專利名稱：抗肺癌中藥組合物、其制備方法及其在制備抗肺癌藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及ー種抗肺癌中藥組合物，這種抗肺癌中藥組合物制備方法，以及該中藥組合物在制備抗肺癌藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
目前，肺癌已成為威脅人類健康的一大殺手。據(jù)國內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道，全球肺癌的新發(fā)病例高達(dá)205 020，約占全球各種腫瘤新發(fā)病例的14%，具有高發(fā)率和高死亡率的特點(diǎn)。在環(huán)境污染、吸畑、電離輻射、職業(yè)暴露和病毒感染等因素的多方面影響下，肺癌的發(fā)病率及死亡率一直處于上升狀態(tài)，毎年以0. 5%的速度増加，且隨著青少年吸煙人數(shù)的増加，肺癌日趨年輕化。據(jù)2008年我國衛(wèi)生部居民死亡調(diào)查結(jié)果顯示，肺癌已代替肝癌成為我國首位惡性腫瘤死因(占全部惡性腫瘤死亡的22. 7%)。因此，肺癌的診斷和治療引起醫(yī)學(xué)界的足夠重視。肺癌分為小細(xì)胞肺癌(SCLC，20%)和非小細(xì)胞肺癌(NSCLC，80%)，其發(fā)病原因復(fù)雜。目前國內(nèi)外肺癌的治療以手術(shù)和放療、化療為主，但這些方法易對(duì)患者的正常器官造成較大的副作用，患者預(yù)后和存活率較差。以“祛邪扶正”為特色的傳統(tǒng)中藥在治療肺癌方面發(fā)揮了巨大作用，其療效不僅鞏固，而且毒副作用小，對(duì)機(jī)體不會(huì)造成大的傷害，與化療并用可起到增效減毒的作用。因此從中藥和天然藥物中尋找和開發(fā)高效低毒的抗肺癌藥物是腫瘤學(xué)研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。經(jīng)檢索，現(xiàn)有專利中存有多種治療癌癥的中藥組合物，如“ 一種適用于癌癥患者的藥食兩用組合物及其制備方法”(專利號(hào)200910266137. 0)、“一種治療癌癥的中藥”(專利號(hào)200710166579.9)一種治療肝、胃、肺、血癌的中草藥組合物及其制備方法”(專利號(hào)201110125724. 5);“一種治療癌癥的中藥組合物及其制備方法”(專利號(hào)201110165923. 9)；“ー種治療惡性腫瘤的中藥組合物及應(yīng)用”(專利號(hào)201110145442. 1)、“抗癌中藥組合物及其應(yīng)用”(201110056786. 5)等，這些組合物中所用的藥物種類較多，且多以湯劑服用，或制備エ藝較簡單，提取得浸膏后直接做成ロ服制劑，制劑服用量較大，在臨床上雖然有一定的治療效果，但有效成分的提取率較低，制劑較粗大，不利于制劑的質(zhì)量控制。專利已有報(bào)道靈芝和薏苡仁的抗腫瘤的相關(guān)制劑(200910031997. 6公開了ー種抗腫瘤活性的靈芝三萜提取物的自微乳化納米組合物及其制備方法；201110097796. 3公開了ー種復(fù)方靈芝孢子軟膠囊及其制備方法；101010237432. 6公開了ー種薏苡仁抗癌中藥及其制備方法)，這些抗腫瘤制劑只是利用了靈芝總?cè)?、薏苡仁油単一有效組分，而將某些起到輔助作用的組分丟棄，而據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道林志彬，王鵬云.靈芝孢子及其活性成分的藥理研究[J].北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2006，38 (5) :541-547 ;張聿梅，楊峻山，趙楊景，等.薏苡化學(xué)成分及藥理活性研究進(jìn)展[J].中國藥學(xué)雜志，2002,37(1) :8-11，靈芝多糖和薏苡仁多糖也具有抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)作用，因此上述制劑無法體現(xiàn)中醫(yī)藥多組分、多靶點(diǎn)整體治療的特點(diǎn)。此外，201010187617. 0公開了ー種抗癌藥物組合物和一種中藥組合物的制備，此發(fā)明雖然注重了中藥組合物(藥材本身、藥材的煎煮液、煎煮液的濃縮浸膏或煎煮液的濃縮干粉)和多糖類組分的配合使用，但是該藥物組合物中含有的藥材種類較多，且多糖類組分并非來源于該組合物中的藥材，成分復(fù)雜，難以進(jìn)行質(zhì)量控制。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供ー種具有抗肺癌作用的中藥組合物及其制備方法，以及該具有抗肺癌作用的中藥組合物在制備抗肺癌藥物中的應(yīng)用，通過選擇合適的藥物和適宜的有效組分提取方法，優(yōu)化有效組分的配比關(guān)系，最終確定中藥組合物優(yōu)化組方、優(yōu)化組分配伍及組合物的制備方法，使其發(fā)揮安全有效的抗腫瘤作用，適用于臨床應(yīng)用。 本發(fā)明的第一個(gè)發(fā)明目的是通過以下的技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的
ー種抗肺癌中藥組合物，其特征在于，該組合物原料藥的重量份組成如下靈芝5 40份、薏苡仁5 40份、百合1 10份。其中原料藥較好的用量為靈芝10 30份、薏苡仁10 30份、百合1 6份。其中原料藥更為理想的用量為靈芝20份薏苡仁20份百合3份。近年來，作為“藥食同源”的傳統(tǒng)中藥靈芝、薏苡仁、百合在抗肺癌方面的研究及其新藥的開發(fā)一直受到研究人員的關(guān)注。本發(fā)明則是由這三味藥材組成，各味藥材的研究現(xiàn)狀如下
靈芝為多孔菌科真菌赤芝lucidum (Leyss. ex Fr.) Karst.或紫芝Ganoderma sinense Zhao. Xu et Zhang)的干燥子實(shí)體。歸心、肺、肝、腎經(jīng)。具有補(bǔ)氣安ネ申，止咳平喘之功效。用于肺虛咳喘，虛勞短氣等。現(xiàn)代科學(xué)研究表明，靈芝具有較強(qiáng)的抗腫瘤作用，其抗腫瘤的活性部位主要為靈芝三萜與多糖類組分。薏該仁為禾本科植物薏該(SbijrL. var. ma-yuen (Roman. ) Stapf的干燥成熟種仁。歸脾、胃、肺經(jīng)。具有利水滲濕，健脾止瀉，除痹，排膿，解毒散結(jié)之功效。用于肺癰，腸癰，贅疣，癌腫等?，F(xiàn)代研究表明，薏苡仁具有抗腫瘤的藥理作用，仁中含有眾多抗腫瘤活性成分，主要為酯類及脂肪酸類化合物與多糖類組分。百合為百合科植物卷丹應(yīng)lancifolium Thunb.、百合應(yīng) brownii F. E.Brown var. viridulum Baker)或細(xì)葉百合pumilum DC.的干燥肉質(zhì)鱗葉。歸心、肺經(jīng)。具有養(yǎng)陰潤肺，清心安神之功效。用于陰虛燥咳，勞嗽咳血等?，F(xiàn)代研究表明，百合具有較好的抗腫瘤活性，其抗腫瘤的主要活性成分為生物堿類成分和多糖類組分。本中藥組合物為臨床抗肺癌驗(yàn)方，靈芝補(bǔ)氣安神，為君藥，薏苡仁健脾利濕，百合養(yǎng)陰安神，同為臣藥。全方具有補(bǔ)氣養(yǎng)陰，利水滲濕，消瘤軟堅(jiān)的作用，適用于惡性腫瘤氣陰虧虛、水濕停滯者。本發(fā)明的進(jìn)ー步優(yōu)化，可以得到以下技術(shù)方案
所述的抗肺癌中藥組合物，是由靈芝總?cè)?、薏苡仁油、百合總生物堿、靈芝多糖、薏苡仁多糖和百合多糖6個(gè)有效組分組成。其中，靈芝總?cè)?、薏苡仁油、百合總生物堿的重量份組成為靈芝總?cè)茝V20、薏苡仁油廣35、百合總生物堿f 10 ;其中的靈芝多糖、薏苡仁多糖和百合多糖是按其原料藥與靈芝總?cè)?、薏苡仁油、百合總生物堿相同的生藥量1:1重量比加入的。所述的靈芝總?cè)啤⑥曹尤视?、百合總生物堿、靈芝多糖、薏苡仁多糖和百合多糖的重量比為 18-22 :33-37 1 :33-37 :43-47 :3_5。最佳比例是，所述的靈芝總?cè)?、薏苡仁油、百合總生物堿、靈芝多糖、薏苡仁多糖和百合多糖的重量比為20 35 1 35 45 :4。其中，靈芝總?cè)铺崛÷蕿?. 75%，純度為61. 50% ;薏苡仁油提取率為6. 62%，純度為74. 35% ;百合總生物堿提取率為I. 25%，純度為59. 92% ;靈芝多糖提取率為6. 56%，純度為57. 70% ;薏苡仁多糖提取率為8. 40%,純度為64. 42% ;百合多糖提取率為4. 84%，純度為62. 53%。更具體地說，本發(fā)明的抗肺癌中藥組合物，是指按照以下制備方法得到的組合物
步驟⑴將靈芝子實(shí)體粉碎過篩，采用超臨界CO2萃取法提取靈芝總?cè)祁惤M分；步驟⑵靈芝粗粉殘?jiān)铀逯?，濾液濃縮，こ醇沉淀，收集沉淀，沉淀用水再溶解，除去蛋白質(zhì)等不溶性雜質(zhì)，濃縮干燥，最終得到靈芝多糖類組分；
步驟⑶將薏苡仁粉碎過篩，采用超臨界CO2萃取法提取薏苡仁油；
步驟⑷薏苡仁粗粉殘?jiān)铀逯螅瑸V液濃縮，こ醇沉淀，收集沉淀，沉淀用水再溶解，除去蛋白質(zhì)等不溶性雜質(zhì)，濃縮干燥，最終得到薏苡仁多糖類組分；
步驟(5):將百合粉碎過篩，用酸性こ醇溶液提取，回收こ醇，回收液用濃氨水堿化，再用氯仿萃取，回收氯仿，干燥，即得百合總生物堿類組分；
步驟(6):百合粗粉殘?jiān)铀逯螅瑸V液濃縮，こ醇沉淀，收集沉淀，沉淀用水再溶解，除去蛋白質(zhì)等不溶性雜質(zhì)，濃縮干燥，最終得到百合多糖類組分；
步驟(7):將以上各步驟得到的組分混合均勻，得到所述的抗肺癌中藥組合物。完成本發(fā)明的第二個(gè)發(fā)明任務(wù)的技術(shù)方案是上述抗肺癌中藥組合物的制備方法其特征在于，步驟如下，
步驟⑴將靈芝子實(shí)體粉碎過篩，采用超臨界CO2萃取法提取靈芝總?cè)祁惤M分；步驟⑵靈芝粗粉殘?jiān)铀逯?，濾液濃縮，こ醇沉淀，收集沉淀，沉淀用水再溶解，除去蛋白質(zhì)等不溶性雜質(zhì)，濃縮干燥，最終得到靈芝多糖類組分；
步驟⑶將薏苡仁粉碎過篩，采用超臨界CO2萃取法提取薏苡仁油；
步驟⑷薏苡仁粗粉殘?jiān)铀逯?，濾液濃縮，こ醇沉淀，收集沉淀，沉淀用水再溶解，除去蛋白質(zhì)等不溶性雜質(zhì)，濃縮干燥，最終得到薏苡仁多糖類組分；
步驟(5):將百合粉碎過篩，用酸性こ醇溶液提取，回收こ醇，回收液用濃氨水堿化，再用氯仿萃取，回收氯仿，干燥，即得百合總生物堿類組分；
步驟(6):百合粗粉殘?jiān)铀逯?，濾液濃縮，こ醇沉淀，收集沉淀，沉淀用水再溶解，除去蛋白質(zhì)等不溶性雜質(zhì)，濃縮干燥，最終得到百合多糖類組分；
步驟(7):將以上各步驟得到的組分混合均勻，得到所述的抗肺癌中藥組合物。以上制備方法的進(jìn)ー步優(yōu)化，具體操作步驟是
步驟⑴將靈芝子實(shí)體粉碎過篩，采用超臨界CO2萃取法提取靈芝總?cè)祁惤M分，萃取壓カ為2(T40MPa，萃取溫度為40 50で，萃取時(shí)間為1 3 h，夾帶劑(體積百分比95%こ醇)用量為廣4 mL g—1生藥。步驟⑵靈芝粗粉殘?jiān)?，加? 14倍量的水煎煮，煎煮次數(shù)為廣3次，毎次f3h，濾液濃縮，濃縮液醇沉至こ醇濃度(體積百分比)為60、0%，收集沉淀，沉淀用4 10倍量的、水再溶解，除去蛋白質(zhì)等不溶性雜質(zhì)，濃縮干燥，最終得到靈芝多糖類組分。步驟⑶將薏苡仁粉碎過篩，采用超臨界CO2萃取法提取薏苡仁油，萃取壓カ為15 25MPa，萃取溫度為3(T40で，萃取時(shí)間為廣3 h，夾帶劑(體積百分比95%こ醇)用量為I 4 mL g_1生藥。步驟⑷薏苡仁粗粉殘?jiān)尤? 14倍量的水煎煮，煎煮次數(shù)為f 3次，毎次f 3h，濾液濃縮，濃縮液醇沉至こ醇濃度(體積百分比)為60、0%，收集沉淀，沉淀用4 10倍量的水再溶解，除去蛋白質(zhì)等不溶性雜質(zhì)，濃縮干燥，最終得到薏苡仁多糖類組分。
步驟(5):將百合粉碎過篩，加入5^10倍量的體積分?jǐn)?shù)為70%_90%的こ醇溶液(含有1%醋酸)提取，提取次數(shù)為f 3次，每次f 3 h，回收こ醇，回收液用濃氨水堿化至pH8 ll，再用等量氯仿萃取21次，回收氯仿，干燥，即得百合總生物堿類組分。步驟(6):百合粗粉殘?jiān)?，加? 14倍量的水煎煮，煎煮次數(shù)為f 3次，毎次f 3 h，濾液濃縮，濃縮液醇沉至こ醇濃度(體積百分比)為60、0%，收集沉淀，沉淀用4 10倍量的水再溶解，除去蛋白質(zhì)等不溶性雜質(zhì)，濃縮干燥，最終得到百合多糖類組分。步驟(7):將以上各步驟得到的組分混合均勻，得到所述的抗肺癌中藥組合物。本發(fā)明中藥組合物制備方法的優(yōu)化方案中，
步驟⑴所述的萃取條件為萃取壓力25 35MPa，萃取溫度為43 48で;萃取時(shí)間為f 2h，夾帶劑(95%こ醇)用量為2 3 mL g—1生藥；
步驟⑵所述的加水煎煮，是加入擴(kuò)11倍量的水，煎煮次數(shù)為廣2次，毎次f 2h ；
所述的濃縮液醇沉條件，是濃縮液醇沉至こ醇濃度(體積百分比)為7515% ；
所述的沉淀是用5 7倍量的水再溶解；
步驟⑶所述的萃取條件為萃取壓カ為20 25MPa，萃取溫度為35 40で，萃取時(shí)間為2 3 h，夾帶劑(95%こ醇)用量為2 3 mL g—1生藥；
步驟⑷所述的加水煎煮，是加入擴(kuò)11倍量的水，煎煮次數(shù)為廣2次，毎次f 2 h ；
所述的濃縮液醇沉條件，是濃縮液醇沉至こ醇濃度(體積百分比)為7515% ；
所述的沉淀是用5 7倍量的水再溶解；
步驟(5)所述的加醋酸こ醇提取，是加入61倍量的體積分?jǐn)?shù)為759^85%的こ醇溶液(含有體積百分比1%醋酸)提取，提取次數(shù)為廣2次，毎次f 2 h ；
所述的濾液是用濃氨水堿化至pH9 10 ；
再用等量氯仿萃取是3 7次；
步驟(6)所述的加水煎煮，是加入擴(kuò)11倍量的水，煎煮次數(shù)為廣2次，毎次f 2 h ；
所述的濃縮液醇沉條件，是濃縮液醇沉至こ醇濃度(體積百分比)為7515% ；
所述的沉淀是用5 7倍量的水再溶解。中藥組合物制備方法的優(yōu)化方案中，本發(fā)明推薦的條件是
步驟⑴所述的萃取條件為萃取壓カ為30 MPa，萃取溫度為45で;萃取時(shí)間為I. 5 h，夾帶劑(體積百分比95%こ醇)用量為3 mL g—1生藥；
步驟⑵所述的加水煎煮，是加入10倍量的水，煎煮次數(shù)為2次，每次I h ；
所述的濃縮液醇沉條件，是濃縮液醇沉至こ醇濃度(體積百分比)為80% ；
所述的沉淀是用6倍量的水再溶解；
步驟⑶所述的萃取條件是萃取壓カ為22MPa，萃取溫度為38 °C ;萃取時(shí)間為2. 5 h，夾帶劑(95%こ醇)用量為3 mL g—1生藥；
步驟⑷所述的加水煎煮，是加入10倍量的水，煎煮次數(shù)為2次，每次I h ；所述的濃縮液醇沉條件，是濃縮液醇沉至こ醇濃度(體積百分比)為80% ；
所述的沉淀是用6倍量的水再溶解；
步驟(5)所述的加醋酸こ醇提取，是加入7倍量的體積分?jǐn)?shù)為80%的こ醇溶液(含有1%醋酸)提取，提取次數(shù)為2次，毎次I h;
所述的濾液是用濃氨水堿化至PHlO ；
再用等量氯仿萃取是5次；
步驟(6)所述的加水煎煮，是加入10倍量的水，煎煮次數(shù)為2次，每次I h ；
所述的濃縮液醇沉條件，是濃縮液醇沉至こ醇濃度(體積百分比)為80% ；
所述的沉淀是用6倍量的水再溶解。完成本發(fā)明的第三個(gè)發(fā)明任務(wù)的技術(shù)方案是上述抗肺癌中藥組合物在制備抗肺癌藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明提供的抗肺癌中藥組合物的優(yōu)化組方，其處方及組合物配比篩選過程如下
I.在細(xì)胞水平上檢測(cè)不同配比的有效組分對(duì)腫瘤細(xì)胞生長的抑制作用。細(xì)胞株人肺癌A549和SPC-A-I細(xì)胞株。由于多糖類組分在體外無細(xì)胞抑制増殖作用，因此本實(shí)驗(yàn)選用靈芝總?cè)啤⑥曹尤视秃桶俸峡偵飰A的配比關(guān)系來優(yōu)選配比組方。已知靈芝、薏苡仁和百合臨床處方用量的重量份組成為靈芝10、薏苡仁10、百合6，且三味藥材中有效組分的提取率分別為靈芝總?cè)?. 75%、薏苡仁油6. 62%和百合總生物堿I. 25%。因此，以靈芝總?cè)?、薏苡仁油、百合總生物堿3種有效組分為影響因素，在原有臨床用方劑量的基礎(chǔ)上，運(yùn)用等量倍増法(0. 5倍、I倍、2倍)，結(jié)合藥材、有效組分含量，確定各有效組分的三個(gè)劑量為影響水平，采用L9(34)正交試驗(yàn)表進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。根據(jù)不同的劑量配比配成不同的有效組分群，選用A549和SPC-A-I兩種人肺癌細(xì)胞株為模型，通過MTT活性試驗(yàn)檢測(cè)各有效組分群對(duì)細(xì)胞増殖的抑制作用，考察其抗腫瘤活性大小，以半數(shù)抑制濃度IC5tl為指標(biāo)，最終優(yōu)選有效組分的最佳配比劑量。正交試驗(yàn)因素水平表和L9(34)正交試驗(yàn)結(jié)果見表I，2。
表I正交試驗(yàn)因素水平表
權(quán)利要求
1.ー種抗肺癌中藥組合物，其特征在于，該組合物原料藥的重量份組成如下靈芝5 40、薏苡仁5 40、百合I 10。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的抗肺癌中藥組合物，其特征在于，所述原料藥的重量份組成為靈芝10 30、薏苡仁10 30、百合I 6。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的抗肺癌中藥組合物，其特征在于，所述原料藥的重量份組成為靈芝20、薏苡仁20、百合3。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3之一所述的抗肺癌中藥組合物，其特征在于，該組合物是由靈芝總?cè)?、薏苡仁油、百合總生物堿、靈芝多糖、薏苡仁多糖和百合多糖6個(gè)有效組分組成，其中，靈芝總?cè)啤⑥曹尤视?、百合總生物堿的重量份組成為靈芝總?cè)茝V20、薏苡仁油廣35、百合總生物堿f 10 ;其中的靈芝多糖、薏苡仁多糖和百合多糖是按其原料藥與靈芝總?cè)?、薏苡仁油、百合總生物堿原料藥生藥量1:1重量比加入的。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的抗肺癌中藥組合物，其特征在于，所述的靈芝總?cè)?、意苡仁油、百合總生物堿、靈芝多糖、薏苡仁多糖和百合多糖的重量比為18-22 33-37 1 33-37 43-47 :3_5。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的抗肺癌中藥組合物，其特征在于，所述的靈芝總?cè)?、薏苡仁油、百合總生物堿、靈芝多糖、薏苡仁多糖和百合多糖的重量比為20 35 1 35 45 4 ;其中，靈芝總?cè)铺崛÷蕿?. 75%，純度為61. 50% ;薏苡仁油提取率為6. 62%，純度為74. 35% ；百合總生物堿提取率為I. 25%，純度為59. 92% ;靈芝多糖提取率為6. 56%，純度為57. 70% ；薏苡仁多糖提取率為8. 40%，純度為64. 42% ;百合多糖提取率為4. 84%，純度為62. 53%。
7.權(quán)利要求I所述抗肺癌中藥組合物的制備方法，其特征在于，步驟如下 步驟⑴將靈芝子實(shí)體粉碎過篩，采用超臨界CO2萃取法提取靈芝總?cè)祁惤M分； 步驟⑵靈芝粗粉殘?jiān)铀逯?，濾液濃縮，こ醇沉淀，收集沉淀，沉淀用水再溶解，除去蛋白質(zhì)等不溶性雜質(zhì)，濃縮干燥，最終得到靈芝多糖類組分； 步驟⑶將薏苡仁粉碎過篩，采用超臨界CO2萃取法提取薏苡仁油； 步驟⑷薏苡仁粗粉殘?jiān)铀逯?，濾液濃縮，こ醇沉淀，收集沉淀，沉淀用水再溶解，除去蛋白質(zhì)等不溶性雜質(zhì)，濃縮干燥，最終得到薏苡仁多糖類組分； 步驟(5):將百合粉碎過篩，用酸性こ醇溶液提取，回收こ醇，回收液用濃氨水堿化，再用氯仿萃取，回收氯仿，干燥，即得百合總生物堿類組分； 步驟(6):百合粗粉殘?jiān)铀逯螅瑸V液濃縮，こ醇沉淀，收集沉淀，沉淀用水再溶解，除去蛋白質(zhì)等不溶性雜質(zhì)，濃縮干燥，最終得到百合多糖類組分； 步驟(7):將以上各步驟得到的組分混合均勻，得到所述的抗肺癌中藥組合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述抗肺癌中藥組合物的制備方法，其特征在干，具體操作步驟是 步驟⑴將靈芝子實(shí)體粉碎過篩，采用超臨界CO2萃取法提取靈芝總?cè)祁惤M分，萃取壓カ為2(T40MPa，萃取溫度為40 50 V ;萃取時(shí)間為I 3 h，夾帶劑(95%こ醇)用量為I 4mL g_1 生藥； 步驟⑵靈芝粗粉殘?jiān)?，加? 14倍量的水煎煮，煎煮次數(shù)為f 3次，毎次f 3h，濾液濃縮，濃縮液醇沉至こ醇濃度(體積百分比)為60、0%，收集沉淀，沉淀用4 10倍量的水再溶解，除去蛋白質(zhì)等不溶性雜質(zhì)，濃縮干燥，最終得到靈芝多糖類組分；步驟(3):將薏苡仁粉碎過篩，采用超臨界CO2萃取法提取薏苡仁油，萃取壓カ為15 25MPa，萃取溫度為30 40で，萃取時(shí)間為I 3 h，夾帶劑(95%こ醇)用量為I 4 mL g—1生藥； 步驟⑷薏苡仁粗粉殘?jiān)?，加? 14倍量的水煎煮，煎煮次數(shù)為f 3次，毎次f 3 h，濾液濃縮，濃縮液醇沉至こ醇濃度(體積百分比)為60、0%，收集沉淀，沉淀用4 10倍量的水再溶解，除去蛋白質(zhì)等不溶性雜質(zhì)，濃縮干燥，最終得到薏苡仁多糖類組分； 步驟(5):將百合粉碎過篩，加入5^10倍量的體積分?jǐn)?shù)為70%-90%的こ醇溶液(含有1%醋酸)提取，提取次數(shù)為廣3次，每次廣3 h，回收こ醇，回收液用濃氨水堿化至pH8 ll，再用等量氯仿萃取21次，回收氯仿，干燥，即得百合總生物堿類組分； 步驟(6):百合粗粉殘?jiān)尤? 14倍量的水煎煮，煎煮次數(shù)為f 3次，毎次f 3 h，濾液 濃縮，濃縮液醇沉至こ醇濃度(體積百分比)為60、0%，收集沉淀，沉淀用4 10倍量的水再溶解，除去蛋白質(zhì)等不溶性雜質(zhì)，濃縮干燥，最終得到百合多糖類組分； 步驟(7):將以上各步驟得到的組分混合均勻，得到所述的抗肺癌中藥組合物。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述抗肺癌中藥組合物的制備方法，其特征在于， 步驟⑴所述的萃取條件為萃取壓カ為30 MPa，萃取溫度為45で;萃取時(shí)間為I. 5 h，夾帶劑(95%こ醇)用量為3 mL g—1生藥； 步驟⑵所述的加水煎煮，是加入10倍量的水煎煮，煎煮次數(shù)為2次，每次I h ； 所述的濃縮液醇沉條件，是濃縮液醇沉至こ醇濃度(體積百分比)為80% ； 所述的沉淀是用6倍量的水再溶解； 步驟⑶所述的萃取條件為萃取壓カ為22MPa，萃取溫度為38 °C ;萃取時(shí)間為2. 5 h，夾帶劑(95%こ醇)用量為3 mL g—1生藥； 步驟⑷所述的加水煎煮，是加入10倍量的水煎煮，煎煮次數(shù)為2次，每次I h ； 所述的濃縮液醇沉條件，是濃縮液醇沉至こ醇濃度(體積百分比)為80% ； 所述的沉淀是用6倍量的水再溶解； 步驟(5)所述的加醋酸こ醇提取，是加入7倍量的體積分?jǐn)?shù)為80%的こ醇溶液(含有1%醋酸)提取，提取次數(shù)為2次，毎次I h; 所述的回收液是用濃氨水堿化至PHlO ； 再用等量氯仿萃取是5次； 步驟(6)所述的加水煎煮，是加入10倍量的水煎煮，煎煮次數(shù)為2次，每次I h ； 所述的濃縮液醇沉條件，是濃縮液醇沉至こ醇濃度(體積百分比)為80% ； 所述的沉淀是用6倍量的水再溶解。
10.權(quán)利要求I所述的抗肺癌中藥組合物在制備抗肺癌藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
抗肺癌中藥組合物、其制備方法及其在制備抗肺癌藥物中的應(yīng)用。該組合物原料藥的重量份組成如下靈芝5~40、薏苡仁5~40、百合1~10。原料藥最佳的重量份組成為靈芝20、薏苡仁20、百合3。該組合物是由靈芝總?cè)啤⑥曹尤视?、百合總生物堿、靈芝多糖、薏苡仁多糖和百合多糖6個(gè)有效組分組成。本發(fā)明所得組合物對(duì)Lewis腫瘤的生長有顯著抑制作用，且組合物配伍給藥后的抗腫瘤活性優(yōu)于單一組分，抑瘤率高達(dá)55.13%。說明采用現(xiàn)代提取分離手段將本藥物組合物中的有效組分最大程度地提取分離，通過配伍組合更好地發(fā)揮協(xié)同抗腫瘤作用。
文檔編號(hào)A61P11/00GK102641448SQ20121014868
公開日2012年8月22日 申請(qǐng)日期2012年5月15日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月15日
發(fā)明者曹偉, 杜萌, 賀俊杰, 陳彥 申請(qǐng)人:江蘇省中醫(yī)藥研究院