專(zhuān)利名稱(chēng)：治療支氣管炎的復(fù)方制劑及其制備方法、質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種復(fù)方制劑，特別是涉及一種治療支氣管炎的復(fù)方顆粒劑及其制備方法、質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
支氣管炎屬于中醫(yī)學(xué)“咳嗽”，“哮喘”病范疇，為臨床常見(jiàn)病、多發(fā)病。目前市場(chǎng)上銷(xiāo)售的安嗽糖漿為中藥與西藥組成的復(fù)方制劑，該制劑以浙貝母、百部，桔梗、前胡，姜半夏，陳皮、薄荷、甘草等中藥潤(rùn)肺止咳，配合以西藥氯化銨化痰，鹽酸麻黃堿止咳，中西藥物有機(jī)組合，共呈潤(rùn)肺化痰、止咳平喘之劑，對(duì)于痰熱阻肺，喘息氣短，咳嗽痰粘，口渴咽干等表現(xiàn)的支氣管炎，有較好療效。但由于目前市場(chǎng)只有糖漿一種劑型，劑型單一，不能滿(mǎn)足不同患者的需要，因此開(kāi)發(fā)一種新的劑型已顯得迫為必要，而且原糖漿的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)只對(duì)鹽酸麻黃堿進(jìn)行鑒別，只檢測(cè)藥品中氯化銨的含量，而對(duì)藥品中的其他中藥成分如陳皮、前胡、甘草等沒(méi)有建立質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，因此需要進(jìn)一步完善和提高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種治療支氣管炎的復(fù)方顆粒劑；本發(fā)明目的還在于提供一種治療支氣管炎的復(fù)方顆粒劑的制備方法；本發(fā)明目的還在于提供一種治療支氣管炎的復(fù)方顆粒劑的質(zhì)量控制方法。
本發(fā)明目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。
本發(fā)明復(fù)方顆粒劑是由如下重量體積比(按g/ml的比例)的原料藥制備而成浙貝母流浸膏20-25體積份、甘草流浸膏20-25體積份、百部20-25重量份、桔梗流浸膏15-20體積份、前胡20-25重量份、姜半夏20-25重量份、陳皮10-15重量份、氯化銨20-25重量份、鹽酸麻黃堿0.3-0.4重量份、薄荷腦0.1-0.2重量份；其中浙貝母流浸膏標(biāo)準(zhǔn)收載于《中國(guó)藥典》1977年版一部；甘草流浸膏收載于《中國(guó)藥典》2000年版一部附錄流浸膏劑通則項(xiàng)下；桔梗流浸膏的制法收載于《藥物制劑注解》。
上述原料藥優(yōu)先配比為浙貝母流浸膏25體積份、甘草流浸膏20體積份、百部25重量份、桔梗流浸膏18體積份、前胡22重量份、姜半夏22重量份、陳皮12重量份、氯化銨20重量份、鹽酸麻黃堿0.365重量份、薄荷腦0.15重量份。
本發(fā)明復(fù)方顆粒劑是由如下方法制備的取上述十味本發(fā)明原料藥，前胡加水于85～90℃溫浸2-3次，每次2-3小時(shí)，濾過(guò)，濾液合并，濃縮至適量，放冷，加乙醇使含醇量約達(dá)25％，備用；百部、陳皮分別粉碎成粗粉，中國(guó)藥典2000年版一部附錄1 O照流浸膏劑與浸膏劑項(xiàng)下的滲漉法，百部用55％乙醇作溶劑、陳皮用80％乙醇作溶劑，分別進(jìn)行滲漉，收集百部漉液，陳皮漉液，備用；半夏粉碎成粗粉，用50％乙醇于70～80℃溫浸2-3次，每次2-3小時(shí)，合并浸出液，備用；將以上四種備用液合并，減壓回收乙醇至無(wú)醇味，與浙貝母、甘草、桔梗三種流浸膏混勻，靜置，濾過(guò)，濃縮至22℃溫度下相對(duì)密度為1.29～1.35的清膏，加入鹽酸麻黃堿，取上述混勻的清膏，加入氯化銨，適量糊精及蔗糖，混勻；加40％乙醇適量，制成顆粒，干燥，噴加薄荷腦的90％乙醇溶液，混勻，分裝成袋，每袋5g，即得本發(fā)明復(fù)方顆粒劑?？诜淮?-7.5g，一日3次。
本發(fā)明復(fù)方顆粒劑的質(zhì)量控制方法包括如下鑒別和/或含量測(cè)定方法中的一種或幾種。
鑒別A.取本發(fā)明復(fù)方顆粒劑5g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以比例為15～25∶4～6∶0.5的氯仿-甲醇-濃氨試液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
B.取本發(fā)明復(fù)方顆粒劑20g，加甲醇50ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次30ml，合并正丁醇提取液，加水15ml洗滌，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，加中性氧化鋁1g拌勻，蒸干，裝在中性氧化鋁小柱(100～120目，3g，內(nèi)徑1cm)上，以比例為1～2∶1～2的醋酸乙酯-甲醇30ml洗脫，收集洗脫液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取陳皮對(duì)照藥材0.3g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以比例為1～3∶2～4的正己烷-醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置波長(zhǎng)365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)。
C.取前胡對(duì)照藥材0.8g，加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至約20ml，放冷，加醋酸乙酯30ml振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取鑒別B項(xiàng)下的供試品溶液與對(duì)照藥材溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以比例為1～2∶1～2正己烷-醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以1％氫氧化鈉乙醇溶液，置波長(zhǎng)365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)。
D.取鑒別B項(xiàng)下洗脫后的小柱，加40％甲醇30ml洗脫，收集洗脫液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對(duì)照藥材0.3g，加甲醇30ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一用0.5％氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以比例為10～20∶1∶1∶2的醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
含量測(cè)定E.氯化銨取裝量差異項(xiàng)下的本發(fā)明復(fù)方顆粒劑，研勻，取2.5g，稱(chēng)定，置500ml凱氏燒瓶中，加水250ml，振搖使溶解，加玻璃珠數(shù)粒，加40％氫氧化鈉溶液5ml，立即用氮?dú)馇驅(qū)P氏燒瓶與冷凝管連接，冷凝管的尖端浸入4％硼酸溶液50ml的液面下(溶液內(nèi)加0.1％甲基紅-0.2％溴甲酚綠混合指示液10滴)，加熱蒸餾，至接收液的總體積約為200ml時(shí)，將冷凝管尖端提出液面，使蒸氣沖洗1分鐘，用水淋洗尖端后停止蒸餾；餾出液用硫酸滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液由藍(lán)綠色變?yōu)榛易仙⒌味ǖ慕Y(jié)果用空白試驗(yàn)校正，即得；每1ml的硫酸滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于5.349mg的氯化銨NH4Cl；本發(fā)明復(fù)方顆粒劑每袋含氯化銨(NH4Cl)應(yīng)為170～230mg。
F.鹽酸麻黃堿照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄I II)測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以比例為5～15∶95～85的用磷酸調(diào)節(jié)pH值為3.0的甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為209nm；理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算應(yīng)不低于2800；稱(chēng)取鹽酸麻黃堿適量，加0.1％鹽酸甲醇溶液制成每1ml含30μg的溶液，即得對(duì)照品溶液；取裝量差異項(xiàng)下的本發(fā)明復(fù)方制劑，研勻，取1g，稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，加入0.1％鹽酸甲醇溶液25ml，稱(chēng)定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱(chēng)定重量，用0.1％鹽酸甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；分別吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本發(fā)明復(fù)方顆粒劑每袋含鹽酸麻黃堿(C10H15NO·HCl)應(yīng)為3.10～4.20mg。
本發(fā)明復(fù)方顆粒劑具有潤(rùn)肺化痰，止咳平喘的功效，用于痰熱阻肺，喘息氣短，咳嗽痰粘，口喝咽干，支氣管炎屬上述證候者；口服，一次5～7.5g，一日3次。
本發(fā)明復(fù)方顆粒劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)在原“安嗽糖漿”質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上，增加了陳皮、前胡、甘草的薄層色譜鑒別；另外對(duì)鹽酸麻黃堿的鑒別用原展開(kāi)劑展開(kāi)后，鹽酸麻黃堿斑點(diǎn)Rf值偏高，采用本發(fā)明展開(kāi)劑氯仿-甲醇-濃氨試液后斑點(diǎn)Rf值適中。
此外，本發(fā)明還增加鹽酸麻黃堿的含量測(cè)定方法，本法采用高效液相色譜法，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH值為3.0)(10∶90)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為209nm。線性范圍0.09664～0.5134μg，r＝1.000，平均回收率99.59％，RSD％＝0.72。
本發(fā)明顆粒劑增加薄層色譜鑒別和鹽酸麻黃堿的含量測(cè)定后，在室溫條件下，進(jìn)行了穩(wěn)定性試驗(yàn)，結(jié)果所檢查的內(nèi)容(包括性狀、鑒別、檢查、微生物限度檢查、含量測(cè)定)均無(wú)明顯改變，表明本發(fā)明顆粒劑穩(wěn)定性良好。
下述實(shí)驗(yàn)例和實(shí)施例用于進(jìn)一步說(shuō)明但不限于本發(fā)明。
實(shí)驗(yàn)例1.本發(fā)明顆粒(安嗽顆粒)治療支氣管炎30例療效觀察病例全部來(lái)自門(mén)診。
一、診斷標(biāo)準(zhǔn)及觀察方法診斷標(biāo)準(zhǔn)均參照《中藥新藥治療慢性支氣管炎的臨床指導(dǎo)原則》。
給藥方法口服安嗽顆粒，一次1袋，一日3次；20天為一療程。
二、一般資料1、性別男19例，女11例。
2、年齡15～30歲10例，31～50歲11例，51～65歲9例。最小年齡16歲，最大年齡61歲，平均年齡44.1歲。
3、不同證型單純型12例，喘息型18例。
4、病程≤7天8例，＞7～15天12例，＞15天10例。
5、病情輕度9例，中度12例，重度9例。
6、癥狀及體征，見(jiàn)表1。
表1 臨床癥狀及體征分布

7、舌象苔薄黃18例，苔黃膩12例；滑脈21例，滑數(shù)9例。
8、白細(xì)胞、胸透、肺部體征，見(jiàn)表2。
表2 白細(xì)胞、胸透、肺部體征情況

三、療效判定標(biāo)準(zhǔn)1、臨床癥狀療效評(píng)定臨床治愈咳嗽、咯痰、喘息等消失。
顯效咳嗽、咯痰、喘息等明顯好轉(zhuǎn)(+++→+)肺部哮鳴音明顯減輕。
有效咳嗽、咯痰有所好轉(zhuǎn)(+++→++或++→+)肺部哮鳴音明顯減輕。
無(wú)效各癥均無(wú)改善或加重。
2、綜合療效判定標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)各項(xiàng)觀察指標(biāo)的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，先計(jì)算出治療前后的積分值，然后算出療效指數(shù)加以確定療效。

臨床治愈臨床主要癥狀，體征消失，異常理化指標(biāo)恢復(fù)正常，療效指數(shù)≥90％。
顯效主要癥狀，體征明顯改善，異常理化指標(biāo)接近正常，療效指數(shù)≥70％＜90％。
有效主要癥狀、體征減輕，異常理化指標(biāo)有所改善，療產(chǎn)指數(shù)≥30％＜70％。
四、結(jié)果1、總療效臨床治愈9例(30％)，顯效12例(40％)，有效8例(26.67％)，無(wú)效1例(3.33％)。
2、癥狀、體征與療效，見(jiàn)表3。
表3 臨床癥狀及體征療效

3、病情與療效，見(jiàn)表4。
表4 病情療效

4、病程與療效，見(jiàn)表5。
表5 病程療效

5、不同證型的療效，見(jiàn)表6。
表6 不同證型的療效

6、白細(xì)胞、胸透、肺部體征變化情況，見(jiàn)表7。
表7 白細(xì)胞、胸透、肺部體征變化

7、舌、脈象變化情況，見(jiàn)表8。
表8 舌脈象變化

實(shí)驗(yàn)例2本發(fā)明顆粒劑鹽酸麻黃堿的薄層鑒別方法儀器與試藥KQ-100型超聲波清洗器；101-1-BS電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱；鹽酸麻黃堿對(duì)照品(0090-9801供含量測(cè)定用中國(guó)藥品生物制品檢定所)；薄層板；手鋪板(厚0.3mm)；薄層層析硅膠(批號(hào)010503，青島海洋化工有限公司制造)甲醇等均為分析純。
1、供試品溶液的制備取本品5g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。
2、對(duì)照品溶液的制備取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加甲醉制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。
3、陰性對(duì)照溶液的制備按技術(shù)方案所述處方的比例及制法，制成缺鹽酸麻黃堿的陰性對(duì)照樣品。取5g，按供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照溶液。
4、薄層層析照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各4μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-濃氨試液(20∶5∶0.5)為展開(kāi)劑，室溫展開(kāi)，展距約8cm，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。陰性對(duì)照色譜在相應(yīng)位置上無(wú)干擾。
由于鹽酸麻黃堿為原料藥，所以按技術(shù)方案所述方法直接加甲醇即可溶解，簡(jiǎn)化原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的提取方法。另外原展開(kāi)劑展開(kāi)后，鹽酸麻黃堿斑點(diǎn)Rf值偏高，現(xiàn)更改展開(kāi)劑為氯仿-甲醇-濃氨試液后斑點(diǎn)Rf值適中。
實(shí)驗(yàn)例3本發(fā)明顆粒劑陳皮的薄層鑒別方法儀器與試藥KQ-100型超聲波清洗器；陳皮對(duì)照藥材(0969-9803中國(guó)藥品生物制品檢定所)；陳皮(投料用原藥材)；層析用中性氧化鋁(批號(hào)010412，上海五四化學(xué)試劑有限公司)；薄層板手鋪板(厚0.3mm)；薄層層析硅膠(批號(hào)010503，青島海洋化工有限公司制造)甲醇等均為分析純。
1、供試品溶液的制備；取本品20g，加甲醇50ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次30ml，合并正丁醇提取液，加水15ml洗滌，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，加中性氧化鋁1g拌勻，蒸干，裝在中性氧化鋁小柱(100～120目，3g，內(nèi)徑1cm)上，以醋酸乙酯-甲醇(1∶1)30ml洗脫，收集洗脫液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。
2、對(duì)照藥材溶液的制備取陳皮對(duì)照藥材0.3g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。
3、陰性對(duì)照溶液的制備按技術(shù)方案所述處方的比例及制法，制成缺陳皮的陰性對(duì)照樣品。取20g，按供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照溶液。
4、薄層層析照薄層色譜法(中國(guó)約典2000年一部附錄VIU)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯(2∶3)為展開(kāi)劑，室溫展開(kāi)，展距約8cm，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)。陰性對(duì)照藥材色譜在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的4個(gè)主斑點(diǎn)位置上，Rf值靠上的兩個(gè)有干擾，靠下的兩個(gè)無(wú)干擾，可作為本品陳皮的鑒別。
實(shí)驗(yàn)例4本發(fā)明顆粒劑前胡的薄層鑒別方法儀器與試藥前胡對(duì)照藥材(951-9201，中國(guó)藥品生物制品檢定所)；前胡(投料用原藥材)；其余同實(shí)驗(yàn)例3。
1、供試品溶液的制備同實(shí)驗(yàn)例3。
2、對(duì)照藥材溶液的制備取前胡對(duì)照藥材0.8g，加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至約20ml，放冷，加醋酸乙酯30ml。振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。
3、陰性對(duì)照溶液的制備按技術(shù)方案所述處方的比例及制法，制成缺前胡的陰性對(duì)照樣品。取20g，按供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照溶液。
4、薄層層析照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯(1∶1)為展開(kāi)劑，室溫展開(kāi)，展距約8cm，取出，晾干，噴以1％氫氧化鈉乙醇溶液，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)。陰性對(duì)照色譜無(wú)干擾。
實(shí)驗(yàn)例5本發(fā)明顆粒劑甘草的薄層鑒別方法儀器與試藥101-1-BS電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱；甘草對(duì)照藥材(904-8801中國(guó)藥品生物制品檢定所)；甘草(投料用原藥材)；其余同實(shí)驗(yàn)例3。
1、供試品溶液的制備取技術(shù)方案所述鑒別B項(xiàng)下洗脫后的小柱，加40％甲醇30ml洗脫，收集洗脫液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。
2、對(duì)照藥材溶液的制備取甘草對(duì)照藥材0.3g，加甲醇30ml，同供試品方法制成對(duì)照藥材溶液。
3、陰性對(duì)照溶液的制備按技術(shù)方案所述處方的比例及制法，制成缺甘草的陰性對(duì)照樣品。取20g，按供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照溶液。
4、薄層層析照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一用0.5％氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15∶1∶1∶2)為展開(kāi)劑，室溫展開(kāi)，展距約8cm，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。陰性對(duì)照色譜無(wú)干擾。
實(shí)驗(yàn)例6本發(fā)明顆粒劑氯化銨的含量測(cè)定方法參照原“安嗽糖漿”含量測(cè)定方法試驗(yàn)結(jié)果如下1、試驗(yàn)方法取裝量差異項(xiàng)下的本品，研勻，分別取2.5g，精密稱(chēng)定，置500ml凱氏燒瓶中，加水250ml，振搖使溶解，加玻璃珠數(shù)粒，加40％氫氧化鈉溶液5ml，立即用氮?dú)馇驅(qū)P氏燒瓶與冷凝管連接，冷凝管的尖端浸入4％硼酸溶液50ml的液面下(溶液內(nèi)加0.1％甲基紅-0.2％溴甲酚綠混合指示液10滴)，加熱蒸餾，至接收液的總體積約為200ml時(shí)，將冷凝管尖端提出液面，使蒸氣沖洗1分鐘，用水淋洗尖端后停止蒸餾。餾出液用硫酸滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液由藍(lán)綠色變?yōu)榛易仙⒌味ǖ慕Y(jié)果用空白試驗(yàn)校正，即得[每1ml的硫酸滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于5.35mg的氯化銨NH4Cl]。
結(jié)果用空白試驗(yàn)校正，即得[每1ml的硫酸滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于5.35mg的氯化銨NH4Cl]。
2、試驗(yàn)結(jié)果取本品3批(批號(hào)20030801、20030802、20030803)，按處方比例及制法制成的缺氯化銨陰性對(duì)照按上述方法，測(cè)定氯化銨含量，平均192.6mg/袋，相當(dāng)于標(biāo)示量的96.3％，結(jié)果見(jiàn)表9。
表9

3、氯化銨含量測(cè)定取投料用的氯化銨0.1g，精密稱(chēng)定，按上述方法測(cè)定，含量按干燥品計(jì)算，結(jié)果見(jiàn)表10。
檢驗(yàn)3批，均符合(中國(guó)藥典)2000年版二部“氯化銨”項(xiàng)下規(guī)定(按干燥品計(jì)算，含量不得少于99.5g)。
表10

上述試驗(yàn)結(jié)果表明，按原“安嗽糖漿”取樣量折算，取本品2.5g進(jìn)行試驗(yàn)，方法可行。由于本品為制劑，按《中國(guó)藥典》2000年版一部附錄顆粒劑制劑通則要求，水分不得過(guò)5.0％、裝量差異限度為±7％、再加上制備過(guò)程中稱(chēng)量誤差等因素，確定本品含氯化銨為處方量的85～115％，即每袋含量為170～230mg。
實(shí)驗(yàn)例7本發(fā)明顆粒劑鹽酸麻黃堿的含量測(cè)定方法1、儀器與試藥SP-8810高效液相色譜儀；Spectra紫外檢測(cè)器；Sepu 3000P色譜工作站；Unicam UV530紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)；KQ-100型超聲波清洗器。鹽酸麻黃堿對(duì)照品(0090-9801供含量測(cè)定用中國(guó)藥品生物制品檢定所)。安嗽顆粒(批號(hào)20030801、20030802、20030803)。甲醇色譜純；水為超純水；其他試劑均為分析純。
2、高效液相色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)C18不銹鋼柱(Hypersil ODS2 4.6×200mm 5μm)；流動(dòng)相甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH值為3.0)(10∶90)；流速1.0ml/min、1.2ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)209nm柱溫室溫。理論板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計(jì)算，應(yīng)不低于2800。
3、標(biāo)準(zhǔn)曲線精密稱(chēng)取鹽酸麻黃堿對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml中含9.664、20.536、30.200，41.072、51.340μg的溶液。分別吸取10μl，注入高效液相色譜儀，按上述條件測(cè)定峰面積，結(jié)果見(jiàn)表11。
表11

以對(duì)照品濃度作為橫坐標(biāo)，測(cè)得的峰面積作為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，得線性方程為Y＝17039X+14783，r＝1.000。線性范圍為0.09664～0.5134μg。
4、供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下的本品，研勻，取1g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入0.1％鹽酸甲醇溶液25ml，稱(chēng)定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱(chēng)定重量，用0.1％鹽酸甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。
①提取樣品溶劑；選用甲醇、0.1％鹽酸甲醇溶液進(jìn)行試驗(yàn)，從HPLC圖譜觀察，用0.1％鹽酸甲醇溶液提取樣品，鹽酸麻黃堿峰形較甲醇好，因而將其作為提取樣品的溶劑。
②提取方法；以0.1％鹽酸甲醇溶液作為提取溶劑，選擇超聲處理30分鐘、60分鐘；加熱回流1小時(shí)進(jìn)行提取，提取液按含量測(cè)定方法測(cè)定鹽酸麻黃堿，結(jié)果見(jiàn)表12。
表12

鹽酸小檗堿易溶于甲醇，試驗(yàn)結(jié)果表示上述的提取方法，測(cè)定鹽酸麻黃堿含量結(jié)果基本相同，均可作為鹽酸麻黃堿含量測(cè)定的提取方法。本發(fā)明結(jié)合回收試驗(yàn)，選用較為方便的超聲處理30分鐘作為技術(shù)方案所述方法。
5、對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取鹽酸麻黃堿對(duì)照品適量，加0.1％鹽酸甲醇溶液制成每1ml含30μg的溶液，作為對(duì)照品溶液。
6、測(cè)定法(1)測(cè)定波長(zhǎng)的選擇取鹽酸麻黃堿對(duì)照品溶液在200～360nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，結(jié)果在209nm波長(zhǎng)處有最大吸收，故選擇測(cè)定波長(zhǎng)為λ＝209nm。
(2)流動(dòng)相的選擇選擇甲醇-水(1∶1)、乙腈-0.01％磷酸溶液(5∶95)、甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(8∶92)及甲醇-0.05mol/L。磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH值為3.0)(10∶90)等進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果顯示最后一種流動(dòng)相分離效果、峰形最好而作為技術(shù)方案所述方法的流動(dòng)相。
測(cè)定方法如技術(shù)方案，分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，按上述條件進(jìn)行測(cè)定。
7、空白試驗(yàn)取按處方比例及制法制備的缺鹽酸麻黃堿陰性樣品，按供試品溶液的制備及測(cè)定方法進(jìn)行處理和測(cè)定。結(jié)果未見(jiàn)空白試驗(yàn)有干擾。
8、精密度試驗(yàn)①對(duì)照品；精密吸取鹽酸麻黃堿對(duì)照品溶液(30μg/ml)10μl，按上述條件重復(fù)進(jìn)樣5次。測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表13。
表13

②樣品精密吸取同一供試品(批號(hào)20030801)溶液10μl，按上述條件重復(fù)進(jìn)樣5次。結(jié)果見(jiàn)表14。
表14

9、重復(fù)性試驗(yàn)取同一供試品(批號(hào)20030802)研勻，精密稱(chēng)取5份，按含量測(cè)定方法進(jìn)行處理和測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表15。
表15

10、穩(wěn)定性試驗(yàn)精密吸取同一供試品溶液(批號(hào)20030801)和對(duì)照品溶液(30.2μg/ml)各10μl，在開(kāi)機(jī)1小時(shí)待穩(wěn)定后，每隔2小時(shí)注入高效液相色譜儀，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表16。
表16

11、加樣回收試驗(yàn)取同一供試品(批號(hào)20030801，含量為0.7278mg/g)5份各約1g，精密稱(chēng)定，分別精密加入鹽酸小檗堿對(duì)照品溶液(0.630mg/ml)1ml，水浴加熱揮去甲醇，分別按含量測(cè)定方法進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算回收率。結(jié)果見(jiàn)表17。
表17

12、含量測(cè)定取本品3批，按擬定的含量測(cè)定方法測(cè)定鹽酸麻黃堿含量，結(jié)果見(jiàn)表18。
表18

13、鹽酸麻黃堿原料含量測(cè)定取投料用的鹽酸麻黃堿，按擬定的含量測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表19。
表19

檢驗(yàn)3批，均符合《中國(guó)藥典》2000年版二部“鹽酸麻黃堿”項(xiàng)下規(guī)定(按干燥品計(jì)算，含量不得少于99.0％)。
由于本品為制劑，按《中國(guó)藥典》2000年版一部附錄顆粒劑制劑通則要求，水分不得過(guò)5.0％、裝量差異限度為±7％、再加上制備過(guò)程中稱(chēng)量誤差等因素，確定本品含鹽酸麻黃堿為處方量的85～115％，即每袋含量為3.10～4.20mg。
本發(fā)明下述實(shí)施例均能達(dá)到上述實(shí)驗(yàn)例的效果。
實(shí)施例1.本發(fā)明顆粒劑浙貝母流浸膏25ml、甘草流浸膏20ml、百部25g、桔梗流浸膏18ml、前胡22g、姜半夏22g、陳皮12g、氯化銨20g、鹽酸麻黃堿0.365g、薄荷腦0.15g；以上十味，前胡加水于85～90℃溫浸三次，第一、二次各3小時(shí)，第三次2小時(shí)，濾過(guò)，濾液合并，濃縮至適量，放冷，加乙醇使含醇量約達(dá)25％，備用；百部、陳皮分別粉碎成粗粉，照流浸膏劑與浸膏劑項(xiàng)下的滲漉法(中國(guó)藥典2000年一部附錄1 O)，百部用55％乙醇作溶劑、陳皮用80％乙醇作溶劑，分別進(jìn)行滲漉，收集百部漉液25ml，陳皮漉液5ml，備用。姜半夏粉碎成粗粉，用50％乙醇于70～80℃溫浸三次，每次3小時(shí)，合并浸出液，備用。將以上四種備用液合并，減壓回收乙醇至無(wú)醇味，與浙貝母、甘草、桔梗三種流浸膏混勻，靜置，濾過(guò)，濃縮至相對(duì)密度為1.29～1.35(22℃)的清膏，加入鹽酸麻黃堿，取上述混勻的清膏1份，加氯化銨20g及糊精34g、蔗糖425g，混勻；加40％乙醇適量，制成顆粒，干燥，制成500g，噴加薄荷腦的90％乙醇溶液，混勻，分裝100袋，每袋5g，即得。口服，一次5-7.5g，一日3次。
實(shí)施例2.本發(fā)明顆粒劑的質(zhì)量控制方法A.取本發(fā)明復(fù)方顆粒劑5g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-濃氨試液(20∶5∶0.5)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
B.取本發(fā)明復(fù)方顆粒劑20g，加甲醇50ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次30ml，合并正丁醇提取液，加水15ml洗滌，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，加中性氧化鋁1g拌勻，蒸干，裝在中性氧化鋁小柱(100～120目，3g，內(nèi)徑1cm)上，以醋酸乙酯-甲醇(1∶1)30ml洗脫，收集洗脫液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取陳皮對(duì)照藥材0.3g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯(2∶3)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)。
C.取前胡對(duì)照藥材0.8g，加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至約20ml，放冷，加醋酸乙酯30ml振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取鑒別B項(xiàng)下的供試品溶液與對(duì)照藥材溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯(1∶1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以1％氫氧化鈉乙醇溶液，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)。
D.取鑒別B項(xiàng)下洗脫后的小柱，加40％甲醇30ml洗脫，收集洗脫液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對(duì)照藥材0.3g，加甲醇30ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一用0.5％氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15∶1∶1∶2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
實(shí)施例3.本發(fā)明顆粒劑的質(zhì)量控制方法B.取本發(fā)明復(fù)方顆粒劑20g，加甲醇50ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次30ml，合并正丁醇提取液，加水15ml洗滌，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，加中性氧化鋁1g拌勻，蒸干，裝在中性氧化鋁小柱(100～120目，3g，內(nèi)徑1cm)上，以醋酸乙酯-甲醇(1∶1)30ml洗脫，收集洗脫液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取陳皮對(duì)照藥材0.3g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯(2∶3)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)。
C.取前胡對(duì)照藥材0.8g，加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至約20ml，放冷，加醋酸乙酯30ml振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取鑒別B項(xiàng)下的供試品溶液與對(duì)照藥材溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯(1∶1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以1％氫氧化鈉乙醇溶液，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)。
D.取鑒別B項(xiàng)下洗脫后的小柱，加40％甲醇30ml洗脫，收集洗脫液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對(duì)照藥材0.3g，加甲醇30ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一用0.5％氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15∶1∶1∶2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
實(shí)施例4.本發(fā)明顆粒劑的質(zhì)量控制方法E.氯化銨取裝量差異項(xiàng)下的本發(fā)明復(fù)方顆粒劑，研勻，取2.5g，稱(chēng)定，置500ml凱氏燒瓶中，加水250ml，振搖使溶解，加玻璃珠數(shù)粒，加40％氫氧化鈉溶液5ml，立即用氮?dú)馇驅(qū)P氏燒瓶與冷凝管連接，冷凝管的尖端浸入4％硼酸溶液50ml的液面下(溶液內(nèi)加0.1％甲基紅-0.2％溴甲酚綠混合指示液10滴)，加熱蒸餾，至接收液的總體積約為200ml時(shí)，將冷凝管尖端提出液面，使蒸氣沖洗1分鐘，用水淋洗尖端后停止蒸餾；餾出液用硫酸滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液由藍(lán)綠色變?yōu)榛易仙?，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正，即得；每1ml的硫酸滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于5.349mg的氯化銨NH4Cl；本發(fā)明復(fù)方顆粒劑每袋含氯化銨(NH4Cl)應(yīng)為170～230mg。
F.鹽酸麻黃堿照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄I II)測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH值為3.0)(10∶90)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為209nm；理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算應(yīng)不低于2800；稱(chēng)取鹽酸麻黃堿適量，加0.1％鹽酸甲醇溶液制成每1ml含30μg的溶液，即得對(duì)照品溶液；取裝量差異項(xiàng)下的本發(fā)明復(fù)方制劑，研勻，取1g，稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入0.1％鹽酸甲醇溶液25ml，稱(chēng)定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱(chēng)定重量，用0.1％鹽酸甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；分別吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本發(fā)明復(fù)方顆粒劑每袋含鹽酸麻黃堿(C10H15NO·HCl)應(yīng)為3.10～4.20mg。
實(shí)施例5.本發(fā)明顆粒劑的質(zhì)量控制方法鹽酸麻黃堿照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄I II)測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH值為3.0)(10∶90)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為209nm；理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算應(yīng)不低于2800；稱(chēng)取鹽酸麻黃堿適量，加0.1％鹽酸甲醇溶液制成每1ml含30μg的溶液，即得對(duì)照品溶液；取裝量差異項(xiàng)下的本發(fā)明復(fù)方制劑，研勻，取1g，稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入0.1％鹽酸甲醇溶液25ml，稱(chēng)定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱(chēng)定重量，用0.1％鹽酸甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；分別吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本發(fā)明復(fù)方顆粒劑每袋含鹽酸麻黃堿(C10H15NO·HCl)應(yīng)為3.10～4.20mg。
實(shí)施例6.本發(fā)明顆粒劑的質(zhì)量控制方法鑒別A.取本發(fā)明復(fù)方顆粒劑5g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIF)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-濃氨試液(20∶5∶0.5)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
B.取本發(fā)明復(fù)方顆粒劑20g，加甲醇50ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次30ml，合并正丁醇提取液，加水15ml洗滌，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，加中性氧化鋁1g拌勻，蒸干，裝在中性氧化鋁小柱(100～120目，3g，內(nèi)徑1cm)上，以醋酸乙酯-甲醇(1∶1)30ml洗脫，收集洗脫液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取陳皮對(duì)照藥材0.3g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯(2∶3)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)。
C.取前胡對(duì)照藥材0.8g，加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至約20ml，放冷，加醋酸乙酯30ml振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取鑒別B項(xiàng)下的供試品溶液與對(duì)照藥材溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯(1∶1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以1％氫氧化鈉乙醇溶液，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)。
D.取鑒別B項(xiàng)下洗脫后的小柱，加40％甲醇30ml洗脫，收集洗脫液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對(duì)照藥材0.3g，加甲醇30ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一用0.5％氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15∶1∶1∶2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
含量測(cè)定E.氯化銨取裝量差異項(xiàng)下的本發(fā)明復(fù)方顆粒劑，研勻，取2.5g，稱(chēng)定，置500ml凱氏燒瓶中，加水250ml，振搖使溶解，加玻璃珠數(shù)粒，加40％氫氧化鈉溶液5ml，立即用氮?dú)馇驅(qū)P氏燒瓶與冷凝管連接，冷凝管的尖端浸入4％硼酸溶液50ml的液面下(溶液內(nèi)加0.1％甲基紅-0.2％溴甲酚綠混合指示液10滴)，加熱蒸餾，至接收液的總體積約為200ml時(shí)，將冷凝管尖端提出液面，使蒸氣沖洗1分鐘，用水淋洗尖端后停止蒸餾；餾出液用硫酸滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液由藍(lán)綠色變?yōu)榛易仙⒌味ǖ慕Y(jié)果用空白試驗(yàn)校正，即得；每1ml的硫酸滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于5.349mg的氯化銨NH4Cl；本發(fā)明復(fù)方顆粒劑每袋含氯化銨(NH4Cl)應(yīng)為170～230mg。
F.鹽酸麻黃堿照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄I II)測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH值為3.0)(10∶90)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為209nm；理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算應(yīng)不低于2800；稱(chēng)取鹽酸麻黃堿適量，加0.1％鹽酸甲醇溶液制成每1ml含30μg的溶液，即得對(duì)照品溶液；取裝量差異項(xiàng)下的本發(fā)明復(fù)方制劑，研勻，取1g，稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入0.1％鹽酸甲醇溶液25ml，稱(chēng)定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱(chēng)定重量，用0.1％鹽酸甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；分別吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本發(fā)明復(fù)方顆粒劑每袋含鹽酸麻黃堿(C10H15NO·HCl)應(yīng)為3.10～4.20mg。
實(shí)施例7.本發(fā)明顆粒劑的質(zhì)量控制方法鑒別A.取本發(fā)明復(fù)方顆粒劑5g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIF)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-濃氨試液(20∶5∶0.5)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
B.取本發(fā)明復(fù)方顆粒劑20g，加甲醇50ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次30ml，合并正丁醇提取液，加水15ml洗滌，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，加中性氧化鋁1g拌勻，蒸干，裝在中性氧化鋁小柱(100～120目，3g，內(nèi)徑1cm)上，以醋酸乙酯-甲醇(1∶1)30ml洗脫，收集洗脫液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取陳皮對(duì)照藥材0.3g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯(2∶3)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)。
C.取前胡對(duì)照藥材0.8g，加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至約20ml，放冷，加醋酸乙酯30ml振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取鑒別B項(xiàng)下的供試品溶液與對(duì)照藥材溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯(1∶1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以1％氫氧化鈉乙醇溶液，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)。
含量測(cè)定F.鹽酸麻黃堿照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄I II)測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH值為3.0)(10∶90)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為209nm；理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算應(yīng)不低于2800；稱(chēng)取鹽酸麻黃堿適量，加0.1％鹽酸甲醇溶液制成每1ml含30μg的溶液，即得對(duì)照品溶液；取裝量差異項(xiàng)下的本發(fā)明復(fù)方制劑，研勻，取1g，稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入0.1％鹽酸甲醇溶液25ml，稱(chēng)定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱(chēng)定重量，用0.1％鹽酸甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；分別吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本發(fā)明復(fù)方顆粒劑每袋含鹽酸麻黃堿(C10H15NO·HCl)應(yīng)為3.10～4.20mg。
實(shí)施例8.本發(fā)明顆粒劑的制備及其質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)浙貝母流浸膏25ml、甘草流浸膏20ml、百部25g、桔梗流浸膏18ml、前胡22g、姜半夏22g、陳皮12g、氯化銨20g、鹽酸麻黃堿0.365g、薄荷腦0.15g；以上十味，前胡加水于85～90℃溫浸三次，第一、二次各3小時(shí)，第三次2小時(shí)，濾過(guò)，濾液合并，濃縮至適量，放冷，加乙醇使含醇量約達(dá)25％，備用。百部、陳皮分別粉碎成粗粉，照流浸膏劑與浸膏劑項(xiàng)下的滲漉法(中國(guó)藥典2000年一部附錄1 O)，百部用55％乙醇作溶劑、陳皮用80％乙醇作溶劑，分別進(jìn)行滲漉，收集百部漉液25ml，陳皮漉液5ml，備用。姜半夏粉碎成粗粉，用50％乙醇于70～80℃溫浸三次，每次3小時(shí)，合并浸出液，備用。將以上四種備用液合并，減壓回收乙醇至無(wú)醇味，與浙貝母、甘草、桔梗三種流浸膏混勻，靜置，濾過(guò)，濃縮至相對(duì)密度為1.29～1.35(22℃)的清膏，加入鹽酸麻黃堿，取上述混勻的清膏1份，加糊精1份，氯化銨20g，蔗糖適量，混勻；加40％乙醇適量，制成顆粒，干燥，制成500g，噴加薄荷腦的90％乙醇溶液，混勻，分裝100袋，即得。
按上述制備方法制備的本發(fā)明顆粒劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)為鑒別A.取本發(fā)明復(fù)方顆粒劑5g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-濃氨試液(20∶5∶0.5)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
B.取本發(fā)明復(fù)方顆粒劑20g，加甲醇50ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次30ml，合并正丁醇提取液，加水15ml洗滌，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，加中性氧化鋁1g拌勻，蒸干，裝在中性氧化鋁小柱(100～120目，3g，內(nèi)徑1cm)上，以醋酸乙酯-甲醇(1∶1)30ml洗脫，收集洗脫液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取陳皮對(duì)照藥材0.3g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯(2∶3)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)。
C.取前胡對(duì)照藥材0.8g，加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至約20ml，放冷，加醋酸乙酯30ml振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取鑒別B項(xiàng)下的供試品溶液與對(duì)照藥材溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯(1∶1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以1％氫氧化鈉乙醇溶液，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)。
D.取鑒別B項(xiàng)下洗脫后的小柱，加40％甲醇30ml洗脫，收集洗脫液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對(duì)照藥材0.3g，加甲醇30ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一用0.5％氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15∶1∶1∶2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
含量測(cè)定E.氯化銨取裝量差異項(xiàng)下的本發(fā)明復(fù)方顆粒劑，研勻，取2.5g，稱(chēng)定，置500ml凱氏燒瓶中，加水250ml，振搖使溶解，加玻璃珠數(shù)粒，加40％氫氧化鈉溶液5ml，立即用氮?dú)馇驅(qū)P氏燒瓶與冷凝管連接，冷凝管的尖端浸入4％硼酸溶液50ml的液面下(溶液內(nèi)加0.1％甲基紅-0.2％溴甲酚綠混合指示液10滴)，加熱蒸餾，至接收液的總體積約為200ml時(shí)，將冷凝管尖端提出液面，使蒸氣沖洗1分鐘，用水淋洗尖端后停止蒸餾；餾出液用硫酸滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液由藍(lán)綠色變?yōu)榛易仙⒌味ǖ慕Y(jié)果用空白試驗(yàn)校正，即得；每1ml的硫酸滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于5.349mg的氯化銨NH4Cl；本發(fā)明復(fù)方顆粒劑每袋含氯化銨(NH4Cl)應(yīng)為170～230mg。
F.鹽酸麻黃堿照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年一部附錄I II)測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH值為3.0)(10∶90)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為209nm；理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算應(yīng)不低于2800；稱(chēng)取鹽酸麻黃堿適量，加0.1％鹽酸甲醇溶液制成每1ml含30μg的溶液，即得對(duì)照品溶液；取裝量差異項(xiàng)下的本發(fā)明復(fù)方制劑，研勻，取1g，稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入0.1％鹽酸甲醇溶液25ml，稱(chēng)定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱(chēng)定重量，用0.1％鹽酸甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；分別吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本發(fā)明復(fù)方顆粒劑每袋含鹽酸麻黃堿(C10H15NO·HCl)應(yīng)為3.10～4.20mg。
權(quán)利要求
1.一種治療支氣管炎的復(fù)方顆粒劑，其特征在于是由如下方法制備而成浙貝母流浸膏20-25體積份、甘草流浸膏20-25體積份、百部20-25重量份、桔梗流浸膏15-20體積份、前胡20-25重量份、姜半夏20-25重量份、陳皮10-15重量份、氯化銨20-25重量份、鹽酸麻黃堿0.3-0.4重量份、薄荷腦0.1-0.2重量份；取上述十味本發(fā)明原料藥，前胡加水于85～90℃溫浸2-3次，每次2-3小時(shí)，濾過(guò)，濾液合并，濃縮至適量，放冷，加乙醇使含醇量約達(dá)25％，備用；百部、陳皮分別粉碎成粗粉，中國(guó)藥典2000年版一部附錄10照流浸膏劑與浸膏劑項(xiàng)下的滲漉法，百部用55％乙醇作溶劑、陳皮用80％乙醇作溶劑，分別進(jìn)行滲漉，收集百部漉液，陳皮漉液，備用；半夏粉碎成粗粉，用50％乙醇于70～80℃溫浸2-3次，每次2-3小時(shí)，合并浸出液，備用；將以上四種備用液合并，減壓回收乙醇至無(wú)醇味，與浙貝母、甘草、桔梗三種流浸膏混勻，靜置，濾過(guò)，濃縮至22℃溫度下相對(duì)密度為1.29～1.35的清膏，加入鹽酸麻黃堿，取上述混勻的清膏，加入氯化銨，適量糊精及蔗糖，混勻；加40％乙醇適量，制成顆粒，干燥，噴加薄荷腦的90％乙醇溶液，混勻，分裝成袋，每袋5g，即得本發(fā)明復(fù)方顆粒劑。
2.如權(quán)利要求1所述的治療支氣管炎的復(fù)方顆粒劑，其特征在于是由如下方法制備而成浙貝母流浸膏25體積份、甘草流浸膏20體積份、百部25重量份、桔梗流浸膏18體積份、前胡22重量份、姜半夏22重量份、陳皮12重量份、氯化銨20重量份、鹽酸麻黃堿0.365重量份、薄荷腦0.15重量份；取上述十味原料藥，前胡加水于85～90℃溫浸三次，第一、二次各3小時(shí)，第三次2小時(shí)，濾過(guò)，濾液合并，濃縮至適量，放冷，加乙醇使含醇量約達(dá)25％，備用；百部、陳皮分別粉碎成粗粉，中國(guó)藥典2000年版一部附錄10照流浸膏劑與浸膏劑項(xiàng)下的滲漉法，百部用55％乙醇作溶劑、陳皮用80％乙醇作溶劑，分別進(jìn)行滲漉，收集百部漉液25體積份，陳皮漉液5體積份，備用；半夏粉碎成粗粉，用50％乙醇于70～80℃溫浸三次，每次3小時(shí)，合并浸出液，備用；將以上四種備用液合并，減壓回收乙醇至無(wú)醇味，與浙貝母、甘草、桔梗三種流浸膏混勻，靜置，濾過(guò)，濃縮至22℃溫度下相對(duì)密度為1.29～1.35的清膏，加入鹽酸麻黃堿，取上述混勻的清膏，加入氯化銨，適量糊精及蔗糖，混勻；加40％乙醇適量，制成顆粒，干燥，噴加薄荷腦的90％乙醇溶液，混勻，分裝成袋，每袋5g，即得本發(fā)明復(fù)方顆粒劑。
3.如權(quán)利要求1或2所述的復(fù)方顆粒劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法包括如下鑒別方法中的一種或幾種A.取本發(fā)明復(fù)方顆粒劑5g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以比例為15～25∶4～6∶0.5的氯仿-甲醇-濃氨試液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；B.取本發(fā)明復(fù)方顆粒劑20g，加甲醇50ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次30ml，合并正丁醇提取液，加水15ml洗滌，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，加中性氧化鋁1g拌勻，蒸干，裝在中性氧化鋁小柱上，以比例為1～2∶1～2的醋酸乙酯-甲醇30ml洗脫，收集洗脫液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取陳皮對(duì)照藥材0.3g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以比例為1～3∶2～4的正己烷-醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置波長(zhǎng)365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)；C.取前胡對(duì)照藥材0.8g，加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至20ml，放冷，加醋酸乙酯30ml振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取鑒別B項(xiàng)下的供試品溶液與對(duì)照藥材溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以比例為1～2∶1～2的正己烷-醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以1％氫氧化鈉乙醇溶液，置波長(zhǎng)365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)；D.取鑒別B項(xiàng)下洗脫后的小柱，加40％甲醇30ml洗脫，收集洗脫液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對(duì)照藥材0.3g，加甲醇30ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一用0.5％氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以比例為10～20∶1∶1∶2的醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
4.如權(quán)利要求3所述的復(fù)方顆粒劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法包括如下鑒別方法中的一種或幾種A.取本發(fā)明復(fù)方顆粒劑5g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以比例為20∶5∶0.5的氯仿-甲醇-濃氨試液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；B.取本發(fā)明復(fù)方顆粒劑20g，加甲醇50ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次30ml，合并正丁醇提取液，加水15ml洗滌，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，加中性氧化鋁1g拌勻，蒸干，裝在中性氧化鋁小柱上，以比例為1∶1的醋酸乙酯-甲醇30ml洗脫，收集洗脫液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取陳皮對(duì)照藥材0.3g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以比例為2∶3的正己烷-醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置波長(zhǎng)365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)；C.取前胡對(duì)照藥材0.8g，加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至20ml，放冷，加醋酸乙酯30ml振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取鑒別B項(xiàng)下的供試品溶液與對(duì)照藥材溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以比例為1∶1的正己烷-醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以1％氫氧化鈉乙醇溶液，置波長(zhǎng)365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)；D.取鑒別B項(xiàng)下洗脫后的小柱，加40％甲醇30ml洗脫，收集洗脫液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對(duì)照藥材0.3g，加甲醇30ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一用0.5％氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以比例為15∶1∶1∶2的醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
5.如權(quán)利要求1或2所述的復(fù)方顆粒劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法包括如下含量測(cè)定方法中的一種或幾種E.氯化銨取裝量差異項(xiàng)下的本發(fā)明復(fù)方顆粒劑，研勻，取2.5g，稱(chēng)定，置500ml凱氏燒瓶中，加水250ml，振搖使溶解，加玻璃珠數(shù)粒，加40％氫氧化鈉溶液5ml，立即用氮?dú)馇驅(qū)P氏燒瓶與冷凝管連接，冷凝管的尖端浸入4％硼酸溶液50ml的液面下，溶液內(nèi)加0.1％甲基紅-0.2％溴甲酚綠混合指示液10滴，加熱蒸餾，至接收液的總體積約為200ml時(shí)，將冷凝管尖端提出液面，使蒸氣沖洗1分鐘，用水淋洗尖端后停止蒸餾；餾出液用0.05mol/L硫酸滴定液滴定至溶液由藍(lán)綠色變?yōu)榛易仙?，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正，即得；每1ml的0.05mol/L硫酸滴定液相當(dāng)于5.349mg的氯化銨NH4Cl；本發(fā)明復(fù)方顆粒劑每袋含氯化銨應(yīng)為170～230mg；F.鹽酸麻黃堿照高效液相色譜法測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以比例為5～15∶95～85的用磷酸調(diào)節(jié)pH值為3.0的甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為209nm；理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算應(yīng)不低于2800；稱(chēng)取鹽酸麻黃堿適量，加0.1％鹽酸甲醇溶液制成每1ml含30μg的溶液，即得對(duì)照品溶液；取裝量差異項(xiàng)下的本發(fā)明復(fù)方制劑，研勻，取1g，稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入0.1％鹽酸甲醇溶液25ml，稱(chēng)定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱(chēng)定重量，用0.1％鹽酸甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；分別吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本發(fā)明復(fù)方顆粒劑每袋含鹽酸麻黃堿應(yīng)為3.10～4.20mg。
6.如權(quán)利要求3所述的復(fù)方顆粒劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法還包括如下含量測(cè)定方法中的一種或幾種E.氯化銨取裝量差異項(xiàng)下的本發(fā)明復(fù)方顆粒劑，研勻，取2.5g，稱(chēng)定，置500ml凱氏燒瓶中，加水250ml，振搖使溶解，加玻璃珠數(shù)粒，加40％氫氧化鈉溶液5ml，立即用氮?dú)馇驅(qū)P氏燒瓶與冷凝管連接，冷凝管的尖端浸入4％硼酸溶液50ml的液面下，溶液內(nèi)加0.1％甲基紅-0.2％溴甲酚綠混合指示液10滴，加熱蒸餾，至接收液的總體積約為200ml時(shí)，將冷凝管尖端提出液面，使蒸氣沖洗1分鐘，用水淋洗尖端后停止蒸餾；餾出液用0.05mol/L硫酸滴定液滴定至溶液由藍(lán)綠色變?yōu)榛易仙?，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正，即得；每1ml的0.05mol/L硫酸滴定液相當(dāng)于5.349mg的氯化銨NH4Cl；本發(fā)明復(fù)方顆粒劑每袋含氯化銨應(yīng)為170～230mg；F.鹽酸麻黃堿照高效液相色譜法測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以比例為5～15∶95～85的用磷酸調(diào)節(jié)pH值為3.0的甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為209nm；理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算應(yīng)不低于2800；稱(chēng)取鹽酸麻黃堿適量，加0.1％鹽酸甲醇溶液制成每1ml含30μg的溶液，即得對(duì)照品溶液；取裝量差異項(xiàng)下的本發(fā)明復(fù)方制劑，研勻，取1g，稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入0.1％鹽酸甲醇溶液25ml，稱(chēng)定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱(chēng)定重量，用0.1％鹽酸甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；分別吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本發(fā)明復(fù)方顆粒劑每袋含鹽酸麻黃堿應(yīng)為3.10～4.20mg。
7.如權(quán)利要求4所述的復(fù)方顆粒劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法還包括如下含量測(cè)定方法中的一種或幾種E.氯化銨取裝量差異項(xiàng)下的本發(fā)明復(fù)方顆粒劑，研勻，取2.5g，稱(chēng)定，置500ml凱氏燒瓶中，加水250ml，振搖使溶解，加玻璃珠數(shù)粒，加40％氫氧化鈉溶液5ml，立即用氮?dú)馇驅(qū)P氏燒瓶與冷凝管連接，冷凝管的尖端浸入4％硼酸溶液50ml的液面下，溶液內(nèi)加0.1％甲基紅-0.2％溴甲酚綠混合指示液10滴，加熱蒸餾，至接收液的總體積約為200ml時(shí)，將冷凝管尖端提出液面，使蒸氣沖洗1分鐘，用水淋洗尖端后停止蒸餾；餾出液用0.05mol/L硫酸滴定液滴定至溶液由藍(lán)綠色變?yōu)榛易仙?，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正，即得；每1ml的0.05mol/L硫酸滴定液相當(dāng)于5.349mg的氯化銨NH4Cl；本發(fā)明復(fù)方顆粒劑每袋含氯化銨應(yīng)為170～230mg；F.鹽酸麻黃堿照高效液相色譜法測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以比例為5～15∶95～85的用磷酸調(diào)節(jié)pH值為3.0的甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為209nm；理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算應(yīng)不低于2800；稱(chēng)取鹽酸麻黃堿適量，加0.1％鹽酸甲醇溶液制成每1ml含30μg的溶液，即得對(duì)照品溶液；取裝量差異項(xiàng)下的本發(fā)明復(fù)方制劑，研勻，取1g，稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入0.1％鹽酸甲醇溶液25ml，稱(chēng)定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱(chēng)定重量，用0.1％鹽酸甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；分別吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本發(fā)明復(fù)方顆粒劑每袋含鹽酸麻黃堿應(yīng)為3.10～4.20mg。
8.如權(quán)利要求5所述的復(fù)方顆粒劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于鹽酸麻黃堿的含量測(cè)定以比例為10∶90的用磷酸調(diào)節(jié)pH值為3.0的甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相。
9.如權(quán)利要求6或7所述的復(fù)方顆粒劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于鹽酸麻黃堿的含量測(cè)定以比例為10∶90的用磷酸調(diào)節(jié)pH值為3.0的甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相。
10.如權(quán)利要求1或2所述的復(fù)方顆粒劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法為鑒別A.取本發(fā)明復(fù)方顆粒劑5g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以比例為20∶5∶0.5的氯仿-甲醇-濃氨試液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；B.取本發(fā)明復(fù)方顆粒劑20g，加甲醇50ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次30ml，合并正丁醇提取液，加水15ml洗滌，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，加中性氧化鋁1g拌勻，蒸干，裝在中性氧化鋁小柱上，以比例為1∶1的醋酸乙酯-甲醇30ml洗脫，收集洗脫液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取陳皮對(duì)照藥材0.3g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以比例為2∶3的正己烷-醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置波長(zhǎng)365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)；C.取前胡對(duì)照藥材0.8g，加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至約20ml，放冷，加醋酸乙酯30ml振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取鑒別B項(xiàng)下的供試品溶液與對(duì)照藥材溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以比例為1∶1的正己烷-醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以1％氫氧化鈉乙醇溶液，置波長(zhǎng)365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)；D.取鑒別B項(xiàng)下洗脫后的小柱，加40％甲醇30ml洗脫，收集洗脫液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對(duì)照藥材0.3g，加甲醇30ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一用0.5％氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以比例為15∶1∶1∶2醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；含量測(cè)定E.氯化銨取裝量差異項(xiàng)下的本發(fā)明復(fù)方顆粒劑，研勻，取2.5g，稱(chēng)定，置500ml凱氏燒瓶中，加水250ml，振搖使溶解，加玻璃珠數(shù)粒，加40％氫氧化鈉溶液5ml，立即用氮?dú)馇驅(qū)P氏燒瓶與冷凝管連接，冷凝管的尖端浸入4％硼酸溶液50ml的液面下，溶液內(nèi)加0.1％甲基紅-0.2％溴甲酚綠混合指示液10滴，加熱蒸餾，至接收液的總體積約為200ml時(shí)，將冷凝管尖端提出液面，使蒸氣沖洗1分鐘，用水淋洗尖端后停止蒸餾；餾出液用0.05mol/L硫酸滴定液滴定至溶液由藍(lán)綠色變?yōu)榛易仙?，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正，即得；每1ml的0.05mol/L硫酸滴定液相當(dāng)于5.349mg的氯化銨NH4Cl；本發(fā)明復(fù)方顆粒劑每袋含氯化銨應(yīng)為170～230mg；F.鹽酸麻黃堿照高效液相色譜法測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以比例為10∶90的用磷酸調(diào)節(jié)pH值為3.0的甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為209nm；理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算應(yīng)不低于2800；稱(chēng)取鹽酸麻黃堿適量，加0.1％鹽酸甲醇溶液制成每1ml含30μg的溶液，即得對(duì)照品溶液；取裝量差異項(xiàng)下的本發(fā)明復(fù)方制劑，研勻，取1g，稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入0.1％鹽酸甲醇溶液25ml，稱(chēng)定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱(chēng)定重量，用0.1％鹽酸甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；分別吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本發(fā)明復(fù)方顆粒劑每袋含鹽酸麻黃堿應(yīng)為3.10～4.20mg。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種復(fù)方顆粒劑的制備方法和質(zhì)量控制方法，該復(fù)方制劑是由浙貝母流浸膏、甘草流浸膏、桔梗流浸膏、百部、前胡、姜半夏、陳皮、氯化銨、鹽酸麻黃堿、薄荷腦經(jīng)特定工藝制備成；該復(fù)方顆粒劑的質(zhì)量控制方法在原有糖漿劑的基礎(chǔ)上增加了陳皮、前胡、甘草的薄層色譜鑒別，還增加了鹽酸麻黃堿的含量測(cè)定方法，進(jìn)一步完善和提高了質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。
文檔編號(hào)A61P11/00GK1840118SQ20051005965
公開(kāi)日2006年10月4日 申請(qǐng)日期2005年3月30日 優(yōu)先權(quán)日2005年3月30日
發(fā)明者張友生, 張思寧 申請(qǐng)人:張友生