)測(cè)工具。作為癌癥標(biāo)志物的機(jī)理部分，Ser/Thr激酶和受體酪氨酸激酶(RTK)是細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)中必需的磷酸化酶。細(xì)胞周期、存活、增殖和細(xì)胞死亡是由細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)所調(diào)節(jié)的細(xì)胞過(guò)程，以允許組織生長(zhǎng)、再生和處于內(nèi)穩(wěn)態(tài)或退化。因此，一些激酶是哺乳動(dòng)物治療的靈敏靶標(biāo)。在不同的作為人激酶組的組成部分的激酶家族中，受體酪氨酸激酶KDR(也稱作VEGF受體2)在被VEGF胞外連接時(shí)可以刺激內(nèi)皮細(xì)胞存活和增殖。然后，配體結(jié)合可以導(dǎo)致胞內(nèi)磷酸化事件、即信號(hào)級(jí)聯(lián)，并最終導(dǎo)致增殖。嘗試用各種療法來(lái)抑制這種KDR信號(hào)傳導(dǎo)。其它對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞功能重要的激酶和配體是TIE2激酶和血管生成素(angiopoietins)、TOGF受體和TOGF以及P1GF、肝配蛋白受體激酶和肝配蛋白、尤其是EphB4和肝配蛋白-B2。此外，配體TGF β及其受體TGF β R、即Alkl/Alk5在維持血管完整性方面起重要作用。通過(guò)結(jié)合TGFβ II型受體，TGFβ可以活化內(nèi)皮細(xì)胞中的兩種不同的I型受體，即，對(duì)EC行為具有相反作用的EC-限制性的ALKl和廣泛表達(dá)的ALK5。ALKl通過(guò)SmadI/5轉(zhuǎn)錄因子刺激EC增殖和遷移，ALK5通過(guò)Smad2/3轉(zhuǎn)錄因子抑制那些功能。有利于EC增殖和片層形成的Alk5激酶抑制劑的一個(gè)實(shí)例是SB-431542。在血管生成中，抑制配體結(jié)合可能也是調(diào)節(jié)TGFii受體信號(hào)傳導(dǎo)的另一種方法。用2種肽表明了這一點(diǎn)，并且還對(duì)可溶性TGF β受體T PR-Fc進(jìn)行了討論?？?TGF β抗體、甚至是TGF β捕獲的應(yīng)用可以是抑制TGFii信號(hào)傳導(dǎo)的另一種策略。TGF^蛋白包含分子量為 25kDa的保守二聚蛋白家族，它們以無(wú)活性形式被遍在表達(dá)和分泌。響應(yīng)于適當(dāng)刺激的局部蛋白水解產(chǎn)生了活性TGFP配體。TGFP信號(hào)傳導(dǎo)參與大量的病癥和疾病、包括癌癥、心血管、骨、CNS、PNS、炎性和神經(jīng)變性病癥。在上皮細(xì)胞中，TGF0抑制細(xì)胞增殖。正常上皮細(xì)胞向癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)變伴隨有對(duì)TGF^的生長(zhǎng)-抑制響應(yīng)的減量調(diào)節(jié)，從而使得細(xì)胞避開(kāi)了 TGFii信號(hào)傳導(dǎo)的自分泌腫瘤抑制基因活性。癌細(xì)胞使TGFii的產(chǎn)生增加有助于癌細(xì)胞的侵害和轉(zhuǎn)移行為。TGFii可以誘導(dǎo)上皮-至-間充質(zhì)轉(zhuǎn)變(EMT)，其使得細(xì)胞變得有侵略性和遷移性。此外，TGF^產(chǎn)生增加也對(duì)基質(zhì)細(xì)胞和免疫細(xì)胞產(chǎn)生影響，從而為癌癥發(fā)展提供有利的微環(huán)境。TGFii蛋白通過(guò)T β R-I/II受體激酶及其Smad底物進(jìn)行信號(hào)傳導(dǎo)，但是也可以獨(dú)立于Smad如ERK MAP激 酶、ΡΙ3激酶、Rho-樣GTP酶、蛋白磷酸酶2Α和Par6進(jìn)行信號(hào)傳導(dǎo)?；罨腎型Ti3R激酶增加了細(xì)胞存活并且可以加速病理性細(xì)胞進(jìn)展。I和II型TGFβ受體(Τβ R Ι、Τβ R II)是呈遞細(xì)胞外配體(TGFP )結(jié)合受體的單次跨膜胞內(nèi)絲氨酸/蘇氨酸激酶。胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)通過(guò)自磷酸化、轉(zhuǎn)磷酸化和底物磷酸化進(jìn)行，導(dǎo)致靶基因表達(dá)的調(diào)節(jié)。Ti3R蛋白的克隆和基因組組織化是熟知的。Ti3R序列在WWW. uniprot. org作為TGFR1_人以登錄號(hào)P36897和作為TGF β R2_人以登記號(hào)P37173保存。在蛋白質(zhì)水平上，I型Τβ R被描述為在受體激酶結(jié)構(gòu)域之前含有富含Gly和Ser的區(qū)(GS結(jié)構(gòu)域)。T^R II在其自/磷酸化狀態(tài)是一種組成型活性激酶，其結(jié)合I型受體并使其在GS結(jié)構(gòu)域中磷酸化。T β受體(一種2個(gè)ΤβΙ I和2個(gè)MR II單元的配體TGF β -結(jié)合的(活化的)四聚體復(fù)合物)能夠使Smad (Smad 2和Smad 3)在其C-末端SSXS基元中作為底物被磷酸化，轉(zhuǎn)而與/被Smad4結(jié)合以易位至細(xì)胞核，在那里它們調(diào)節(jié)TGF β響應(yīng)基因。在I型和II型TPR中調(diào)節(jié)同數(shù)和異數(shù)復(fù)合物形成的不同結(jié)構(gòu)域是已知的。TPR I的GS結(jié)構(gòu)域中的突變可以是組成型活化的。對(duì)于I型TPR使用K232R、對(duì)于II型T β R使用K277R發(fā)現(xiàn)了激酶失活突變。在各種癌癥中發(fā)現(xiàn)了對(duì)于I型和II型Τβ R基因而言的基因中的失活或衰減突變。此外，T β R的信號(hào)傳導(dǎo)受磷酸化和去磷酸化機(jī)制、遍在蛋白化和蘇素化的調(diào)節(jié)，并且受胞吞作用和I型、但非II型受體TACE(aka ADAM-17，其介導(dǎo)細(xì)胞因子、GF受體和黏著蛋白的脫落并且在癌癥中高度表達(dá))的TACE-介導(dǎo)的胞外結(jié)構(gòu)域脫落的調(diào)節(jié)。已經(jīng)描述了 Ti3R I和FKBP12的X-射線共結(jié)晶結(jié)構(gòu)，并且討論了激酶活化過(guò)程。同時(shí)，可以在PDB數(shù)據(jù)庫(kù)中找到數(shù)種晶體結(jié)構(gòu)1B6C、IIAS、1PY5、IRff8、IVJY、2PJY和模型ITBI。就Ti3R II而言，僅胞外配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域的X-射線研究是公眾已知的1KTZ、1M9Z和IPLO (NMR)，而激酶結(jié)構(gòu)域無(wú)一是公眾已知的。TGFβ信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)涉及Smad，它是Τβ R I型受體激酶的唯一底物。人基因組編碼來(lái)自3個(gè)亞家族(R-、Co-、I-Smad)的8種Smad，它們?cè)谡麄€(gè)發(fā)育過(guò)程中和在成人組織中遍在表達(dá)。Smad不僅被I型TGFii受體激酶磷酸化，而且它們還受低聚化、遍在蛋白化和降解以及核質(zhì)穿梭(nucleoplasmatic shuttling)的調(diào)節(jié)。已經(jīng)證實(shí)ALK1和ALK5調(diào)節(jié)VEGF釋放，而TGF β增加VEGF表達(dá)，ΒΜΡ-9抑制VEGF表達(dá)。通過(guò)激活蛋白信號(hào)傳導(dǎo)的顯性負(fù)調(diào)控抑制，用截短的ALK4同工型進(jìn)行的研究表明這種I型激酶在垂體瘤的生長(zhǎng)和發(fā)展中有牽連。ALK4在胚胎發(fā)育、中胚層誘導(dǎo)的調(diào)節(jié)、胚線形成、原腸胚形成、主軸形成和左右軸確定中的時(shí)空窗作用仍然無(wú)法闡明ALK4在成人中的作用。在大規(guī)模的人候選者篩選中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)顯性負(fù)調(diào)控的ALK2等位基因與先天性心臟病如不適當(dāng)?shù)姆渴腋舭l(fā)育相關(guān)。ALKl結(jié)合T β R-II和內(nèi)皮糖蛋白/CD105/T β R-III并且使SMAD-1和-5磷酸化。已經(jīng)證實(shí)了內(nèi)皮糖蛋白的作用和尤其是通過(guò)兩種變體L-和S-內(nèi)皮糖蛋白進(jìn)行的TGF3信號(hào)傳導(dǎo)的差異調(diào)節(jié)。ALKl在血管重塑中發(fā)揮作用，并且在平衡發(fā)炎組織、傷口和腫瘤中的內(nèi)皮的活化狀態(tài)中發(fā)現(xiàn)了 ALKl和ALK5。ALKl在肺、胎盤(pán)和其它 高度血管化的組織中表達(dá)，并且選擇性地在EC上發(fā)現(xiàn)。此外，在神經(jīng)元上檢測(cè)到了 ALK1。II型T β R表達(dá)缺失與人乳癌中的高腫瘤等級(jí)相關(guān)，顯示它促進(jìn)乳癌發(fā)展。腫瘤生長(zhǎng)可以表征為歸因于RTK信號(hào)傳導(dǎo)由于突變或其它遺傳學(xué)改變而受干擾的失控、即自發(fā)細(xì)胞生長(zhǎng)。在32000個(gè)參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的人編碼基因中，超過(guò)520種蛋白激酶和130種蛋白磷酸酶對(duì)蛋白磷酸化發(fā)揮緊密和可逆的控制。發(fā)現(xiàn)對(duì)酪氨酸和對(duì)絲氨酸/蘇氨酸磷酸化具有選擇性。在人基因組中存在90種以上已知的PTK基因，超過(guò)50種編碼分布在20個(gè)亞家族中的跨膜RPTK，且32種編碼10個(gè)亞家族中的胞質(zhì)非受體ΡΤΚ。例如，Trk A在甲狀腺癌和成神經(jīng)細(xì)胞瘤中具有重要作用，EphB2和B4在癌癥中過(guò)表達(dá)，Axl和Lck在白血病中過(guò)表達(dá)。對(duì)用于治療癌癥的TGF0抑制劑進(jìn)行了綜述。存在另外的適應(yīng)癥和病理學(xué)情況，通過(guò)抗血管生成、血管形成、穩(wěn)定、維持和退化而間接靶向癌癥、創(chuàng)傷愈合和炎癥。血管生成，即由預(yù)先存在的血管發(fā)育出新血管，在胚胎發(fā)育、器官發(fā)生和創(chuàng)傷愈合中的血管發(fā)育中是關(guān)鍵的。除了那些生理學(xué)過(guò)程外，血管生成對(duì)腫瘤生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移和炎癥而言是重要的，導(dǎo)致疾病如乳房、子宮頸、子宮體(子宮內(nèi)膜)、卵巢、肺、支氣管、肝、腎、皮膚、口腔和咽、前列腺、胰腺、膀胱、血細(xì)胞、結(jié)腸、直腸、骨、腦、中樞和外周神經(jīng)纖維的腫瘤，例如乳癌、結(jié)腸直腸癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、淋巴瘤等，和炎性疾病如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和銀屑病，或眼病如黃斑變性和糖尿病性視網(wǎng)膜病。近期討論了血管形成的分子機(jī)制和腫瘤發(fā)生中的血管生成開(kāi)關(guān)。Eph受體酪氨酸激酶調(diào)節(jié)血管模式，Eph B4和Eph BI調(diào)節(jié)肝配蛋白配體如肝配蛋白-B2信號(hào)傳導(dǎo)。EphB4控制出生后血管生成過(guò)程中的血管形態(tài)發(fā)生。通過(guò)血管生成或血管發(fā)生而形成的初生脈管系統(tǒng)的成熟需要壁細(xì)胞(mural cells)(周細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞)、細(xì)胞外基質(zhì)生成和用于結(jié)構(gòu)支持的血管壁專門化和血管功能調(diào)節(jié)。那些過(guò)程的調(diào)節(jié)以及內(nèi)皮細(xì)胞與其壁細(xì)胞之間的相互作用涉及數(shù)種配體激酶對(duì)，如VEGF/VEGFR1、VEGFR2、肝配蛋白 B2/EphB4、PDGFR/PDGFRP、血管生成素 /TIE2、TGF β /TGF β R-ALK1/ALK5。血管組裝、毛細(xì)血管形成、萌發(fā)、穩(wěn)定和失穩(wěn)定、甚至退化受到那些激酶和配體的功能平衡的調(diào)節(jié)。淋巴管生成(Iymphangiogenesis)通過(guò)VEGF受體3及其配體VEGF C和D以及ΤΙΕ2及其配體血管生成素1、2進(jìn)行調(diào)節(jié)。抑制VEGFR3和/或ΤΙΕ2信號(hào)傳導(dǎo)和由此抑制淋巴管形成可以是終止腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的手段。有關(guān)病理性血管形成的整體信息產(chǎn)生了有關(guān)血管生成抑制的假設(shè)，它對(duì)于治療癌癥和其它障礙而言是有希望的策略。通過(guò)Alkl、內(nèi)皮糖蛋白、Alk5和TPRII KO小鼠證明了 TGFP受體在血管生成過(guò)程中的重要性，所述小鼠均顯示出因血管缺陷導(dǎo)致的胎胚致死表型。此外，在EC中，TGF3配體能夠刺激兩條途徑，Alkl的Smad 1/5/8磷酸化下游和Alk5的Smad2/3磷酸化下游。兩條途徑彼此串?dāng)_ 。具有L45袢突變的Alk5敲入小鼠顯示出有缺陷的Smad活化。TGF3/Alk5信號(hào)傳導(dǎo)在ECs被ALKl拮抗。TGF^以至少5種與TGFa無(wú)關(guān)的同工型(TGFP 1-5)存在，其中TGFP I是普遍的形式。TGFii是細(xì)胞和生理過(guò)程、包括增殖、分化、遷移、細(xì)胞存活、血管生成和免疫監(jiān)視的遍在和重要調(diào)節(jié)劑。由于癌細(xì)胞表達(dá)腫瘤特異性抗原，所以它們通常將被免疫系統(tǒng)所識(shí)別并且將被破壞。在腫瘤發(fā)生過(guò)程中，癌細(xì)胞獲取通過(guò)多種機(jī)制逃避這種免疫監(jiān)視的能力。主要的機(jī)制是癌細(xì)胞介導(dǎo)的通過(guò)分泌TGFii (—種有效的免疫抑制細(xì)胞因子)產(chǎn)生的免疫抑制。TGF3具有將腫瘤抑制基因轉(zhuǎn)換成腫瘤啟動(dòng)子和促轉(zhuǎn)移因子(premetastatic factor)的潛能。TGF^功能被四聚受體復(fù)合物傳遞，所述的四聚受體復(fù)合物由兩組跨膜絲氨酸-蘇氨酸激酶受體(稱為I型和II型受體)組成，它們?cè)阢暯优潴w的TGFii超家族成員后被活化，所述的TGF β超家族成員被分成2組，即TGF β /激活蛋白和BMP/⑶F分支。TGF β I、2和3屬于配體的TGFii/激活蛋白分支。這些結(jié)合事件說(shuō)明了在不同細(xì)胞類型中被差異調(diào)節(jié)的下游響應(yīng)。在皮膚成纖維細(xì)胞中在TGFβ RII的可誘導(dǎo)出生后缺失中描述了成纖維細(xì)胞在創(chuàng)傷修復(fù)期間在皮膚的間充質(zhì)-上皮相互作用中的重要性。在創(chuàng)傷修復(fù)期間，配體TGF3及其受體RI和RII型的表達(dá)在時(shí)間上和空間上是受調(diào)節(jié)的。由⑶34+急性髓樣白血病細(xì)胞系、ECs、活化血小板和T-細(xì)胞表達(dá)的CD109(GPI連接的細(xì)胞表面抗原)是人角質(zhì)形成細(xì)胞中T β R系統(tǒng)的組成部分。毛囊凸起區(qū)域中的濾泡干細(xì)胞(Follicle Stem Cells, FSC)在毛發(fā)周期和創(chuàng)傷愈合過(guò)程中可以產(chǎn)生多個(gè)譜系。Smad4(TGFi3信號(hào)傳導(dǎo)的常見(jiàn)介體)是FSC維持的組成部分。在小鼠皮膚中進(jìn)行的Smad4K0研究顯示了毛囊缺陷和鱗狀細(xì)胞癌形成。TGFii的潛在抑制延緩了毛囊中的退化期進(jìn)程。TGFii在退化期期間的角質(zhì)形成細(xì)胞細(xì)胞凋亡中的充分描述的作用可能涉及生長(zhǎng)期特異性的毛囊組分，其還涉及相互局限化的Τβ RI 和 Τβ RIL·已知TGFP在數(shù)種器官如皮膚、腎、心臟和肝的纖維化中的異?；钚?，在纖維化疾病中使用T β R抑制劑是合理的。系統(tǒng)性硬化病(硬皮病)被證明是TGF β /受體RI依賴性的，所述系統(tǒng)性硬化病(硬皮病)是一種導(dǎo)致皮膚和內(nèi)部器官纖維化的復(fù)雜的結(jié)締組織障礙。肺動(dòng)脈高壓(PAH)是一種潛在地可以用ALK5抑制劑治療的病癥，因?yàn)橹車鷦?dòng)脈平滑肌細(xì)胞的異常增殖受活化的TGFii受體所驅(qū)動(dòng)。在大鼠中用SB525334進(jìn)行的治療獲得了成功。使用ΙΝ-1233還顯示了在大鼠中的益處。腎纖維化可以導(dǎo)致糖尿病。TPR激酶抑制劑衍生物的有益副作用以及TGFP信號(hào)傳導(dǎo)與丙型肝炎病毒(HCV)復(fù)制之間的相關(guān)性是已知的。TGFii信號(hào)傳導(dǎo)作為轉(zhuǎn)移型乳癌中新出現(xiàn)的干細(xì)胞靶標(biāo)進(jìn)行了討論。TGFP 1、2、3及其受體在神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞中表達(dá)。可以預(yù)計(jì)使用TGFii信號(hào)傳導(dǎo)調(diào)節(jié)劑可改善病理結(jié)果。心血管疾病如動(dòng)脈粥樣硬化、心肌缺血和心臟重塑中的TGF β超家族是心血管研究問(wèn)題的焦點(diǎn)。在WO 2009/004753中公開(kāi)了有關(guān)TGF β的生物化學(xué)的進(jìn)一步細(xì)節(jié)，該文獻(xiàn)完整引入本發(fā)明的公開(kāi)內(nèi)容作為參考。此外，RON激酶是腫瘤生物學(xué)中有價(jià)值的祀標(biāo)(Wagh等人(2008) AdvCancerRes. 100:1-33)。Met-相關(guān)性受體酪氨酸激酶RON涉及腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。RON受體是細(xì)胞表面受體酪氨酸激酶的Met家族成員，主要在上皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞上表達(dá)。RON的生物學(xué)響應(yīng)通過(guò)結(jié)合其配體、即肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子樣蛋白/巨噬細(xì)胞刺激蛋白(HGFL)來(lái)介導(dǎo)。HGFL主要由肝細(xì)胞作為無(wú)活性前體進(jìn)行合成和分泌，在細(xì)胞表面被活化。HGFL與RON的結(jié)合使RON活化并誘導(dǎo)了各種胞內(nèi)信號(hào)級(jí)聯(lián)放大，后者導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)、移動(dòng)和侵入。近期研究已經(jīng)記錄了各種人類癌癥、包括乳癌、結(jié)腸癌、肝癌、胰腺癌和膀胱癌中的RON過(guò)表達(dá)。而且，臨床研究也已經(jīng)證實(shí)，RON過(guò)表達(dá)與惡化的患者結(jié)果和轉(zhuǎn)移相關(guān)。在轉(zhuǎn)基因小鼠中RON的強(qiáng)制性過(guò)表達(dá)導(dǎo)致肺和乳腺中腫瘤發(fā)生并且伴有轉(zhuǎn)移性傳播。盡管RON過(guò)表達(dá)顯示是很多人類癌癥的標(biāo)志，但是RON誘導(dǎo)腫瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移的機(jī)制仍然不清楚。目前采取了數(shù)種策略來(lái)抑制作為潛在治療靶標(biāo)的RON ;目前的策略包括使用RON阻斷蛋白、小干擾RNA(SiRNA)、單克隆抗體和小分子抑制劑。總之，這些數(shù)據(jù)表明R0N是腫瘤發(fā)生中的關(guān)鍵因素，并且單獨(dú)或與當(dāng)前的治療組合的這種蛋白的抑制可以證明在治療癌癥患者中有益。 此外，TAKl或CHK2是免疫和細(xì)胞損傷響應(yīng)途徑中有價(jià)值的靶標(biāo)(Delaney &Mlodzik(2006)Cell Cycle 5 (24) :2852-5，描述了 TGF-β 活化的激酶-I 和對(duì) TAKl 在發(fā)育和免疫中的不同作用的新洞察。大量近期的公開(kāi)文獻(xiàn)已經(jīng)在從蒼蠅到小鼠范圍的模型系統(tǒng)中檢驗(yàn)了 TAKl的作用。TAKl顯示在響應(yīng)于各種上游信號(hào)、包括炎性分子和發(fā)育線索的信號(hào)傳導(dǎo)連接中起作用，而不是進(jìn)入清楚定義的線性分子途徑。然后，TAKl經(jīng)由JNK、NFk B和TCFP-連環(huán)蛋白信號(hào)傳導(dǎo)影響從先天免疫應(yīng)答到模式化和分化的許多下游過(guò)程。這些功能上的差異并非簡(jiǎn)單地是細(xì)胞類型的問(wèn)題。例如，在特定細(xì)胞中的NFk B信號(hào)傳導(dǎo)可以需要或不需要ΤΑΚ1，這取決于活化信號(hào)的性質(zhì)。有趣的是，TAKl的多任務(wù)功能性在脊椎動(dòng)物與無(wú)脊椎動(dòng)物種屬之間是保守的。TAKl在多實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)中的研究可能能夠揭示該激酶的更多作用，并且還闡明了其它信號(hào)傳導(dǎo)分子執(zhí)行不同信號(hào)傳導(dǎo)作用的機(jī)制。此外，限制點(diǎn)激酶Chkl和Chk2是Ser/Thr蛋白激酶，它們作為細(xì)胞DNA損傷響應(yīng)途徑中的關(guān)鍵調(diào)節(jié)激酶起作用，從而在DNA損傷的存在下限制細(xì)胞周期進(jìn)程。研發(fā)用于治療癌癥的限制點(diǎn)激酶抑制劑已經(jīng)成為過(guò)去十年中藥物研發(fā)中的主要目標(biāo)，正如自2005年后期以來(lái)進(jìn)入臨床試驗(yàn)的三種限制點(diǎn)激酶抑制劑所驗(yàn)證的那樣。在近期的專利文獻(xiàn)中已經(jīng)出現(xiàn)了大量在化學(xué)上不同的Chkl和Chk2激酶抑制劑。鑒定了限制點(diǎn)激酶抑制劑的共同結(jié)構(gòu)基元。目前在臨床研發(fā)中存在三種限制點(diǎn)激酶抑制劑，其為由制藥工業(yè)進(jìn)行的持續(xù)努力以鑒定用于限制點(diǎn)激酶抑制的新骨架(Janetka Mshwell (2009) Expert Opin TherPat. 200919(2) :165-97)。另一些現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)如下WO 2000/012497涉及作為藥物的喹唑啉衍生物。該國(guó)際專利申請(qǐng)沒(méi)有公開(kāi)[1，8]
二氮雜萘衍生物。WO 2000/058307涉及作為神經(jīng)激肽_3受體配體的[1，8] 二氮雜萘化合物。但是，其[1，8] 二氮雜萘部分的取代方式與本發(fā)明不同。WO 2003/097615涉及用TGF-β抑制劑來(lái)治療纖維增生性病癥。該國(guó)際專利申請(qǐng)沒(méi)有公開(kāi)[1，8] 二氮雜萘衍生物。WO 2004/010929描述了一些用TGF-β抑制劑來(lái)改善肺功能的方法。該國(guó)際專利申請(qǐng)沒(méi)有公開(kāi)[1，8] 二氮雜萘衍生物。
WO 2005/065691涉及用TGF-β來(lái)治療惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤。該國(guó)際專利申請(qǐng)沒(méi)有公開(kāi)[1，8] 二氮雜萘衍生物。US 2006/286408涉及[1，8] 二氮雜萘化合物以及使用該化合物的有機(jī)發(fā)光裝置。但是，其[1，8] 二氮雜萘部分的取代方式與本發(fā)明不同。WO 2007/016525描述了一些用于預(yù)防和治療復(fù)雜疾病的藥物組合物以及它們用可插入的醫(yī)學(xué)裝置進(jìn)行的傳遞。該國(guó)際專利申請(qǐng)沒(méi)有公開(kāi)[1，8] 二氮雜萘衍生物。WO 2010/033906涉及用小分子化合物對(duì)多功能干細(xì)胞進(jìn)行的有效誘導(dǎo)。該國(guó)際專利申請(qǐng)沒(méi)有公開(kāi)[1，8] 二氮雜萘衍生物。國(guó)際專利申請(qǐng)PCT/EP2010/007743涉及作為TGF-β抑制劑等的芳基-[1，8] 二氮雜萘衍生物。但是，其[1，8] 二氮雜萘部分的取代方式與本發(fā)明不同?！?br> 本申請(qǐng)中引用的任何參考資料都不能被視為承認(rèn)該參考資料是本申請(qǐng)的相關(guān)現(xiàn)有技術(shù)。本發(fā)明的描述本發(fā)明的目的是要提供新的[1，8] 二氮雜萘衍生物。一方面，通過(guò)提供式(I)的化合物以及其生理學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)體(包括它們所有比例的混合物)出人意料地實(shí)現(xiàn)了本發(fā)明的目的
^w-W2 N N R1 (j)其中m W4彼此獨(dú)立地表示N或CR3，W5 表示N或C,優(yōu)選表示N或CR3,更優(yōu)選表示N,Z 表示 C=C、NR4、C=N、O、S、CH、N=N 或 N=C，優(yōu)選表示 C=C、N (R4) CO、NR4、C=N、0、CON (R4)、S、CH、N=N 或 N=C，更優(yōu)選表示 C=C、N (R4) CO、NR4、C=N、0、CON (R4)、S、CH 或 N=N,R1 表示具有5、6、7、8、9或10個(gè)C原子的單環(huán)芳基或具有5、6、7、8、9、10、11、
12、13或14個(gè)C原子和1、2、3、4或5個(gè)N、0和/或S原子的單環(huán)雜芳基，其各自可獨(dú)立地被至少一個(gè)選自Y、Hal.CN, CF3或OY的取代基取代，R2 表示 H、Hal、A、- (CYY) n_0Y、- (CYY) η_ΝΥΥ、- (CYY) n_Het、SY、N02、CN、COOY, -CO-NYY、-NY-COA、-NY-SO2A、-SO2-NYY ,S(O)mA, -CO-He t、-0 (CYY) n_0Y、-0 (CYY) n_NYY、-0 (CYY) n-Het、-NH-COOA, -NH-CO-NYY, -NH-COO- (CYY) n_NYY、-NH-COO- (CYY) n_Het、-NH-CO-NH- (CYY)n-NYY、-NH-CO-NH (CYY) n_Het、-OCO-NH- (CYY) n_NYY、-0C0-NH- (CYY) n_Het、CHO、COA、=S、=NY、=0或具有5、6、7、8、9或10個(gè)(原子的單環(huán)芳基或具有5、6、7、8、9、10、11、12、13或14個(gè)C原子和1、2、3、4或5個(gè)N、O和/或S原子的單環(huán)雜芳基，各單環(huán)芳基和單環(huán)雜芳基可獨(dú)立地被至少一個(gè)選自Y、Hal.CN, CF3或OY的取代基取代，
R3 表示 Η、0Υ、ΝΥΥ 或 NY-C0Y，優(yōu)選表示 H、0Y、NYY、NY-C OY,NY-C O- (CYY)n-OY,NY-C OY-NYY, NY- (CYY) η_ΝΥΥ、O- (CYY) η_ΝΥΥ 或 O- (CYY) n_Het，R4 表示 Η、Α、_ (CYY)tj-Het 或-(CYY)q-NYY,優(yōu)選表示 Η、Α、_ (CYY) Q-Het、-(CYY)。-NYY 或-(CYY)tj-OY,R5 表示 H,優(yōu)選表示 H、A、0Y、NYY 或 Het,Y 表示H或A，在-(CYY) η/。-的情況中，Y還優(yōu)選表示H、A或0Η，
A 表示具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個(gè)C原子的直鏈或支鏈的烷基，其中I、2、3、4、5、6或7個(gè)H原子可彼此獨(dú)立地被Hal代替和/或其中一個(gè)或兩個(gè)CH2基團(tuán)可彼此獨(dú)立地被O、S、SO、SO2^-CY=CY-基團(tuán)和/或-C = C-基團(tuán)代替；或者，A表示具有3、4、5、6、7或8個(gè)C-原子的環(huán)烷基，Het 表示具有3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20個(gè)(原子和1、2、3、4或5個(gè)N、0和/或S原子的飽和或不飽和的、單_、二-或三環(huán)雜環(huán)，其可被至少一個(gè)選自Y、Hal.CN, CF3> OY的取代基取代，Hal 表示 F、CUr 或 I,m 表示 O、I 或 2，η 表示 0、1、2、3 或 4，ο 表示2、3或4，優(yōu)選表示0、1、2、3或4，更優(yōu)選地，如果2是殿4，則0另外地表示2、3或4，P 表示 0、1、2 或 3，q 表示 0、1、2 或 3，優(yōu)選地，條件是不包括在PCT/EP2010/007743中公開(kāi)的如下化合物(a) 2-(5-氯-2-氟-苯基)-4_異喹啉-4-基-[1，8] 二氮雜萘，(b) 4-異喹啉-4-基-2-(6-甲基-吡啶-2-基)_[1，8] 二氮雜萘，(c)4-[2_(2-氟-苯基)_[1，8] 二氮雜萘-4-基]-[2，7] 二氮雜萘-1-基胺，(d) 4-[2-(2, 5_ 二氟-苯基)-[1，8] 二氮雜萘-4-基]-[2，7] 二氮雜萘-I-基胺，(e)N-{4_[2_(2_氟-苯基)_[I, 8] 二氮雜萘-4-基]-[2，7] 二氮雜萘-l-基}-乙酰胺，(f) 2_ (2_ 氟-苯基)-4_ [2，7] 二氮雜萘-4-基-[1，8] 二氮雜萘，(g)5-[2_(2-氟-苯基)_[1，8] 二氮雜萘-4-基]-[2，7] 二氮雜萘-1-基胺，(h)5-[2_(5_ 氯-2-氟-苯基)_[1，8] 二氮雜萘-4-基]-[1，7] 二氮雜萘，(i)4-[2_(5_ 氯-2-氟-苯基)_[1，8] 二氮雜萘-4-基]-[2，7] 二氮雜萘-1-基胺。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，提供了式(I)的化合物以及其生理學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)體，包括其所有比例的混合物，其進(jìn)一步的條件是W5表示N和 / 或 Z 排除 N=C,即，Z 表示 C=C, N (R4) CO、NR4、C=N, O、CON (R4)、S、CH 或 N=N。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，提供了式(I)以及以上實(shí)施方案的化合物，以及其生理學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)體，包括其所有比例的混合物，其中Z選自(a)C=C，或
(b) N (R4)CO,或(c) NR4，或(d) C=N,或(e)0，或(f) CON (R4)，并且優(yōu)選地是C=C。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，提供了式⑴以及以上實(shí)施方案的化合物，以及其生理學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)體，包括其所有比例的混合物，其中 (a)彼此獨(dú)立地表示CR3，且W2 表示 N，或(b)W2、W3、W4彼此獨(dú)立地表示CR3，且W1 表示 N，或(C)W^W2'W4彼此獨(dú)立地表示CR3，且W3 表示 N，或((Dff1, W2, ff3> W4彼此獨(dú)立地表示CR3，或(e) W:、W3彼此獨(dú)立地表示CR3，且W2^ff4 表示 N。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，提供了式⑴以及以上實(shí)施方案的化合物，以及其生理學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)體，包括其所有比例的混合物，其中R1表示苯基，其可被至少一個(gè)選自Y、Hal.CN, CF3或OY的取代基取代。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，提供了式⑴以及以上實(shí)施方案的化合物，以及其生理學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)體，包括其所有比例的混合物，其中R2 不存在或者表示 H、A、Hal、-(CYY)n_0Y、NO2、-(CYY)n_NYY、-(CYY)n-Het、-0- (CYY)n-Het, -0- (CYY)n-OY, -0- (CYY)n-NYY, NY- (CYY)n-NYY, NY-COY 或具有 5、6、7、8、9、10、11、12、13或14個(gè)C原子和1、2、3、4或5個(gè)N、0和/或S原子的單環(huán)雜芳基，其中單環(huán)雜芳基可彼此獨(dú)立地被至少一個(gè)選自Y、Hal.CN, CF3或OY的取代基取代。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，提供了式⑴以及以上實(shí)施方案的化合物，以及其生理學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)體，包括其所有比例的混合物，其中%、W3、W4彼此獨(dú)立地表示CR3，且W2 表示 N，或W2、W3、W4彼此獨(dú)立地表示CR3，或W1^ff3 彼此獨(dú)立地表示CR3，且W2、W4 彼此獨(dú)立地表示N， Z 表示 C=C、NR4、C=N、O 或 N=C，R1 表示苯基，其可被至少一個(gè)選自Y、Hal、CN、CF3或OY的取代基取代，并且R2 不存在或者表示 H、A、_ (CYY) n_0Y、NO2、_ (CYY)n-NYY 或-O (CYY) n_Het。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，提供了式(I)以及以上實(shí)施方案的化合物，以及其生理學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)體，包括其所有比例的混合物，其中%、W3、W4彼此獨(dú)立地表示CR3，且
W2> W5 表不 N,Z 表示C=C,并且R1 表示苯基，其可被至少一個(gè)選自Y、Hal、CN、CF3或OY的取代基取代。在另一方面，通過(guò)提供選自下面的化合物以及其生理學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)體(包括其所有比例的混合物)出人意料地實(shí)現(xiàn)了本發(fā)明的目的
權(quán)利要求
1.式(I)的化合物以及其生理學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)體，包括其所有比例的混合物
2.權(quán)利要求I的化合物以及其生理學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)體，包括其所有比例的混合物，另一個(gè)條件是W5表示N和/或Z排除N=C,即Z表示C=C、N(R4) CO、NR4、C=N、0、C0N(R4)、S、CH 或 N=N。
3.權(quán)利要求I或2的化合物以及其生理學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)體，包括其所有比例的混合物，其中Z選自(a)C=C,或(b)N(R4)CO，或(c)NR4，或(d)C=N,或(e)0，或 (f)CON(R4)1 并且優(yōu)選地是C=C。
4.權(quán)利要求I至3中任意一項(xiàng)的化合物以及其生理學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)體，包括其所有比例的混合物，其中 (a)W1、W3、W4彼此獨(dú)立地表示CR3，且 W2 表示N,或 (b)H W4彼此獨(dú)立地表示CR3，且 W1 表示N,或 (c)W1、W2、W4彼此獨(dú)立地表示CR3，且 W3 表示N,或 (d)W:、W2、W3、W4彼此獨(dú)立地表示CR3，或 (G)W1^ff3 彼此獨(dú)立地表示CR3，且 W2^ff4 表示 N。
5.權(quán)利要求I至4中任意一項(xiàng)的化合物以及其生理學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)體，包括其所有比例的混合物，其中R1表示苯基，其可被至少一個(gè)選自Y、Hal、CN、CF3或OY的取代基取代。
6.權(quán)利要求I至5中任意一項(xiàng)的化合物以及其生理學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)體，包括其所有比例的混合物，其中R2 不存在或者表示 H、A、Hal、- (CYY) n_0Y、NO2、- (CYY) n_NYY、_ (CYY) n-Het、-0_ (CYY)n-Het、-0-(CYY)n-0Y、-0-(CYY)n_NYY、NY-(CYY)n_NYY、NY-COY 或具有 5、6、7、8、9、10、11、12、13或14個(gè)C原子和1、2、3、4或5個(gè)N、O和/或S原子的單環(huán)雜芳基，其中單環(huán)雜芳基可彼此獨(dú)立地被至少一個(gè)選自Y、Hal.CN, CF3或OY的取代基取代。
7.權(quán)利要求I至6中任意一項(xiàng)的化合物以及其生理學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)體，包括其所有比例的混合物，其中 W1、W3、W4彼此獨(dú)立地表示CR3，且 W2>W5 表示 N， Z表示C=C,并且 R1 表示苯基，其可被至少一個(gè)選自Y、Hal、CN、CF3或OY的取代基取代。
8.權(quán)利要求I至7中任意一項(xiàng)的化合物以及其生理學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)體，包括其所有比例的混合物，所述化合物選自
9.制備式(I)化合物的方法，其包括如下步驟(a)使式(II)的化合物
10.權(quán)利要求I至8中任意一項(xiàng)的化合物用于抑制消耗ATP的蛋白，優(yōu)選TGF-β受體激酶、RON、TAKl、PKDl、MINKl、SAPK2-a , SAPK2- β 和 / 或 CHK2 的用途。
11.包含至少一種權(quán)利要求I至8中任意一項(xiàng)的化合物的藥物。
12.用于治療和/或預(yù)防選自下列的生理學(xué)和/或病理生理學(xué)狀況的包含至少一種權(quán)利要求I至8中任意一項(xiàng)的化合物的藥物“癌癥、腫瘤、惡性腫瘤、良性腫瘤、實(shí)體瘤、肉瘤、癌、過(guò)度增殖性病癥、類癌瘤、尤因氏肉瘤、卡波濟(jì)肉瘤、腦部腫瘤、源于腦和/或神經(jīng)系統(tǒng)和/或腦脊膜的腫瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胃癌、腎癌、腎細(xì)胞癌、前列腺癌癥、前列腺癌、結(jié)締組織腫瘤、軟組織肉瘤、胰腺腫瘤、肝腫瘤、頭部腫瘤、頸部腫瘤、喉癌、食道癌、甲狀腺癌、骨肉瘤、視網(wǎng)膜成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胸腺瘤、睪丸癌、肺癌、肺腺癌、小細(xì)胞肺癌、支氣管癌、乳癌、乳房癌、腸癌、結(jié)腸直腸腫瘤、結(jié)腸癌、直腸癌、婦科腫瘤、卵巢腫瘤、子宮癌、宮頸癌癥、宮頸癌、子宮體癌、宮體癌、子宮內(nèi)膜癌、膀胱癌、生殖泌尿道癌、膀胱癌、皮膚癌、上皮腫瘤、鱗狀上皮癌、基底細(xì)胞癌、棘狀細(xì)胞癌、黑素瘤、眼內(nèi)黑素瘤、白血病、單核細(xì)胞白血病、慢性白血病、慢性髓細(xì)胞性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、急性白血病、急性髓細(xì)胞性白血病、急性淋巴細(xì)胞性白血病、淋巴瘤、眼睛疾病、脈絡(luò)膜新血管形成、糖尿病性視網(wǎng)膜病、炎性疾病、關(guān)節(jié)炎、神經(jīng)變性、移植排斥、轉(zhuǎn)移性生長(zhǎng)、纖維變性、再狹窄、HIV感染、動(dòng)脈粥樣硬化、炎癥和傷口愈合、血管生成、心血管系統(tǒng)、骨、CNS和/或PNS的病癥?！?br> 13.權(quán)利要求11至12中任意一項(xiàng)的藥物，其中所述藥物包含至少一種另外的藥理學(xué)活性物質(zhì)。
14.權(quán)利要求11至12中任意一項(xiàng)的藥物，其中該藥物在用至少一種另外的藥理學(xué)活性物質(zhì)治療之前和/或期間和/或之后進(jìn)行應(yīng)用。
15.包含治療有效量的至少一種權(quán)利要求I至8中任意一項(xiàng)的化合物的藥物組合物，其任選地進(jìn)一步包含至少一種選自生理學(xué)可接受的賦形劑、助劑、佐劑、稀釋劑、載體和/或除權(quán)利要求I至8中任意一項(xiàng)的化合物之外的另外的藥理學(xué)活性物質(zhì)的另外的化合物。
16.藥盒，其包含治療有效量的至少一種權(quán)利要求I至8中任意一項(xiàng)的化合物和/或至少一種權(quán)利要求15的藥物組合物和治療有效量的至少一種除權(quán)利要求I至8中任意一項(xiàng)的化合物之外的另外的藥理學(xué)活性物質(zhì)。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)的新的[1,8]二氮雜萘衍生物以及該化合物的用途，其中通過(guò)消耗ATP的蛋白如激酶進(jìn)行的信號(hào)傳導(dǎo)的抑制、調(diào)節(jié)和/或調(diào)控起作用，特別是涉及TGF-β受體激酶的抑制劑，以及該類化合物用于治療激酶誘導(dǎo)的疾病、特別是用于治療腫瘤的用途。
文檔編號(hào)A61P35/00GK102958930SQ201180032608
公開(kāi)日2013年3月6日 申請(qǐng)日期2011年5月31日 優(yōu)先權(quán)日2010年6月28日
發(fā)明者D·多施, A·約恩齊克, G·赫爾策曼, C·阿門特, F·岑克 申請(qǐng)人:默克專利有限公司